Bio-Rad_PTC200PCR仪使用与维护SOP

Bio-Rad_PTC200PCR仪使用与维护SOPFZ-YQ-50.001.03第1页/共8页起草：刘阳日期：2007.10.24审核：邹强日期：2007.11.07批准：王伦安日期：2007.11.15生效日期：2007.12.01签字：修订号生效日期制定（变更）原因及目的：012006.12.01开始按SOP管理022007.12.01补充主要性能参数032010.11.10补充基本操作抄送分子生物学[1]份组织病理学[]份细胞培养室[]份天然产物[]份SPF级动物[]份精密仪器室[]份准备室[]份技术档案室[1]份Bio-Rad_PTC200PCR仪使用与维护SOP1适用范围本SOP适用于Bio-Rad_PTC200PCR仪的使用与维护保养。2职责2.1操作人员：认真执行本SOP的内容，并作好相关记录。2.2设备管理员：培训、指导操作人员正确执行本SOP，同时需按本SOP对设备进行定期维护保养并作好相应记录。3主要性能参数样品基座为96孔×0.2ml。带温度梯度功能。半导体控温，温度范围：-5℃～105℃；温度变化速率为：3℃/秒；控温精度为±0.3℃，孔间温差为±0.4℃。温度梯度变化范围：1～24℃热盖可调高度和压力，保证可靠的无油操作。4主要应用范围应用于常规PCR扩增与梯度PCR扩增。5FrontViewAlphaunit,lidclosed:Alpha单元闭合盖Thumbwheel:压轮Controlpanel:控制面板Airexhoustvents:出风口Airintakevents:进风口图1Bio-Rad_PTC200PCR仪前视图Bio-Rad_PTC200PCR仪使用与维护SOPFZ-YQ-50.001.03第2页/共8页6BackViewAlphaunit:Alpha单元Alphaunithandle:Alpha单元把手Powerswitch:电源开关Powercordjack:电源线插座RS-232port:RS-232接口Parallelprinterport:并行打印机接口IEEE-488port:IEEE-488接口Airexhoustvents:出风口Airintakevents:进风口图2Bio-Rad_PTC200PCR仪后视图7Controlpanel图3Bio-Rad_PTC200PCR仪控制面板Blockstatuslights:基座选择指示灯。Instantincubationkey:恒温孵育键。进入恒温设置程序。Powerlight:电源指示灯。打开电源开关，指示灯变红。Blockkey:基座选择键。用于双头基座切换。LCDwindow:液晶显示屏。Leftandrightselectionkeys:左右选择键。用于移动光标和在运行程序时查看时间或循环信息。Proceedkey:确定键。接受当前选择进入下一步，在运行程序时跳过当前步骤进入下一步。Cancelkey:取消键。取消当前选择，放回上一步或结束正在运行的程序。8基本操作8.1开机8.1.1打开电源开关（图2），电源指示灯变红。系统进入自检，显示屏显示如图4。Bio-Rad_PTC200PCR仪使用与维护SOPFZ-YQ-50.001.03第3页/共8页图4系统自检图5主菜单8.1.2系统自检完后，进入主菜单，显示屏显示如图5。系统自检大约持续1分钟，请耐心等待，切勿在系统自检时操作控制面板。8.1.3主菜单Run:运行1个已保存的程序。Enter:建立1个新程序。List:显示已保存的程序。Edit:编辑已保存的程序。Files:进入文件夹管理程序。Setup:进入系统设置。8.2操作功能8.2.1RUN----运行1个已保存的程序8.2.1.1主菜单中选择Run,按«Proceed».屏幕显示存储中所有的文件夹，包括MAIN菜单和用户自己创建的文件夹。8.2.1.2选择程序所在的文件夹后，按«Proceed»进入。显示该文件夹里的程序，移动光标选中程序，按«Proceed»确认。8.2.1.3选择样品容器的类型：先选择所使用容器的类型(PCR管还是PCR板)，按«Proceed»确认。8.2.1.4输入样品的反应体积（在最后一行显示），输入样品的反应体积（微升），按«Proceed»确认。如果样品上有油或蜡，输入的样品的体积应包含油或蜡的体积。注意：反应体积不应少于10微升。做反应体积为5微升的样品时，请确定管子的密封盖是否盖紧。8.2.1.5选择是否使用热盖，选择Yes或No，按«Proceed»，程序开始进入运行状态。8.2.1.6运行过程中的其他功能：转换运行时间与主菜单的显示：按«Block»可使屏幕在实时显示和主菜单之间转换；程序运行结束：当程序完成时，仪器会发出长蜂鸣音提示操作者，同时显示运行时间；若有必要也会显示一些出错信息，按«Proceed»可回到主菜单；程序跳步步骤：当程序运行时，按«Proceed»可以直接运行程序的下一步；暂停运行：按«Pause»可暂时中止运行程序。这时在显示屏的右下角的运行时间显示会被“Pause”字符PTC-200MAINFOLDER1FOLDER2FOLDER3....RUN：2-STEPVesselType:TUBESPlate....RUN：2-STEPVesselType:TUBESVolume(μl):10....Bio-Rad_PTC200PCR仪使用与维护SOPFZ-YQ-50.001.03第4页/共8页代替，再次按«Pause»或«Proceed»键后，程序会继续运行，否则样品的温度停留在显示的温度。在温度未达到设定的温度之前，如果按«Pause»键，仪器仍继续升温或降温，在温度达到设定值后，程序暂停。停止运行程序：按«Stop»或«Cancel»键可停止运行程序。停止后，仪器显示程序的全部运行时间，再按«Proceed»可返回主菜单。注意：关机不会结束程序运行。仪器会假设程序因断电停止运行并且在开机后自动继续运行该程序。（长达24小时到7天的断电保护功能）。断电保持功能：如果PTC-200在运行程序过程中断电，系统自动保持该程序的运行步骤（24小时到7天）。当电源恢复后，仪器自动从断电时的停止点开始运行程序，按«Proceed»后，系统会立即开始运行程序。8.2.2ENTER----建立1个新程序8.2.2.1进入编写状态，从主菜单选择Enter，按«Proceed»确认；8.2.2.2给程序命名：程序名最多可由包含8个不同的字符，可以是字母（罗马或希腊）、数字、标点符号或日本字母。通过选择键《》，《》，选用各种字母、字符来组成程序名，选中字符后按《Proceed》确认输入,则光标向右移动，输入下一字符。在最后一个字符输入后连续2次按《Proceed》，确认程序命名结束。若输入的程序名与仪器内原有的程序重名，则出现“NameInUse”，表示此程序名已被使用，可按《Proceed》重新输入；8.2.2.3选择温度控制方法：输入程序名后，系统会提示操作者选择一种温度控制方法，如下：•CALCULATED：计算控制，为使样品温度达到设定温度，通过综合考虑样品管类型、样品体积等参数，估算出模块应达到的温度而进行调节。这种方法避免了温度传递时产生的误差给实验结果带来的负面影响。•Block：模块控制，直接控制模块温度，而不是样品温度。•Probe：探针温度，仪器通过探针测得的温度调节模块温度。通常，探针控制需要小心使用。8.2.2.4输入程序步骤：选择温度控制方法后，显示输入菜单：•Temp：温度语句，输入需要运行的温度。•Gradient：梯度语句，输入梯度PCR运行的温度范围。•Ramp：输入斜率，改变升降温速率。一般出厂默认执行最快变温速率，若要调整只能降低温度变化率。•End：结束程序。8.2.2.5设置温度（范围为-5℃至105.0℃）与时间：从菜单中选择Temp，按«Proceed»。开始第一步的温度设置，用键盘输入目标温度，按«Proceed»确认，光标移至下一行，输入温度持续时间。如图：键入温度为92℃，时间为30s。Enter:Name:AO....Enter:CUSTOM1Controlmethod:_CALCULATEDBlockProbeName:ARecoveredat20.2°O....Enter:CUSTOM1Step1:_TEMPGradientRampEndName:ARecoveredat20.2°O....Bio-Rad_PTC200PCR仪使用与维护SOPFZ-YQ-50.001.03第5页/共8页注意：如果输入的持续时间为0，仪器会在设定的温度上无限期的保持运行，也不会进入下一个程序。同样应避免编写温度持续时间只有几秒的程序，这会引起模块或机身过热，导致在显示屏上显示“HSOverheating”或“PSOverheating”出错信息，如果模块或机身内温度超出允许的最大温度值时仪器甚至会自动关机。8.2.2.6按«Proceed»确认后，要求用户选择下一步骤：Yes：确认完成，进入程序下一步骤的设置；No：重新输入目标温度和持续时间；Option：显示特性菜单。进入特性菜单可实现用户对特殊实验的特殊编程。8.2.2.7设置循环步骤：从第二步开始，程序可使用循环语句。在输入菜单中选择GoTo。屏幕显示：8.2.2.8按«Proceed»确认后，提示输入还需增加循环多少次，例如需循环10次，则输入9。按«Proceed»确认。8.2.2.9设置结束步骤：从主菜单选择End，结束程序设置。8.2.2.10选择要储存程序的文件夹，按«Proceed»确认后，显示返回主菜单。8.2.3List----查看程序内容8.2.3.1从主菜单中选择List并按«Proceed»进入。共有两个选项：显示程序内容和显示温度梯度。8.2.3.2选择查看程序，光标移至Programes前，按«Proceed»键。选中要显示的程序,按«Proceed»键进入，连续按«Proceed»键可查看程序每一步后面的内容，包括各种特性。按«Proceed»将程序进行到最后一步或按«Cancel»键可返回到主菜单。注意:查看程序时，不能对该程序进行编辑。Enter:CUSTOM11=Temp°C:_O....Enter:CUSTOM11=92.0°Time:30O....Enter:CUSTOM11=92.0°for0:30OK?_YESNoOptionO....Enter:CUSTOM15=GoToGoTostep:_O....Enter:CUSTOM13=GoTo2Addtnlcycles:_O....Enter:CUSTOM14=EndOK?_YESNoO....Saveprogramin:MAINFOLDER1FOLDER2O....正在编写的步骤循环返回到第几步Bio-Rad_PTC200PCR仪使用与维护SOPFZ-YQ-50.001.03第6页/共8页8.2.4Edit----编辑已储存的程序：使用主菜单中的Edit可以：修改程序步骤中的个别值；增加新的步骤；删除步骤；增加温度和斜率特性。8.2.4.1进入编辑状态：从主菜单中选择Edit，按«Proceed»进入编辑画面，此时屏幕显示内存中所有的文件夹，用光标键选择待编辑程序所在的文件夹，按«Proceed»打开文件夹，光标选定文件，按«Proceed»打开文件即可。8.2.4.2编辑程序：若要改变温度控制方法，直接将光标移到相应的选项前，按«Proceed»确认；若要改变其他参数，移动光标到任意要改动的位置，用键盘输入新值，并按«Proceed»确认。如需要取消修改，按«Cancel»，恢复原来的设置。8.2.4.3增加或删除步骤：将光标移至相应步骤的编号下，按«Proceed»后会显示相应的编辑菜单：•Edit：显示上一级菜单，移动光标可进