实验一微生物实验课介绍及要求

微生物学实验课介绍任课教师程立忠（13888812282）王绍辉（13888336373）张理珉（13033364856）余泽芬（13577093398）今天的主要内容1、实验课的目的；2、实验课的内容介绍；3、实验课的具体安排和要求；4、实验安全知识介绍5、环境及人体表面微生物的检测1、实验课的目的掌握微生物实验的基本操作技术并充分得到训练（熟练掌握最好）2、实验课的内容介绍实验课开设的意义实验课所涉及的内容实验课开设的意义微生物学是生命科学中最基础的学科之一，实验技术的独特性和重要性。促进了多个学科的建立和发展——生物化学、分子生物学、生物工程学、免疫学、病毒学等等广泛的应用——基础理论研究、工业、农业、环境、医学、食品等。实验内容无菌操作技术；培养基的制备和消毒灭菌技术；微生物的分离培养纯化技术；菌种的保藏技术微生物制片染色技术；微生物数量和大小测定技术；噬菌体的分离纯化及效价的测定；微生物生理生化反应；乳酸发酵的应用——酸牛奶的制作;3、实验课的具体安排和要求实验课学习要求实验过程的要求实验课安排良好的实验习惯实验报告的形式成绩的评定及组成实验课学习要求认真对待，做好预习，加强自主多发现问题，多和教师交流注重原理，努力创新实验过程的要求实验过程注意安全操作时要预防空气对流接种时不要走动和讲话认真做好环境卫生，做到“干干净净进来，干干净净出去”进出实验室要洗手实验课安排分组——两人一组，登记联系电话；每组准备记号笔和打火机各一个；下午实验课改在13：30上，上午的不变。良好的实验习惯不迟到，不缺席，有事提前请假；迟到5分钟以上以缺席计入实验习惯成绩；爱护实验用具，注意不要损坏；实验完成后认真清洗实验用具，并归位摆放整齐；离开实验室要经教师检查同意后方可离开；认真做好值日生工作，有人具体负责安排检查。实验报告的形式目的要求实验原理实验材料和器材实验方法和步骤实验结果思考题及讨论成绩的评定及组成平时成绩（20%，安排于实验过程中）实验习惯（10%）期末考试（20%，笔试）实验报告（50%）可能组织就实验内容进行答辩，替代期末考试微生物实验用到的仪器设备显微镜（光学——普通、相差、微分干涉差、暗视野；电子——扫描、透射）；高压蒸汽灭菌锅（立式和卧式）；隔水式恒温培养箱；鼓风恒温干燥箱；恒温振荡培养箱（旋转式和往复式）；旋涡振荡器；恒温水浴锅；pH计；分光光度计（紫外、可见光、红外、原子吸收等）；离心机；电泳仪、PCR仪、发酵罐、酶标仪、冰箱；微波炉等。实验用到器械试管（testtube）德汉氏小管（Durhamtube）小塑料离心管，又称Eppendorf管玻璃吸管（glasspipette）微量吸管（micropipette），又称微量加样枪培养皿（petridish）三角烧瓶（erlenmeyerflask）载玻片（slide）和盖玻片（coverslip）滴瓶(dropperbottle)接种工具——接种环、接种针、接种钩、接种铲、接种刀、涂布器（玻璃或不锈钢制作）等。教材用书1．沈萍，范秀容，李广武主编．微生物学实验（第三版）．北京：高等教育出版社，1999（第四版已在出版过程中）主要参考书1．杜连祥，路福平主编．微生物学实验技术[M]．北京：中国轻工业出版社，2005．2．周德庆．微生物学实验教程（第2版）[M]．北京：高等教育出版社，2006．3．杨文博主编．微生物学实验[M]．北京：化学工业出版社，2004．4．赵斌，何绍江主编．微生物学实验[M]．北京：科学出版社，2002．5．东秀珠，蔡妙英主编．常见细菌系统分类和鉴定方法[M]．北京：科学出版社，2001．实验室安全！？实验教学过程中出现的各类突发事故和事件主要有：1、火灾；2、触电；3、跑（漏）水；4、化学品伤害及中毒；5、灼伤；6、割（划）伤。事故预防要求实验过程严格按照操作规范进行；对使用的化学药品试剂、仪器设备、实验器材等清楚其性质和使用注意事项；不在实验室进餐、饮水；实验室严禁明火取暖，实验用到的加热设备在人离开时，关闭加热；清楚实验室或实验楼内配备的防护用具的使用方法和摆放位置（消防设施——灭火器、消防用水、防毒面具，冲淋设施——桌面冲眼器、紧急冲淋设备，通风柜，医药箱等）。事故处理要求先保护好自身的安全，再施救不要慌张，冷静按预案处理认真负责，不推缷责任逐级上报，不隐瞒事故学生衣服着火的对策以灭火「毡」包裹该同学，并把其在地上滚动其他同学立刻通知老师。实验室的窗帘布着火的对策取出灭火器，拔出安全针。把喷咀对准火源。按掣使灭火器喷出二氧化碳。其他同学立刻通知老师。酒精溅在长桌上并着火的对策利用沙桶或湿抹布把燃烧的液体用沙盖着。其他同学立刻通知老师。打破了烧杯，被碎片割伤流血的对策以清水冲洗伤口。贴上干净的消毒胶布。其他同学立刻通知老师。化学药品溅进学生的眼睛内的对策用桌面上冲眼器以大量清水冲洗眼睛。其他同学立刻通知老师。学生在倾倒酸时意外地接触到酸的对策立刻以大量清水冲洗患处最少五分钟。其他同学立刻通知老师。实验物品常见警告标识符号灭火器及其使用方法实验一：实验室环境及人体表面微生物的检测检查实验室空气中及各人手上的微生物（细菌为主），并加以统计、比较和描述（数量、菌落形态等）。使学生认识到微生物无处不在，以便在以后的实验中重视无菌操作。强调对微生物感性认识。一、目的要求因为微生物个体较小，肉眼难以看到，但其实际上它们广泛分布于室内外、水、空气和土壤中；环境微生物的检测及观察有利于建立起“微生物无所不在、无孔不入”的概念，形成自身良好的卫生习惯，认识到在微生物实验中无菌操作的重要性。二、实验原理平板培养基含有微生物生长所需的营养成分，当不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，1~2天内每一菌体细胞即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个肉眼可见的细胞群体（菌落）；每种微生物都有其特有的菌落形态，一般情况下一个菌落对应一个微生物活细胞，这样就可以统计不同微生物在某样品中的数量。三、实验材料及器材牛肉膏蛋白胨培养基平板3个；洗手液、酒精灯、记号笔、恒温培养箱等。四、实验方法及步骤1、实验室空气中微生物检查2、手上微生物检测取一无菌牛肉膏蛋白胨琼脂平板，打开皿盖（扣放，开始计时），使培养基暴露于空气中30分钟，盖上皿盖，在37℃下倒置培养24~48小时，观察结果，统计微生物数量。1、实验室空气中微生物检查取一个牛肉膏蛋白胨琼脂平板，用记号笔在平板底部（外面）划线等分成2半，用手指在其中一半上摩擦几下（不能把培养基划破）；然后用肥皀洗手，用同一手指在另一半上摩擦几下，在37℃下倒置培养24~48小时，观察结果，统计比较洗手前后的微生物数量及菌落种类。2、手上微生物检测附：菌落特征描写方法如下①大小大、中、小、针尖状。可先将整个平板上的菌落粗略观察一下，再决定大、中、小的标准，或由教师指出一个大小范围。②颜色黄色、金黄色、灰色、乳白色、红色、粉红色等。③干湿情况干燥、湿润、粘稠④形态圆形、不规则等⑤高度扁平、隆起、凹下⑥透明程度透明、半透明、不透明⑦边缘整齐、不整齐五、思考题1、将你在平板上观察到的结果填入下表样品来源菌落数(近似值)菌落类型特征描写大小形态干湿高度透明度颜色边缘洗手前1234洗手后1234空气中12342、洗手前后的手指平板，菌落数有无区别，为什么？3、通过本次实验你有什么感受体会？下周的实验内容实验二培养基配制、相关器皿的包扎及消毒灭菌重点：培养基的概念、分类、配制过程及注意事项；相关器皿的规范包扎及要求；消毒、灭菌的概念和方法，灭菌器的使用。