FDA-PI染色精要

大肠埃希氏菌CMCC44752肺炎克雷伯氏菌CMCC46117大肠埃希氏菌ATCC35218金黄色葡萄球菌ATCC29213金黄色葡萄球ATCC25923大肠埃希氏菌ATCC25922大肠埃希代菌ATCC44102金黄色葡萄球菌ATCC26113FDA/PI染色操作步骤1、溶液配制（1）0.65mol/L甘露醇配制：称1.1841g甘露醇加入10mL蒸馏水。（2）5mg/mLFDA配制：称25mgFDA加入1mL丙酮酸溶解，再加入4mL甘露醇，摇匀，避光4℃保存。（3）2mg/mLPI配制：称2mgPI加入1mL甘露醇，摇匀，4℃保存。2、染色（1）从冰箱中取出FDA及PI，复温摇匀，FDA尽量避光。（2）取羊膜放置于有0.5ml生理盐水的EP管中，加入8μLPI和10μLFDA，后用0.6ml生理盐水冲洗管壁，室温放置15min.，要求尽量避光；（3）1.5mlPBS冲洗，取出羊膜，置于载玻片上，用镊子整平，滴加少量PBS，盖上盖玻片。3、镜检（1）染色完成后，将片子放于小盒中避光，迅速送去检验。（2）由于荧光显微镜是倒置显微镜，所以，盖玻片面要朝下放置。