生物化学答案

1P77~78习题参考答案3Fischer式Haworth式构象式β-D-脱氧核糖CCH2CCCH2OHHOHOHHOHOOHHCH2OHHHHOHHOHCH2OHOHHHHHHOα-D-半乳糖CCCCCCH2OHOHHOHOHHHOHHOHOCH2OHHHOHOHHHHOHHOOCH2OHHOHHOHHHOHOHHβ-L-山梨糖CCCCCH2OHOHHOH2COHOHOHHHOOHHOH2CHHOOHHCH2OHHOOHHOHHHHOH2CCH2OHOHFischer式Haworth式构象式β-D-N-乙酰神经氨酸（唾液酸）OHHCH3CONHHHOCOO-OHHHOH2COHHHOHHOHOHCOO-HHOHCH3CONHHHCH2OHHOHHOHCOO-CCH2CCCCCOHOHOHOHHAcNHOCH2OHOHHHH20三糖β-半乳糖苷酶2D-半乳糖+D-葡萄糖其中的糖苷键均为β型糖之间的连接为半乳糖-半乳糖-葡萄糖CH2OAcHCCHCHHCCH2OCH3OCH3CH3OCH3OOAc2，3，4，6-四甲基-1，5-二乙酰基-半乳糖醇CH2OAcHCCHCHHCCH2OAcOCH3CH3OCH3OOAc2，3，4-三甲基-1，5，6-三乙酰基-半乳糖醇CH2OCH3CHCHHCCHCH2OCH3CH3OCH3OOCH3AcO1，2，3，5，6-五甲基-4-乙酰基-三梨醇NaBH4还原再乙酰化2OOCH3OCH3OCH3CH2OCH3CH2OCH3CHCHHCCHCH2OCH3CH3OCH3OOCH3HOOOCH3OCH3OCH3CH2OHOOCH3OCH3OCH3OH2COOCH3OCH3OCH3CH2OCH3OOCH3OCH3OCH3CH2OCH3CH2OCH3水解甲基化NaBH4还原OOH2COCH2OHOOHCH2OHCH2OHOOH2COCH2OHOOCH2OHP121习题解答10：疏水部分亲水部分COOCH2R1R2COOCHCH2OPOO-OCH2CH2NH3+a疏水部分亲水部分bCNHCHCH2CHOHCH2OPO-OXOCH3（CH2）12CHR1O疏水部分亲水部分cCNHCHCH2CHOHCH2CH3（CH2）12CHOGalOR疏水部分亲水部分d寡糖链（含唾液酸）CNHCHCH2CHOHCH2CH3（CH2）12CHOORHO疏水部分亲水部分e鞘磷脂PC磷脂酶C×DAG+磷酸胆碱（油溶）（水溶）鞘磷脂PC鞘磷脂PC磷脂酶C磷脂酶C×DAG+磷酸胆碱（油溶）（水溶）15：3P155作业订正H3N+（CH2）4CHCOOHNH3+H2N（CH2）4CHCOO-NH2H3N+（CH2）4CHCOO-NH3+H3N+（CH2）4CHCOO-NH2pKCOOHpKα-NH3+pKε-NH3+000.80.2平衡时R-R0R+R2+pH=pKε-NH3++lgR-R0=10.53+lg0.2/0.8=9.92pKCOOH平衡时R0R+Me2CHCH2CHCOOHNH3+Me2CHCH2CHCOO-NH3++H+0.3-xxxx20.3-x=10-2.36xpH=-lg[H+]=-lgx=1.464a：4b：平衡时R-R0Me2CHCH2CHCOO-NH3+Me2CHCH2CHCOO-NH20.3-xxxpKa9.6＜pKH2O+H+x20.3-x=10-9.6xpH=-lg[H+]=-lgx=11.5H3N+CH2COO-H3N+CH2COOHH++pKa1=2.34初始010平衡0.30.7？pH=pKa1+lg=2.34+lg=2.71（加0.3MHCl）R0R+0.70.3H++H3N+CH2COO-H2NCH2COO-pKa2=9.6初始100平衡0.70.3？pH=pKa2+lg=9.6+lg=9.23（加0.3MNaOH）R0R-0.70.364His2+His+HisHis-pK1=1.82pKR=6.0pK2=9.178pH=pK1+lg[His+]/[His2+]即6.4=1.82+lg[His+]/[His2+]pH=pKR+lg[His]/[His+]即6.4=6.0+lg[His]/[His+]pH=pK2+lg[His-]/[His]即6.4=9.17+lg[His-]/[His][His2+]+[His+]+[His]=0.25AspGlyThrLeuLyspI2.985.976.535.989.74pI-pH02.973.532.986.74pH3.0带电荷0+++++++淋洗顺序:Asp＞Thr＞Gly＞Leu＞Lys(Thr含侧链-OH,Leu含大的疏水残基)15补充1：指出用电泳技术分离下列物质，pH是多少最适合，并说明理由？（6分）。①血清清蛋白（pI=4.9）和血红蛋白（pI=6.8）②肌红蛋白（pI=4.6）和胰凝乳蛋白酶（pI=9.5）③卵清蛋白（pI=4.6）和脲酶（pI=5.0）。解：电泳分离技术中，被分离质点所带净电荷差异越大，分离效果就越好，所以应取两者的pI的中间值，带正电的向负极移动，带负电的向正极移动。因此，①最佳pH=5.8；②最佳pH=8.2；③最佳pH=4.9。P194习题解答：25A肽（八肽）DNFBDNP-AspVal羧肽酶胰蛋白酶糜蛋白酶A肽的N末端为AsporAsnA肽的C端为ValH+Lys、His、Asp、Glu2、Ala、Val、Tyr+2NH3××××Lys，pH6.4时电荷为0（组成：Asp、Glu、Ala、Tyr、Lys）××Val，pH6.4时带正电荷（组成：His、Glu、Val）DNFBDNP-HisHis.Gln.Val组成：Lys、His、Glu2、Val，pH6.4时带正电荷组成：Asp、Ala、Tyr，pH6.4中性Asn.Ala.TyrA肽为Asn.Ala.Tyr.Glu.Lys.His.Gln.Val四肽胰蛋白酶ε280max，Pauly和坂口反应呈阳性BrCN茚三酮黄色片段片段氨基酸Tyr.ArgMet.ProTyr.Arg.Met.Pro8补充1：某肽经BrCN水解得到三个肽段，这三个肽段的结构分别为Asn.Trp.Gly.Met，Gly.Ala.Leu，Ala.Arg.Tyr.Asn.Met；用胰凝乳蛋白酶水解也得到三个肽段，其中一个为四肽，用6mol/LHCl水解此四肽只得到（Asp）2和一个Met三个氨基酸，请推导出此肽的氨基酸序列。解：胰凝乳蛋白酶BrCN四肽某肽Asn.Trp.Gly.MetGly.Ala.LeuAla.Arg.Tyr.Asn.Met肽段肽段6mol/LHCl（Asp）2+Met该四肽含Trp该肽的氨基酸序列为：Ala.Arg.Tyr.Asn.Met.Asn.Trp.Gly.Met.Gly.Ala.Leu65H3N+LysLysLysCOOHNH3+NH3+NH3+pk28.95pkR10.53pk12.18H3N+LysLysLysCOO-NH3+NH3+NH3+H2NLysLysLysCOO-NH3+NH3+NH3+H2NLysLysLysCOO-NH2NH3+NH2pI=pKR+Lg质子受体质子供体=10.53+Lg2/31/3＞pK1pK2pKRP249习题解答5：pH7.0时：②polyIle③polyArg⑥polyThr⑦polyPro：不能形成α-螺旋∵②侧链的空间位阻大；③侧链带相同电荷；⑥侧链有OH；⑦亚氨基酸①polyLeu:能形成α-螺旋④polyArg（pH13））：能形成α-螺旋（侧链解离，不带电荷）⑤polyGlu（pH1.5）：能形成α-螺旋（侧链不解离，不带电荷）P348习题解答：122800×10×10-615×60=3.11×10-5mol/s①每mg酶每秒钟水解的底物1×6×10-3120000=5×10-8mol②每mg酶中含的活性中心③3.11×10-55×10-8=622mol/s.mol酶活中心Kcat=补充1：某酶制剂的比活力为42U/mg酶蛋白，每毫升含12mg蛋白质，试计算当底物浓度达到饱和时，1mL反应液中含：①20μL酶制剂时的反应初速度；②5μL酶制剂时的反应初速度（单位为国际活力单位）；③该酶制剂在使用前是否需要稀释？解：由题意知：每mL酶制剂含有42×12=504U①20μL酶制剂含有20×10-3×504=10.08U酶促反应的初速度为10.08μmol/mL.min②5μL酶制剂含有5×10-3×504=2.52U，酶促反应的初速度为2.52μmol/mL.min7③一般情况下，酶制剂都应当稀释，以便在适当的实验期间内底物不被过分消耗，如：10分钟内，1mL反应液内含5μL酶制剂，消耗的底物为：（2.52μmol/mL.min）×10min=2.52×10-2mol/L。因此，为了保证底物的消耗低于5%，必须使[S]＞0.5mol/L。如此大的底物浓度是很难达到的，所以酶制剂在使用时应当稀释。补充2：己糖激酶催化葡萄糖磷酸化时，Km=0.15mmol/L，催化果糖磷酸化时，Km=1.5mmol/L。假如两种反应的Vmax相同：①写出己糖酶催化葡萄糖和果糖磷酸化的反应式；②分别计算葡萄糖和果糖为底物时，[S]=0.15、1.5、15mmol/L时，酶催化反应的V0是多少？解：①Mg2+,HKADPATPGlucoseG-6-POCH2OHOCH2OPO32-F-6-POCH2OHCH2OHOCH2OHCH2OPO32-ATPADPFMg2+,HK；②根据米氏方程，计算结果如下：[S]，mmol/L0.151.515葡萄糖，V00.5Vmax0.91Vmax0.99Vmax果糖，V00.091Vmax0.5Vmax0.91Vmax补充3：乳酸脱氢酶（LDH）催化下列反应，已知NAD+在340nm处无光吸收，而NADH在340nm处有光吸收，请设计测定LDH活性的实验方法。CH3CHCOO-OHCH3CCOO-ONAD+NADH+H+LDH解：由于NAD+在340nm处无吸收，而NADH在340nm处有吸收，因此根据一定时间内NADH的生成量（测A340的大小）的多少既知LDH活力的大小。LDH的活力单位定义为：在最适条件下，每分钟在340nm下的光吸收增加0.1个单位定为1个活力单位。13：设：1U=1μgTyr/min825mg酶粉25mL酶液取0.1mL：蛋白质1500μgTyr/h取2mL：测蛋白质N0.2mg0.2×6.252=0.625mg/mL⑴每mL酶液中Pr含量=⑶1g酶制剂的总蛋白含量=0.625×1000=625mg总活力=250×1000=2.5×105U15001×60×0.1=250U每mL活力单位=⑵比活力=250/0.625=400U/mg14：1U=1g淀粉/h∵1g淀粉酶制剂1000mL1mL，测得0.25g淀粉/5min取∴1000×0.255/60=3000UP381习题解答31/[S]1/v80020060040010001200140016000.020.040.060.081Vmax1Km-=-42000=0.0141Vmax1Km-=-42000=0.014Vmax=75mmol/L.minKm=2.5×10-5mol/L○○○○○●●●●●×10293.01.02.02.04.06.08.010.012.014.016.018.020.022.024.0×10-2×105v1[S]1无I有I1Vmax1Vmax`==0.0211Km-1Km`-1Km-=-0.95×1051Km`-=-0.35×105○●●●●●●●●●●8由图可知Vmax=Vmax`=47.62μmol/L.min∴该抑制为竞争性抑制。Km=1.05×10-5mol/L,Km`=2.86×10-5mol/LKm`=Km(1+[I]/Ki)=1.05×10-5(1+2×10-3/Ki)Ki=1.16×10-3mol/L10：由图可知:①Km=5×10-4mol/L②Vmax=6μmol