AMSEL产品介绍

14January1983TheAmericanJournalofMedicineVolume74翻译说明《AMESL标准》是1983年在美国医学期刊上发表的一篇学术文章，研究是由西雅图华盛顿大学医学院的微生物学博士AMSEL先生与其团队做的一项临床研究。文章的结论推荐了一个新的NSV的诊断标准，后来该标准被全球很多国家采纳，并纳入本国的诊断标准，至今在临床上仍具有一定的指导意义。到1991年NUGNT推荐了革兰氏染色打分法，这个标准由统治地位变成选择性地位。本研究在结论推导过程中，充分分析了线索细胞与加德纳杆菌，以及阴道pH，胺试验以及分泌物特征之间的关系，这些数量关系对项目组开发产品的软件具有一定的借鉴意义，建议广发阅读。受专业背景限制，翻译中如有不准确或者不清晰之处，请读者借鉴原文。翻译人：牛丹丹翻译时间：2014年2月8日NONSPECIFICVAGINITIS:DIAGNOSTICCRITERIA—AMSELETAL.January1983TheAmericanJournalofMedicineVolume7415临床学术研究非特异性阴道炎（NSV）微生物学和流行病学的关系及其诊断标准作者RICHARDAMSEL,M.D.,M.P.H.PATRICIAA.TOTTEN,M.S.CAROLA.SPIEGEL,Ph.D.KIRKC.S.CHEN,Ph.D.DAVIDESCHENBACH,M.D.KINGK.HOLMES,M.D.，Ph.D.Seattle,Washington以上几名学者来自西雅图华盛顿大学公共卫生及社区医学院的流行病学与病理科，医学院医学妇产科。本研究属于国家健康计划A112191项目以及XX（项目号见英文原文）等等项目及机构支持赞助完成。由于缺少统一的定义和标准的实验室方法，很多以前有关NSV的学术研究在其病因和临床症状上得出了相反的结论。我们随机连续选取397名在校女大学生的样本，并采用规定好的几个标准组合（套）对其进行NSV与其他阴道炎和正常结果进行区分。使用这个标准，我们抽样人群被诊断为NSV的比率为25%，在诊断为NSV的人群中，有50%的人是无症状的。以前临床诊断NSV，基于医生办公室的简单程序，仅仅考虑加德纳杆菌的存在和浓度，并辅助阴道分泌物的特定生化反应进行确诊。其实NSV还和患者的性生活历史，滴虫发病史以及当前使用非障碍性避孕装置，尤其是宫内节育器有关。与以前其他研究使用的培养基相比，本研究使用高选择性的培养基，从较低浓度的阴道分泌物中分离出加德纳杆菌，因此有51.3%的样本培养出加德纳杆菌，因此推荐为新的可操作临床诊断标准，这个标准的推行将有助于对NSV的临床管理，尤其有助于这种中度又广泛发病的疾病的微生物学和生物化学相关性的研究。NONSPECIFICVAGINITIS:DIAGNOSTICCRITERIA—AMSELETAL.January1983TheAmericanJournalofMedicineVolume7416阴道炎是临床上的常见诊断，霉菌性和滴虫性两种特异性阴道炎非常容易识别和治疗。相反，非特异性阴道炎即NSV，MrGardnerandDukes认为它是与革兰氏阴性菌（嗜血杆菌）强相关的第三种阴道炎，比较难诊断。最近，Mr.McCormack的研究声称：阴道分泌物异常和嗜血杆菌无关，而Mr.Pheiferetal却从100个NSV患者样本中，有94个样本被培养得到嗜血杆菌，只有6个没有嗜血杆菌。对这种生物体分类一直存在争议，直到最近才将它们划入一个新的类属：加德纳杆菌。有些针对加德纳杆菌的流行病学研究已经展开。其中有报告称：在黑人中，婚姻不稳定群体，口服避孕药或者性传播疾病人群发病率更高。还有报告称，女性患者的男性伴侣也有较高的发病率，导致一些工作人员认为加德纳杆菌属于性传播疾病，但是还没有其他证据表明，这是一种性传播疾病。有两种原因可能造成非特异阴道炎诊断的争议。（1）很多工作焦点都集中在加德纳杆菌的微生物属性，而不是疾病；太多不同的方法用来识别、培养这种微生物。（2）缺少统一定义应用到参与临床研究的样本。因此临床表现的混淆和混乱也就不足为奇了。然而，除了霉菌和滴虫外，阴道炎的构成是一个非常常见的临床诊断，现在似乎已经影响到一些治疗方案。因此，目前建立一个可接受的诊断NSV的标准非常重要。本研究的目的就是通过对高校女生样本来验证目前可能的诊断标准的可行性，研究NSV的微生物和流行病学与诊断标准之间的关系。材料和方法研究人群：连续跟踪397名到华盛顿大学学生健康中心妇科门诊就诊的高校女生，她们看的都是一个医生。经期的女生、服用过抗生素或者在以前接受过阴道治疗的患者不被统计在内。每个病人就诊前填写了保密问卷：个人基本信息、月经史、生殖道症状、怀孕史、避孕史。每个就诊者都是由一个医生接诊,而且生殖道检查记录要求填写在一个标准的表格里，以便于方法的标准化和观察。临床方法：在阴道检查过程中，使用拭子对阴道壁和后穹窿处进行取样。使用pH试纸直接测量拭子的pH值。随后这个拭子会用来培养阴道加德纳杆菌。第二个拭子与前取样方法相同，滴入两滴盐水在载玻片上，然后拭子与盐水混合，用来观察线索细胞。这个拭子在另外一个载玻片上与10%的氢氧化钾混合，这个载NONSPECIFICVAGINITIS:DIAGNOSTICCRITERIA—AMSELETAL.January1983TheAmericanJournalofMedicineVolume7417玻片在盖上盖玻片之前进行氨气实验。之后这个氢氧化钾湿片用来检查念珠菌的存在。第三个样本的取样：在阴道后穹窿处加入2毫升蒸馏水，与该处阴道分泌物进行混合，然后将稀释的分泌物用拭子取样放入旋盖玻璃样本管中，冷藏保存直到送往实验室进行生化试验。生化方法：第三个经稀释的样本的pH由pH仪测得，这个样本采用聚酰胺片薄层色谱法进行主要的腐胺和尸胺的检测。通过此半定量的方法测得两种胺含量在中、高值的，判定为异常值；而检测结果是无或者微量的，则判定为正常。本次研究的样本中，对99个二次分类的样本采用气-液色谱分析检测挥发性和非挥发性有机酸，这种检测方法由SPIEGAL标准规定。微生物方法：本研究中前136个样本被接种到含有GC琼脂基础的培养皿(巧克力琼脂)，培养基为BBL和5%的羊血巧克力琼脂。另外261个样本被接种到含有粘菌素、萘啶酸、两性霉素B（HB）的人血琼脂双面板上进行培养。后者的培养和识别阴道加德纳杆菌的方法在其它学术文章中描述过[14]。NSV的诊断标准：几个近期研究发现达成共识的,或报告提及的与特异性阴道炎强相关的诊断方法被机械的组合成四套诊断标准：这些被达成共识的诊断标准为(1)薄的、同质的阴道分泌物;(2)阴道pH＞4.5;（3）胺试验阳性;(4)阴道分泌物胺含量异常;(5)出现线索细胞，后文还有详细的描述。根据这些诊断标准将样本分类为患有NSV或正常。统计方法：耶茨校正的卡方检验，费歇尔检验法，t测试。结果研究人群的特点：397个就诊样本中妇科症状有：表现为阴道炎症状（阴道分泌物，阴道异味，外阴瘙痒）140人（35.3%);避孕咨询人数为93人(23.4%);年度体检51人(12.9%);盆腔痛29人(7.3%);月经失调24人(6.0%);其他原因45人（11.3%）)。NSV的诊断：四套诊断标准分别用来评估这些样本，结果用患有NSV、正常来表示，（表一）列出结果。是否被检查出加德纳杆菌也作为判别是否患有NSV的标准。还表明了线索细胞的普遍性，那些套标准中并没有完全包括这一诊断发现。当出现其他生殖感染这一附加标准时结果是相似的，附加标准也会显示在各套标NONSPECIFICVAGINITIS:DIAGNOSTICCRITERIA—AMSELETAL.January1983TheAmericanJournalofMedicineVolume7418准之内。表一根据多种标准诊断NSV，311样本的统计表上面统计表中去除了72个患有其他生殖道感染和14个信息不全的样本用来诊断的4套标准分别为A,B,C,DA=PH＞4.5，NSV分泌物特征、阳性氢氧化钾胺试验；B=PH＞4.5，NSV阴道分泌物特征、阳性氢氧化钾胺试验,异常胺值中任意三项符合C=PH＞4.5，NSV阴道分泌物特征、阳性氢氧化钾胺试验,线索细胞中任意三项符合D=PH＞4.5，NSV阴道分泌物特征、阳性氢氧化钾胺试验,异常胺值、线索细胞中任意三项符合++标示HB琼脂分离，$表示不符合，线索细胞被包含到诊断标准中NSV的发病率：使用每个标准得到的NSV的发病率从12%～25%，使用所有标准共同诊断得到发病率超过20%，阴道霉菌感染发病率16%，阴道滴虫发病率2%。阴道PH与NSV诊断的关系：我们假定样本符合前面提到的3个发现（标准）中的任意两个标准，可被诊断为NSV。这三个标准分别是，线索细胞、胺试验、均匀的阴道分泌物。对符合任意2个条件的样本，进行pH检测，检测范围从小于4.0到大于6.1。患有NSV的阴道pH均有上升，其中4.5是个分界点。在NSV的75个样本中只有14个(19%)PH值≤4.5，而236个正常样本中158个样本(67%)PH≤4.5微生物学结果：加德纳杆菌在NSV的检出率远远高于未患有NSV样本。这一点在巧克力琼脂和HB(羊血)琼脂的两个培养实验上均得到验证。（通过HB琼脂培养出现加德纳杆菌与被选取用来诊断为NSV的对照，详见表一）。实验中来诊的女学生中，加德纳杆菌总体的出现率为51%，数据请见表二。由HB琼脂培养所得的阴道加德纳杆菌的浓度低于由巧克力琼脂培养所得。由巧克力琼脂培养的结果小于4+占比为19%（9of48），从HB琼脂培养结果小于4+为49%（66of134），(p＜0.001）NONSPECIFICVAGINITIS:DIAGNOSTICCRITERIA—AMSELETAL.January1983TheAmericanJournalofMedicineVolume7419为研究线索细胞和非特异阴道炎以及加德纳杆菌的关系，线索细胞并未被纳入某个诊断标准（A套）中。使用其它标准（套）诊断的NSV患者中，线索细胞的存在率为85%～97%。而在非患者中，线索细胞的存在率为5%～14%（表一）。在HB培养结果中，加德纳杆菌阳性的样本中有38%的样本中带有线索细胞，然而线索细胞的存在和加德纳杆菌培养结果的浓度强相关(p＜0.001)(数据见表III).表二不同培养基所得培养加德纳杆菌半定量结果我们进一步评价了阴道加德纳杆菌数量与NSV临床诊断的关系。选取的诊断结果来自表一中B（套）标准，即：pH＞4.5，NSV分泌物症状，氢氧化钾气味阳性，异常的胺，任意三项符合即判断为NSV。选取这些标准进行下一步研究是因为，标准包含了客观所见异常胺值（通过层析法），而不是根据是否存在线索细胞（已经证明和加德纳杆菌的浓度相关或许就是粘有加德纳杆菌的细胞）。根据标准B被诊断患有NSV的，98%胺值检测阳性，97%pH异常，80%的阴道分泌物异常，氨气实验异常的占76%。。204个采用HB培养的样本中，有105个带有阴道加德纳杆菌。在105个加德纳阳性的样本中，只有41（39%）根据标准B诊断为NSV。其中53个培养结果大于4+，30个(57%)被诊断为NSV。相反的，99个未被培养出加德纳杆菌的样本，被诊断为NSV的只有3个。表三线索细胞和半定量培养加德纳杆菌的关系NONSPECIFICVAGINITIS:DIAGNOSTICCRITERIA—AMSELETAL.January1983TheAmericanJournalofMedicineVolume7420阴道液气-液色谱分析：通过对带有NSV临床特征的女性阴道分泌物液体的气相液相色谱分析已经得到有机酸特征模式[13]。这个模式认为有机酸是由于与NSV相关的某些厌氧细菌产生的。使用诊断标准B,在22个被诊断NSV的女性中，与乳酸杆菌相关的琥珀酸浓度升高有19个，60个非NSV患者中，琥珀酸值升高的有1个。在