870《生物化学》考试样题20150608

《生物化学》考试样题一、名词解释(2.5分×12,共30分)等电聚焦电泳NADPH核酶酶的活性中心乙醛酸循环糖异生作用多顺反子分子伴侣反馈抑制第二信使二、选择题（从备选答案中选出1个正确答案，1分×20，共20分）1.下列哪个途径不发生在胞浆内()(A)糖酵解(B)磷酸戊糖途径(C)脂肪酸合成(从头合成)(D)三羧酸循环2下列酶中哪个是三羧酸循环的限速酶：()（A）丙酮酸脱氢酶（B）顺乌头酸酶（C）琥珀酸脱氢酶（D）异柠檬酸脱氢酶3．当酶促反应速度为Vmax的80%时，Km与[S]之间的关系为（）(A)Km=0.8[S](B)Km=1/4[S](C)Km=1.25[S](D)Km=0.2[S]......三、是非判断题(1分×15,共15分；正确的标√，错误的标×)1.淀粉、糖原和纤维素都属于均一多糖。（）2.肽平面是指肽键的所有4个原子和与之相连的两个α碳原子，形成的具有一定刚性的平面，以便使肽链保持结构上的相对稳定性。（）3.聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于分离蛋白质，但不能分离核酸。（）4.在竞争性抑制中，底物、抑制剂争相与酶结合，但这种结合是不可逆的。（）5.同工酶是指能催化同一种化学反应，但其分子结构却有所不同的一组酶。（）6.Southern印迹用于分析RNA,而Northern印迹用于分析DNA。（）7.种子发芽时可将脂肪转化为糖，有可能是通过乙醛酸循环来实现的。（）8.非糖物质合成葡萄糖的过程称为糖异生，是糖酵解途径的简单逆转。（）9.四氢叶酸是一碳单位的载体，它在嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成中发挥重要作用。（）10.已从大肠杆菌中分离到DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶Ⅲ。其中DNA聚合酶Ⅰ是一个多亚基酶，是主要负责DNA复制的酶。（）11.启动子是指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。（）12.密码子专一性主要由前两位碱基决定，第3位碱基的重要性不大，此称为密码子的兼并性。（）13.在原核生物mRNA前体的加工中，其5’端形成帽子结构，3’端加上多聚腺苷酸（polyA）尾巴。（）14.代谢途径阻断可通过加入酶抑制剂或采用基因敲除的手段来实现。（）15.根据当前认识，限制性核酸内切酶识别DNA的序列多属回文结构。（）四、简答题(1-2题每题5分，3-7题每题6分,共40分)1.列举3种生物化学领域的英文刊物，以及您如何利用网络资源获取生化方面的研究信息。2.简述聚合酶链反应（PCR）的原理和应用。3.简述蛋白质的二级结构和超二级结构。4.简述磷酸戊糖途径及其生物学意义。5.凝胶过滤层析(gelfiltrationchromatography)与亲和层析的原理有何不同？6.琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯凝胶电泳的原理有何不同？7.简述RNA聚合酶的结构及其在基因转录的作用。五、分析论述题(15分×3,共45分)1.撰文叙述复制、转录、翻译等不同水平上遗传信息的传递、表达与调控。2.已知某大肠杆菌的基因序列，请设计实验(1)用PCR从基因组中克隆．．该基因，构建．．表达该基因的工程菌；(2)如何从培养液中分离．．纯化．．所表达的蛋白。要求写出各自原理、仪器及操作步骤。3.下面英文摘自2015年2月的JBiolChem，翻译下列英文或者指出其中所蕴含的生化知识、原理和技术手段。TheEscherichiacolidgtgeneencodesadGTPtriphosphohydrolasewhosedetailedrolestillremainstobedetermined.Deletionofdgtcreatesamutatorphenotype,indicatingthatthedGTPasehasafidelityrole,possiblybyaffectingthecellulardNTPpool.Inthepresentstudy,wehaveinvestigatedthestructureoftheDgtproteinat3.1-Åresolution.Oneoftheobtainedstructuresrevealedaproteinhexamerthatcontainedtwomoleculesofsingle-strandedDNA.ThepresenceofDNAcausedsignificantconformationalchangesintheenzyme,includinginthecatalyticsiteoftheenzyme.DgtpreparationslackingDNAwereabletobindsingle-strandedDNAwithhighaffinity(Kd∼50nM).DNAbindingpositivelyaffectedtheactivityoftheenzyme:dGTPaseactivitydisplayedsigmoidal(cooperative)behaviorwithoutDNAbuthyperbolic(Michaelis-Menten)kineticsinitspresence,consistentwithaspecificloweringoftheapparentKmfordGTP.AmutantDgtenzymewasalsocreatedcontainingresiduechangesintheDNAbindingcleft.Thismutantenzyme,whereasstillactive,wasincapableofDNAbindingandcouldnolongerbestimulatedbyadditionofDNA.WealsocreatedanE.colistraincontainingthemutantdgtgeneonthechromosomereplacingthewild-typegene.Themutantalsodisplayedamutatorphenotype.OurresultsprovideinsightintotheallostericregulationoftheenzymeandsupportaphysiologicallyimportantroleofDNAbinding.