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^弋^^1^2019-8-13微生物学教程绪论1.微生物概念,特点和类群?答:微生物是所有形体微小、单细胞或结构较为简单的多细胞生物、甚至没有细胞结构的低等生物的通称。微生物的特点:个体微小;构造简单;进化地位低。微生物类群十分庞杂,包括:无细胞结构的病毒、类病毒、拟病毒等;属于原核生物的细菌、放线菌、蓝细菌、立克次氏体、衣原体、支原体等;属于真核生物的酵母菌和霉菌,单细胞藻类、原生动物等。2.微生物的5大共性?答:体积小、面积大;吸收多、转化快;生长旺、繁殖快;适应强、易变异;分布广、种类多。第一章1.什么是芽孢和芽孢晶体,其特点?答:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造,称为芽孢。芽孢的特性:对高温、干燥、辐射、化学药物有强大的抵抗力;含水量低、壁厚而致密,通透性差,不易着色,折光性强;芽胞内新陈代谢几乎停止,处于休眠状态,但保持潜在萌发力;一个芽孢萌发只产生一个营养状态的细胞。少数芽孢杆菌,在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一个菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白晶体(即δ内毒素)称为伴胞晶体。2.细菌的概念及其繁殖方式?答:细菌是一类细胞细短、结构简单、细胞壁坚韧、以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。细菌的繁殖方式主要为裂殖(包括二分裂、三分裂、复分裂),只有少数种类进行芽殖(芽生细菌)。3.革兰氏阴性致病菌细胞壁中与毒力有关的结构?答:类脂A缺壁细胞包括:L型细菌、原生质体、球状体、支原体4.细菌的基本结构有哪些,各自的功能?答:所有细菌都有:细胞壁、细胞膜、细胞质与内含物、核区;细胞壁的主要功能:①固定细胞外形和提高机械强度,从而使其免受渗透压等外力的损伤;②为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需;③阻拦大分子物质(酶蛋白和某些抗生素)进入细胞;④赋予细菌具有特定的抗原性、致病性以及对抗生素和噬菌体的敏感性。细胞膜的功能:(P19)①控制细胞内外物质(营养物质和代谢废物)的运送、交换;②维持细胞内正常渗透压的渗透屏障作用;③合成细胞壁各种组分(LPS、肽聚糖、磷壁酸)和荚膜物质等大分子的场所;④进行氧化磷酸化或光合磷酸化的产能基地;⑤提供鞭毛的着生点并提供鞭毛运动所需能量。^弋^^2^2019-8-135.革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的特点?答:革兰氏阳性菌的细胞壁特点是厚度大和化学组分简单,一般含90%肽聚糖和10%磷壁酸;革兰氏阴性菌的细胞壁特点是厚度较革兰氏阳性菌薄,层次较多,成分较复杂,肽聚糖层很薄,故机械强度较革兰氏阳性菌弱。6.细菌的特殊结构有哪些,各自的功能?答:鞭毛、菌毛、性菌毛、糖被、芽孢;鞭毛功能主要是运动,具有抗原性,可依此2点对细菌进行鉴别(鞭毛数目);菌毛:普通菌毛:有致病作用,主要是与黏膜细胞粘附,如淋球菌;性菌毛:在细菌间传递遗传物质,如R质粒。糖被的功能:(P23)①保护作用;②贮藏养料,以备营养缺乏时重新利用;③作为透性屏障或(和)离子交换系统;④表面附着作用;⑤细菌间的信息识别作用;⑥堆积代谢废物。•芽胞:使细菌具有对外界不良环境具有抵抗力;临床上依芽胞的有无作为灭菌、杀菌是否彻底的指标;根据芽胞大小、位置和数目鉴别细菌。7.如何判断细菌是否具有运动功能?答:是否有鞭毛,判断方法:光学显微镜(悬滴法)、光学显微镜(特殊鞭毛染色)、半固体穿刺培养;8.放线菌的典型构造包括哪些,各自的功能?答:放线菌:大部分放线菌由分枝状的菌丝组成,菌丝大多无隔膜,属单细胞。菌丝的粗细与细菌中的杆菌宽度相近。典型的放线菌链霉菌的菌丝根据形态和功能不同可分为基内菌丝,气生菌丝和孢子丝。其他的放线菌所特有的形态构造:基内菌丝会断裂成大量杆菌状的放线菌,菌丝顶端形成少量孢子的放线菌,具有孢囊并产生孢囊孢子的放线菌,具有孢囊并产生游动孢子的放线菌繁殖:放线菌主要通过形成无性孢子的方式进行繁殖,也可以借菌丝断片进行繁殖。无性孢子主要有分生孢子和孢囊孢子。9.菌落、菌苔的含义?答:菌落:在固体培养基上,由单个细胞繁殖形成的肉眼可见的子细胞群体。菌苔:大量细胞密集生长,结果长成的各“菌落”连接成一片。10.革兰氏染色的过程和机理?答:革兰氏染色的过程第一步:结晶紫使菌体着上紫色;第二步:碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物,分子大,能被细胞壁阻留在细胞内;第三步:酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,出现不同的反应;第四步:沙黄复染,增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌。革兰氏染色的机理G﹢菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。第二章1.什么是假菌丝,什么是菌丝体?答:假菌丝:酵母菌在一定条件下培养,产生的芽体与母细胞不分离形成的藕节状特殊形态。当霉菌孢子在适宜的基质上发芽生长出菌丝,许多分枝菌丝相互交织在一起构成菌丝体。2.真菌一般包括哪些种类?^弋^^3^2019-8-13答:真菌是最重要的微生物,一般包括单细胞真菌——酵母菌、丝状真菌——霉菌、大型子实体真菌——蕈菌。3.酵母菌的细胞壁主要成分及其主要繁殖方式,酵母菌的生活史有哪些类型及代表菌属?答:酵母菌的细胞壁主要成分:外层:主要为甘露聚糖;中间层:主要是蛋白质;内层:主要为葡聚糖。其繁殖方式:分无性繁殖和有性繁殖两大类,主要是无性繁殖(包括芽殖、裂殖和产生无性孢子)。酵母菌的生活史可分为三种类型:营养体只能以单倍体形式存在(单倍体型),以八孢裂殖酵母为代表;营养体只能以二倍体形式存在(双倍体型),以路德类酵母为代表;营养体既能以单倍体也能以二倍体形式存在(单、双倍体型),以啤酒酵母为代表。4.霉菌一般代表种类有哪些?答:曲霉、病原真菌、青霉等。5.真核生物鞭毛的结构特点和运动方式?答:结构特点:伸出细胞外,“9+2”型的鞭杆、嵌埋在细胞质膜上的基体、连接基体和鞭杆的过渡区。运动方式:弯曲运动。第三章1.什么是烈性噬菌体和温和噬菌体,其增殖方式分为哪几个阶段?答:烈性噬菌体:指感染宿主细胞后,短时间内能完成自身复制并使宿主细胞裂解的噬菌体。温和噬菌体(或溶源性噬菌体):噬菌体感染细胞后,将其核酸整合(附着)到宿主的核DNA上,并且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制,在一般情况下,不引起寄主细胞裂解的噬菌体。烈性噬菌体的繁殖过程一般分为五个阶段:吸附、侵入、增殖、成熟(装配)和裂解(释放)。2.按照宿主的不同,一般将病毒分为哪几类?答:根据宿主可以分四类:原核生物病毒——噬菌体;植物病毒;昆虫病毒;动物病毒(人类和脊椎动物病毒)。3.病毒的主要形态有哪几类?答:球状病毒(脊髓灰质炎病毒);杆状病毒(烟草花叶病毒);弹状病毒(狂犬病毒);丝状病毒(大肠杆菌的fd噬菌体);砖形病毒(天花病毒);卵圆形病毒(痘病毒);蝌蚪状病毒(大肠杆菌的T偶数噬菌体)。4.一步生长曲线及其各期的含义?答:以培养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐标,绘制的定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线为一步生长曲线。可分以下三阶段:潜伏期、裂解期、平稳期。潜伏期:从噬菌体吸附细菌到细菌细胞释放新的噬菌体之前的这段时期。曲线平行于横轴,噬菌体数无变化。样品中无游离的噬菌体。(潜伏期前的噬菌斑数是噬菌体数,也就是感染噬菌体的细菌数)。裂解期:曲线直线上升,子代噬菌体不断释放到培养基中,直到达到一个极限。平稳期:感染细胞后复制的子代噬菌体全部释放,噬菌斑数稳定,一次感染结束。、5.病毒有哪些特点?答:病毒的特征:形体极其微小;没有细胞构造;每一种病毒只含有一种核酸;既无产能酶系也无生物大分子合成酶系;通过核酸的复制和核酸蛋白装配的形式进行增殖;在离体条件^弋^^4^2019-8-13下,以无生命的生物大分子状态存在;对一般抗生素不敏感,但对干扰素敏感;有些病毒的核酸能整合到宿主的基因组。6.病毒粒有哪几种对称形式?各举一例。答:螺旋对称的杆状——植物的烟草花叶病毒;二十面体对称的球状——动物中的腺病毒;上述两种复合对称的其他形状——微生物中的E.coliT偶数噬菌体。第四章1.什么是培养基,按照成分和物理性状分别可分为哪些类型,固体培养基的凝固剂?答:培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。它是进行科学研究,发酵生产微生物制品等的基础。按对培养基成分的了解分类:天然培养基、组合培养基、半组合培养基;按培养基外观的物理状态分类:液体培养基、固体培养基、半固体培养基、脱水培养基;按培养基对微生物的功能分类:选择性培养基、鉴别培养基。固体培养基的凝固剂——琼脂1.5~2%或明胶5%~12%。2.选用和设计培养基时,应该遵循的原则?答:4个原则:目的明确;营养协调;理化适宜;经济节约。3.基础培养基、鉴别培养基、选择培养基、加富培养基的含义?答:基础培养基:含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质,可供大多数细菌生长。鉴别性培养基:在培养基中加入某种特殊化学物质,某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物,而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。如伊红美兰培养基,常用于检测饮水或乳品中是否含有肠道致病菌.选择性培养基:是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基,广泛用于菌种筛选等领域。加富性选择培养基:利用某种分离对象对某种营养物有特殊“嗜好”的原理,专门在培养基中加入该营养物。4、微生物的6大营养要素是什么,生长因子一般包括哪些?答:微生物的6大营养要素:碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水;广义的生长因子主要包括维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶(碱基)及其衍生物,此外还有甾醇、胺类、脂肪酸等等。狭义的生长因子一般就是指维生素。5、水活度的含义?如何减少水活度?答:水活度:即aw,表示在天然或人为环境中,微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。其定量涵义为:在同温同压下,某溶液的蒸气压(P)与纯水蒸气压(Po)之比。因此,aw也等于该溶液的百分相对湿度值(ERH),即:aw=P/Po=ERH/100。各种微生物生长繁殖范围的aw值在0.998~0.60之间。第五章1.什么是生物氧化,其特点是什么,根据过程可分为哪几个阶段?答:生物氧化:发生在活细胞内的一系列产能性氧化反应的总称。生物氧化特点:细胞内的酶促反应;氧化反应放能分段进行;放能一部分以化学能形式储存于能量载体中;真核生物氧化在线粒体中进行;原核生物在细胞膜上进行。生物氧化的过程可分脱氢(或电子)、递氢(或电子)、受氢(或电子)三个阶段。2.什么是发酵,细菌酒精发酵是通过何种途径进行?答:在生物氧化中,发酵是指无氧条件下,底物脱氢后所产生的还原力不经过呼吸链传递而直接交给一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。在发酵工业上,发酵是指任何利^弋^^5^2019-8-13用厌氧或好氧微生物来生产有用代谢产物的一类生产方式。细菌酒精发酵的途径是通过ED途径的发酵。3.什么是营养缺陷型菌株,以赖氨酸发酵为例了解应用营养缺陷型菌株解除正常的反馈调节?答:营养缺陷型菌株:因突变而丧失产生某种生物合成酶的能力,并因而成为必须在培养基中添加某种物质才能生长的突变类型菌株。为了解除正常的代谢调节以获得赖氨酸的高产菌株,工业上选育了Corynebacteriumglutamicum(谷氨酸棒杆菌)的高丝氨酸缺陷菌株作为赖氨酸的发酵菌株。由于它不能合成高丝氨酸脱氢酶,因此不能合成高丝氨酸,也就不能产生苏氨酸和甲硫氨酸,在补充一定的高丝氨酸(或苏氨酸和甲硫氨酸)的条件下,可在含较高糖浓度和铵盐的培养基上,产生大量的赖氨酸。4.什么是反硝化作用?答:由硝酸盐还原成NO2–并进一步还原成N2的过程(广义)。狭义的反硝化作用仅指由亚硝酸还原成N2的过程。条件:厌氧(淹水的土壤或死水塘中)。菌种:少数异养和化能自养菌。如:地衣芽孢杆菌、脱氮副球菌、铜绿假单胞菌、
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