三分类血细胞分析仪白细胞分类与手工法结果比较

三分类血细胞分析仪白细胞分类与手工法结果比较曾振炜【摘要】目的探讨日本东亚公司SysmexKX-21三分类血细胞分析仪白细胞分类计数与手工法的方法学差异。方法通过对中山二院门诊检验室随机抽取的87例普通门诊病人的标本进行白细胞分类仪器法与手工法测定，得出两组白细胞分类结果，并进行统计分析。结果87例普通门诊病人血白细胞分类结果显示：中性粒细胞与淋巴细胞计数两种方法无明显差异（P0.05），中间型白细胞计数两种方法有显著性差异(P0.01),仪器法明显高于手工法.中性粒细胞、淋巴细胞与中间型白细胞计数两种方法的相关系数分别为0.8510、0.8373及0.5072。结论SysmexKX-21三分类血细胞分析仪中间型白细胞计数与手工法存在较大的方法学差异，不能作为白细胞分类常规过筛试验指标。【关键词】血细胞分析仪；白细胞分类；手工法ComparetheresultsbetweenthetrisectionAutomaticHematologyanalyzerandthemanualmethodZengzhenwei【Abstract】ObjectiveTostudythemethodologicaldifferencebetweentheinstrumentofthetrisectionautomaticHematologyanalyzerSysmexKX-21producedbyEastAsiaJapanCompanyandthemanualmethod.MethodsThe87bloodsamplescollectedfromtheout-patientdepartmentofTheSecondAffiliatedHosptilofSunYat-senUniversitywereanalyzedwiththeinstrumentofSysmexKX-21AutomaticHematologyanalyzerandthemanualmethod.Theresultswerecomparedandanalyzed.ResultsThe87bloodsamples’leukocyteclassifiedresultsshowedthatW-SCRandW-LCRcountwerenotdifferentbetweenthetwomethods(P0.05),buttherewassignificantdifferenceinW-MCRcountbetweenthetwomethods(P0.01).TheresultsofSysmexKX-21wasapparentlyhigherthanthatofthemanualmethod.ThecorrelationbetweentheresultsfromSysmexKX-21andthemanualmethodwas0.8510,0.8373,0.5072respectivelyforW-LCR,W-SCR,W-MCRConclusionTherewassignificantdifferenceinW-MCRcountbetweentheinstrumentofSysmexKX-21Hematologyanalyzerandthemanualmethod,sotheinstrumentofSysmexKX-21can’tbetheguidelineofgeneralfiltrationforleukocyteclassification.【KeyWords】Hematologyanalyzer;leukocyteclassification;themanualmethod目前，许多大、中、小医院使用各种类型的全自动血细胞分析仪进行白细胞二分类、三分类甚至五分类计数。以三分类全自动血细胞分析仪的应用较普遍。日本东亚公司的SysmexKX-21三分类血细胞分析仪是根据电阻抗变化获得电脉冲信号而将白细胞分为三大类：小型白细胞（W-SCR）、中间型白细胞（W-MCR）和大型白细胞（W-LCR）。其中中间型白细胞包括嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞及原始细胞或幼稚细胞。由于该仪器对中间型白细胞的分辨功能有限，与人工显微镜分类可能存在较大的差异。三分类血细胞分析仪对白细胞分类可否作为常规过筛试验指标，很多学者已做了探讨。我们对一部分门诊病人血白细胞分类进行仪器法与手工法的结果比较，探讨SysmexKX-21三分类血细胞分析仪血白细胞分类与手工法的方法学差异。材料和方法一.材料1.仪器与试剂SysmexKX-21三分类全自动血细胞分析仪配套试剂（日本东亚公司生产）；OLYMPUSCH20双目显微镜（OLYMPUS公司生产）；瑞-姬染液按叶应妩主编的全国临床检验操作规程第二版的要求配制[1]；EDTA-K2（1.5mg/ml）真空抗凝管(广州阳普公司生产)。2.检测对象来自本院门诊检验室的普通门诊病人共87例，随机抽样。二.方法1.质控采用四川省通广制剂公司提供的质控物，每日测定的均值，标准差及变异系数均在质控物的定值范围内。2.对于门诊检验室收集到的标本，先用SysmexKX-21三分类血细胞分析仪测定，并打印结果及白细胞分类直方图，同时制备血涂片两张（一张染色，一张备用），干燥后经瑞-姬染色进行白细胞手工分类，按全国临床检验操作规程第二版操作[1]，并记录分类结果。三.统计方法对仪器法与手工法白细胞分类结果的两组数据以x±s表示，采用t检验统计及相关性回归分析。结果一.87例普通门诊病人血白细胞分类仪器法与手工法结果显示：中性粒细胞与淋巴细胞计数两种方法无明显差异（P0.05），中间型白细胞计数两种方法有显著性差异(P0.01),仪器法明显高于手工法。中性粒细胞、淋巴细胞与中间型白细胞计数两种方法的相关系数分别为0.8510、0.8373及0.5072。结果详见表1表1.87例普通门诊病人血白细胞分类计数结果（x±s）细胞种类仪器法（%）手工法（%）P值r淋巴细胞32.7±8.632.7±10.9P0.050.8510中性粒细胞56.4±8.957.6±11.4P0.050.8373中间细胞11.0±7.59.7±4.1P0.010.5072二.三类细胞计数仪器法与手工法的直线回归分析见图1。淋巴细胞计数仪器法与手工法的比较y=0.6675x+10.839R2=0.7105020406080010203040506070手工法(%)仪器法(%)中性粒细胞计数仪器法与手工法的比较y=0.6701x+17.792R2=0.736020406080020406080100手工法(%)仪器法(%)中间细胞计数仪器法与手工法的比较y=0.4655x+6.4434R2=0.25090.010.020.030.00510152025手工法(%)仪器法(%)图1.87例普通门诊病人血白细胞分类计数仪器法与手工法的比较讨论SysmexKX-21三分类白细胞分析仪是根据电阻抗变化获得电脉冲信号将白细胞分为三大类，白细胞粒度分布采用4条辨别线分3个区域，来辨别小型白细胞，中间型白细胞及大型白细胞。低辨别线（LD）在30至60fl之间的最合适位置上自动决定。高辨别线（UD）固定在300fl，用作粒度分布的异常监视。进一步求出在（LD）和（UD）之间的范围内的WBC粒度分布的谷值，最初的谷值设为TROUGH辨别线1（T1），另一个谷值设为TROUGH辨别线2（T2）。脉冲大小受诸多因素的影响，因此不能很好地反映细胞的真实情况，特别在嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞及异常细胞升高时不能准确识别。87例普通门诊病人血白细胞仪器法与手工法结果显示：中性粒细胞与淋巴细胞计数两种方法无明显差异（P0.05），中间型白细胞计数两种方法有显著性差异(P0.01),仪器法明显高于手工法。中性粒细胞和淋巴细胞计数两种方法结果较一致，但相关系数均小于0.9，中间型白细胞计数两种方法相关系数为0.5072,相关性较差。这可能是因为：一方面，在检测低比率细胞时，仪器测定细胞数目多，而手工只分类100个白细胞并且血片的白细胞可能分布不均匀，所以存在手工漏检的可能。另一方面，手工法可观察到白细胞形态异常如分叶过多、中毒颗粒、空泡变性等异常结构及白血病细胞或肿瘤细胞；当中间型细胞增高时，可具体分类出嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及单核细胞的百分比。综上所述，SysmexKX-21三分类血细胞分析仪中间型白细胞计数与手工法存在较大的方法学差异，不能作为白细胞分类常规过筛试验指标，故应对每份标本检测的同时应进行手工复片,以保证白细胞分类结果的准确性及提高异常细胞的检出率。参考文献[1]叶应妩,王毓三，全国临床检验操作规程[M].第二版，南京：东南大学出版社，1997.5-7.[2]郭红，刘贵健，全自动血液细胞分析仪白细胞分类计数筛选原则的探讨.医疗装备，1999.6：1-2.[3]黄迦血细胞计数分析仪白细胞分类与手工分类的探讨.现代医药卫生，2002.18（1）：41.[4]李筱梅,杨玉宝,李承志等，白细胞分类计数方法学比较.检验医学，2004.19（2）：100-103.[5]沈迎红血液细胞分析仪白细胞分类计数与镜检复核.江西医学检验,2003.21(5):393-394.[6]庞保军,李尚敏关与F-800血细胞计数仪白细胞分类的评价.临床检验杂志,1994,12:231-232.