Fish的应用

Fish的应用1、乳腺癌患者的Her2/neu基因检测：研究显示，Her2基因过表达除与乳腺癌的发生发展有关外，还是一个重要的临床预后不良指标，同时，该基因过表达的患者对一些乳癌治疗的常规药物也显示出了耐药性。2002年美国FDA批准了一种全新的药物Herceptin，这是一种人源化的针对Her2受体的单克隆抗体，该药物无论是与常规化疗联合用于乳癌患者的辅助治疗，还是用于辅助治疗后的维持治疗，以及用于晚期乳癌患者的单药或联合治疗，都能肯定的改善Her2过表达患者的生存，使乳癌患者在上述常规治疗进步的基础上进一步获益。目前认为FISH是检测Her2这条EGFR通路是否过度活化的金标准。2、胎儿常见染色体数目异常的检测：胎儿染色体数目异常是新生儿出生缺陷的常见原因之一。临床研究表明，我们开展的FISH检测项目涉及染色体数目异常发生率较高的为13、18、21、x、Y号染色体，其异常发生率占染色体数目异常的80％～95％。羊水中胎儿脱落细胞的FISH检测是目前国际上较为先进的检测染色体及某些单基因异常的方法，检测过程不但简单、快速（48h），而且特异性较强，为产前诊断和细胞分裂后期染色体分离的研究开辟了新途径。3、膀胱癌脱落细胞的FISH检测：近年来，随着肿瘤细胞遗传学和分子遗传学研究的进展,人们发现9号染色体部分(如p16位点)或全部丢失是最常见遗传学改变,且这一改变与膀胱癌早期发生密切相关。此外，膀胱癌的发展与染色体的不稳定性也紧密相连，特别是3号、7号、17号染色体的非整倍性密切相关。目前的临床研究显示，对尿液中脱落细胞进行以上遗传学改变的检测对膀胱癌（包括尿路上皮肿瘤）的早期诊断及预后评估具有很大意义，其灵敏度高于细胞形态学检测，特异性则与细胞形态学相当。检测以上遗传学改变的标准方法为FISH技术。目前在欧美等国，非创伤性及非痛苦性的FISH技术已成为临床检测膀胱癌最有效的方法之一。4、子宫颈病变与TERC基因的检测：世界范围内,宫颈癌发病率居女性生殖系统恶性肿瘤第二位。早期诊断和治疗是改善患者预后的关键。目前，细胞学筛查仍存在敏感性低,重复性差,不明意义的涂片结果较多等不足。虽然已有针对HPVDNA的实验,但是,由于大多数妇女HPV感染是暂时的,使HPVDNA实验的阳性预测值较低。研究发现，宫颈细胞由非典型性向癌转变过程中几乎都伴有3号染色体长臂扩增,其中涉及到的最重要基因可能是人类染色体末端酶基因(humantelomerasegene,hTERC)。FISH方法hTERC基因检测预测CINⅠ/Ⅱ进展到CINⅢ的敏感性是100%,特异性是70%,表明检测hTERC基因可作为预测CINⅡ/Ⅲ发展到宫颈癌的指标,可以早期发现癌前病变发展到宫颈癌的危险几率,为宫颈癌提供了一种有用的生物遗传学监测指标。5、应用间期核荧光原位杂交(FISH)技术检测淋巴瘤遗传学改变间期核FISH方法分别与标记基因IGH/BCL-2、IGH/CCND1、API2—MALT1的三组探针进行杂交,检测染色体易位:t(14;18)、t(11;14)、t(11;18）目前研究确定至少40%的DLBCL涉及3q27染色体易位或者BCL6基因重排。BCL6基因重排的检测对于DLBCL具有辅助诊断意义。BCL6基因易位位点比较复杂，主要有t(3;14)，t(3;22)和t(2;3)3种易位。传统的细胞遗传学分析方法由于BCL6位于3q染色体末端以及其复杂的易位方式，对BCL6的检测受到限制。同时，细胞遗传学方法可检测到的3q27断裂结果未必在是对BCL6基因起作用的[9]。应用PCR或者SouthernBlot检测BCL6散在断裂点也非常困难，且常规PCR检测要设计复杂的引物来检测所有可能的易位重排情况，无法满足常规诊断需要；BCL6基因主要断裂点的缺失及突变也会影响SouthernBlot结果判定。另外，由于BCL6蛋白的表达和BCL基因的重排没有直接的关联，免疫组化也不能用于评价BCL6易位的情况。Offit研究小组分析了102名DLBCL患者的BCL6和bcl-2的重排情况及其与预后的关系。结果显示，23例患者出现BCL6重排，21例患者出现bcl-2重排。诊断治疗36个月后，BCL6阳性患者疾病停止发展的比率为82%，同时BCL6和bcl-2阳性患者康复率为56%，bcl-2阳性患者康复率为31%。携带有BCL6重排的病例预后较好,而那些有BCL2重排但无BCL6重排的患者似乎预后最差。研究小组认为，携有BCL6重排的DLBCL可能与携有其它遗传学异常的DLBCL具有不同的生物学行为，BCL6基因是独立的评价生存率和康复率的检测指标。综上所述，BCL6基因断裂检测具有以下临床意义：1.BCL6基因重排的检测可以辅助诊断DLBCL2.BCL6基因断裂的检测可以判断预后