AgilentG1600A操作规程

文件编号：作业指导书第1页，共6页AgilentG1600A毛细管电泳操作规程批准人颁布日期1.概述为保证检测工作的正常使用，特制定该仪器的使用操作规程。本规程适用于AgilentG1600A毛细管电泳的使用与维护。2.编写依据本规程依据产品使用说明书和中国药品检验标准操作规范(2005年版)编写。3.职责3.1仪器操作人员：主要负责按此规程对该仪器进行使用，并及时做好实验记录，并对数据负责。3.2仪器管理人员：主要负责对该仪器的保养与定期核查，并及时做好保养、维修、核查记录，并对记录负责。3.3科室负责人：负责检测设备使用、核查及维修保养的监督实施。4.技术要求4.1环境要求：温度，5-40℃；湿度，15%-80%。4.2直流电：电压，200-240V；频率48-55Hz或57-66Hz。4.3空间要求：AgilentG1600A毛细管电泳仪由仪器主机和工作站计算机组成，检测器为二极管阵列检测器。应有足够的空间放置主机、工作站计算机和配套打印机，仪器背部距离墙等支撑物至少80mm。5.仪器操作与数据采集5.1开机前的准备工作5.1.1根据检测需要确定毛细管的种类与尺寸，将毛细管装入卡套后插入仪器定位装置。5.1.2打开主机正面下方的小门，检查缓冲液瓶(左侧)和废液瓶(右侧)瓶盖是否拧紧(废液瓶的废液不可太多)，否则均影响系统的真空度。5.1.3所有样品与缓冲液使用前必须经超声除气及0.45微米或0.22微米微孔滤膜过滤。5.1.4观察毛细管的进口端(inlet)与出口端(outlet)是否有样品瓶。如有小瓶，最好清空样品池。在开机之前，确认样品池内49号位置无样品瓶，否则系统可能初始化会发生故障。5.2开机5.2.1打开仪器主机、工作站计算机主机及显示器开关，仪器开始自检。文件编号：作业指导书第2页，共6页AgilentG1600A毛细管电泳操作规程批准人颁布日期5.2.2双击工作站桌面上的Instrument1online(在线)图标进入化学工作站，工作站进入【Method&RunControl】界面。5.2.3初始化在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，点击【Instrument】中的【SystemINIT】，系统开始初始化。仪器进行初始化时，禁止其他任何操作。自检通过后，画面左侧的仪器状态显示窗口将显示仪器处于【Ready】状态(绿色)。如仪器状态显示窗口显示仪器处于【NotReady】状态(红色)，在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，点击【Instrument】中的【NotReadyInfo】(或在画面中点击【CEState】)，出现【NotReadyInformation】对话框，查询原因。5.2.4打开样品池，放入将缓冲液和样品小瓶，记录相应位置。为便于记录样品瓶及信息保存，建议放入好样品瓶后，点击【Instrument】中的【SystemVialtable】,输入相应进样瓶位置的名称。5.3仪器方法的建立建议在离线工作站上建立新的仪器方法。5.3.1在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，点击【Method】中的【EditEntireMethod】。5.3.2在【EditEntireMethod】界面下，选择需要编辑的项目。在【MethodInformation、InstrumentAcquisition、DataAnalysis、RunTimeChecklist】四项全部或部分选“√”，点击【OK】。5.3.3在【MethodInformation】输入相应的方法信息，点击【OK】。5.3.4在【Homevalues】界面输入基本参数5.3.4.1设定LiftOffset值(小瓶底部与毛细管末端的距离)，默认值为4mm。5.3.4.2设定CassetteTemprature(卡盘温度)值或设为【OFF】(即室温)。5.3.4.3设定Vials的进口端(inlet)与出口端(outlet)的缓冲瓶号。完成上述设定后，点击【OK】。5.3.5进入【conditionding】界面，编辑预处理和更新溶剂参数。在Replenishmentandpreconditioningshouldbeprocessed中选择【Serial】方式(也可根据需要选择【Parrallel】方式)。在【preconditioning】中，选择【UseTable】功能，按【Edit】键，出现【preconditioning】对话框，可编辑柱老化程序。文件编号：作业指导书第3页，共6页AgilentG1600A毛细管电泳操作规程批准人颁布日期5.3.6在【Injecting】界面，编辑进样参数。可选择的方式有加压进样(PRESSURE)、电动进样(加电压或电流)和使用程序进样。5.3.7在【Electric】界面，编辑电参数。在【ElectricSwitch】栏中，选择【ON】。在【Polarity】窗口中，选择极性。选择【positive】时，毛细管进样端加正电压；选择【negative】时，毛细管进样端加负电压。出口端电极总是零电位。在【Voltage】窗口中输入电压值(输入范围0-30KV或设置为Syslimit，即系统极限值)。在【Power】窗口中输入功率值(输入范围0-6.0W或设置为Syslimit，即系统极限值)。在【Current】窗口中输入电压值(输入范围0-300μA或设置为Syslimit，即系统极限值)。在【Loweralarmlimitofcurrent】窗口输入报警电流下限(或设置为OFF)。5.3.8在【TimeTable】对话框中，设置以下参数：StoreData(原始数据存储)选择储存于数据文件的原始数据，包括：Voltage、Current、Power、Pressure、Tempreture，在所需项目前选“√”。Time设置Stoptime(分析停止时间)和Posttime(后运行时间)。TimeTable(对某些事件编制时间程序)可设定运行于某一时间下列参数的值：电压、电流、功率、压力、Inlet、Outlet、Tempreture、AlarmLimit、polating。5.3.9在【DADSignal】界面中设置检测器参数。在【Signal】栏中，设定检测波长、参比波长和带宽，最多可选择储存5个波长的信号。参比波长和狭缝宽度可以设置为缺省(即设置为OFF)。在【Spectrum】栏中，在下拉式【Store】窗口中，选择是否存储光谱图及采集光谱图的方式、Range(光谱图的波长范围)、Threshold(峰阈值)。在【Peakwidth】栏中，设置峰宽。在【Autobalance】栏中，根据实验需要，选择【Prorun】或【Postrun】。在【Timetable】中编辑检测器时间表。5.3.10保存方法在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，选择【Method】，点击【SaveMethod】或【SaveMethodAs】功能，或在工具栏中，按【保存文件】图标按钮给方法命名，保存。5.4调出方法文件文件编号：作业指导书第4页，共6页AgilentG1600A毛细管电泳操作规程批准人颁布日期5.4.1若方法已存在，可在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，选择【Method】中的【LoadMethod】或在工具栏中，按【打开文件】图标按钮，或者在【DataAnalysis】界面的【File】，点击【Load】中的【Method】。然后进入【LoadMethod】对话框，选择方法文件，按【OK】键，调出分析方法文件。5.4.2修改参数如有必要，在【Instrument】命令栏下选择各种命令，调出各种参数界面，可修改相应的参数。5.5运行5.5.1输入小瓶参数在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，选择【instrument】,点击【SystemVialtable】，出现【EditSystemVialtable】对话框后，输入分析方法所使用的小瓶的参数。5.5.2在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，选择【instrument】,点击【Capillaries】，出现【EditCapillaries：instrument】对话框后，输入已安装的毛细管的参数。5.5.3在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，选择【instrument】,点击【SelectCEMode】，出现【SelectCEMode】对话框，在下拉式窗口中，选择【CE】模式，按【OK】键。5.5.4在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，选择【Runcontrol】，点击【SampleInformation】功能,出现【SampleInformation】对话框，输入样品相关信息。5.5.5在在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，选择【Runcontrol】，点击【Run】功能(或直接点击Start),开始分析。@@@注意：检测器灯的预热时间不得少于30min。5.6数据分析在工作站【Method&RunControl】界面的命令栏中，选择【View】，点击【DataAnalysis】，或在工具栏中，打开下拉式“画面”窗口，点击【DataAnalysis】,出现数据处理画面。5.6.1调用色谱图在命令栏【File】下，点击【LoadSignal】,选择色谱图文件名，单击【OK】，即可显示出所需色谱图(或在工具栏中，按【打开图标】按钮)。5.6.2积分在命令栏【Integration】,点击【Integrate】功能，或在工具栏中，按【Integrate】按钮，仪器即按内置的积分参数给出所调色谱图的积分结果。如欲对某些参数文件编号：作业指导书第5页，共6页AgilentG1600A毛细管电泳操作规程批准人颁布日期进行修改，可单击【IntegrateEvent】功能，出现积分参数表，可重新设置积分参数。5.6.3校正在命令栏【Calibration】下，可建立校正工作曲线及输入校正表参数。5.6.4打印报告在命令栏【Report】下，可设定报告模式及打印报告。5.7关机5.7.1分析结束后，在工作站【Method&RunControl】界面的菜单栏中，选择【Instrument】，点击【MoreDAD】中【Control】功能，出现【DADControl:Instrument1】对话框，在【Lamp】栏中，点击【OFF】(或点击画面中检测器标志，选择【Lamp】，点击【OFF】)，按【OK】键。5.7.2每次分析结束后，系统必须用水进行冲洗。5.7.3在工作站【Method&RunControl】画面的菜单栏中，在【File】下选择【Exit】，单击【Yes】，退出工作站。5.7.4关闭主机及工作站电源开关。文件编号：作业指导书第6页，共6页AgilentG1600A毛细管电泳操作规程批准人颁布日期6.注意事项6.1基线的波动可能原因：A噪音的不断增大可能缘于未充分过滤的缓冲液、样品及不洁净的小瓶B当加压时电流强度下降C无电流D漏电(在图形用户界面里的电流以黄色条带显示)E紫外信号的基线波动可能归结于接头连接问题(?),也可能源于检测池进气泡、微粒(来自不洁净的操作台、小瓶或者来自破损的毛细管末端)F检测池未恰当清理。如果微粒进入高灵敏度检测池，就可能导致产生气泡和(或)基线噪音的增加。当气泡增大时，就会产生基线的大幅漂移或波动和电流的下降。为避免产生上述问题，你可能需要以下操作：1.重新安装毛细管等配件；2.使用脱气的缓冲液，检查缓冲液与样品小瓶里是否有气泡；3.用缓冲液长时间冲洗高灵敏度检测池和毛细管(大约10min)，然后加压50mbar持续5min；4.使用2微米的滤器过滤缓冲液和样品或者在洁净室(cleanroom)配置缓冲液。5.如步骤1-4均未改善图谱状况，则用1NNaOH在40-60