细胞生物学实验教学大纲

《细胞生物学》实验教学大纲课程编码：10271015课程名称：细胞生物学英文名称：CellBiology实验课学时：28适用对象：医学、药学专业本科生指导教材：，《基础医学实验教程》（第1版）李凡主编高等教育出版社2001年主要参考书：1、《细胞生物学实验》（第1版），辛华主编科学出版社，2001年，2、《细胞生物学与医学遗传学实验指南》（第1版）蔡绍京主编第二军医大学出版社2002年3、刘鼎新，吕证宝主编，《细胞生物学研究方法与技术》，北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1997年，第2版4、，《细胞实验指南》（第1版）D.L.斯佩克特，R.D.戈德曼，L.A.莱因万德著黄培堂等译科学出版社2001年主要仪器设备：光学显微镜、离心机、天平、恒温水浴箱、冰箱、净化操作台、液氮罐执笔人：刘睿智一、课程性质、目的与任务细胞生物学是必修课程，其内容是研究细胞结构、功能以及各种生命现象的一门新兴学科，在高等医学教育计划中是一门重要的基础理论课。其主要任务是使学生从细胞整体水平、亚显微结构水平和分子水平三个层面来获得细胞结构及其生命活动的基本知识。真正理解生命在细胞和分子水平的运动规律。它是一门高度实践性的学科，因此实验课是整个细胞生物学教学中一个重要组成部分。通过实验课不仅加深对理论知识的理解和认证，而且通过对细胞生命现象的观察和亲手操作，使学生获得有关细胞生命活动的感性知识，有效地提高理论课的教学效果，并培养学生树立独立设计实验的思考观念和独立处理问题、解决问题的能力，为全面培养面向21世纪高层次医学人才打下坚实的基础。二、教学基本要求本实验课为验证性实验。学生实验前预习实验指导书，并写出预习报告。指导教师概述实验原理和方法及仪器使用等，并作针对性指导，具体实验步骤由学生自行完成。细胞生物学这门学科既具有很强的理论性也具有很强的实践性，只有掌握最基本的细胞生物学技术方法，才能进入细胞生物学的知识殿堂。所以本门课程要培养学生动手能力，掌握最基本的操作技能，为日后运用更新的细胞生物学技术奠定基础。1三、教学内容和要求：1、熟悉并理解细胞吞噬、细胞膜选择通透性等基本生理活动,掌握临时装片技术和显微镜的使用方法。2、掌握原位显示细胞内化学成分方法。熟悉细胞内DNA、RNA、酸性蛋白和碱性蛋白分布。3、掌握微丝的结构及染色方法，了解光学显微镜下的微丝的形态。4、掌握细胞组分分级分离的原理和方法。熟悉匀浆器和离心机的使用。掌握细胞核与线粒体的分级分离方法。5、掌握细胞活体染色的方法及意义，了解光学显微镜下线粒体及液泡系的基本形态和结构。6、掌握细胞有丝分裂的形态特征。了解植物和动物细胞有丝分裂的异同。7、初步掌握聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合原理及技术。8、掌握精子活体染色和和精液白细胞染色方法。掌握精子活率和尾部肿胀率的计算方法。观察精子运动能力。观察精子的凝集。掌握精子染色技术。观察精子形态和精子顶体形态。观察未成熟精细胞形态。掌握精子冷冻复苏技术。观察冷冻前后精子活力和精子活率。五、学时分配：序号实验项目内容提要学时分配主要仪器设备实验地点备注1细胞生理活动的观察熟悉并理解细胞吞噬、细胞膜选择通透性等基本生理活动,掌握临时装片技术和显微镜的使用方法。2光学显微镜、离心机、天平、恒温水浴箱、冰箱实验中心必修2细胞内蛋白质及核酸的显色与观察掌握用细胞化学方法显示细胞内蛋白质和核酸的方法。了解细胞内细胞化学反应的原理及细胞内酸性蛋白、碱性蛋白、DNA和RNA的分布。4光学显微镜、离心机、天平、恒温水浴箱、冰箱实验中心必修3细胞中微丝的染色及观察掌握微丝的结构及染色方法，了解光学显微镜下的微丝的形态。2光学显微镜、恒温水浴箱、冰箱、天平实验中心必修4细胞核与线粒体的分级分离掌握细胞组分分级分离的原理和方法。熟悉匀浆器和离心机的使用。掌握细胞核与线粒体的分级分离方法。4光学显微镜、离心机、天平、恒温水浴箱、冰箱实验中心必修5液泡系的活体染色掌握细胞活体染色的方法及意义，了解光学显微镜下线粒体及液泡系的基本形态和结构。2光学显微镜、恒温水浴箱、冰箱、天平实验中心必修6观察细胞的有丝分裂掌握细胞有丝分裂的形态特征。了解植物和动物细胞有丝分裂的异同。2光学显微镜实验中心必修27细胞计数和细胞融合技术掌握同种细胞融合的原理、融合率的计算与技术。4光学显微镜、离心机、天平、恒温水浴箱、冰箱、净化操作台实验中心必修8精子细胞学分析掌握精子活体染色和和精液白细胞染色方法。掌握精子活率和尾部肿胀率的计算方法。观察精子运动能力。观察精子的凝集。掌握精子染色技术。观察精子形态和精子顶体形态。观察未成熟精细胞形态。掌握精子冷冻复苏技术。观察冷冻前后精子活力和精子活率。8光学显微镜、恒温水浴箱、冰箱、净化操作台、液氮罐实验中心必修五、考核方式：对缺实验成绩者，本课程不予通过。3《医学微生物学》实验教学大纲课程名称：医学微生物学英文名称：MedicalMicrobiology实验课学时：32适用对象：医学、药学专业本科生指导教材及参考书：指导教材：《基础医学实验教程》（第一版）李凡主编高等教育出版社2002年参考书：《医学微生物学》（第五版）李凡主编高等教育出版社2003年主要仪器设备：生物显微镜、生化培养箱、高压蒸汽灭菌器、超净台、离心机、冰箱、酶标仪、倒置显微镜、CO2浮箱、PCR仪、凝胶成像系统、电脑执笔人：王丽一、课程性质、目的与任务《医学微生物学》是我国高等医药院校学生必修的一门基础课。它是研究与医学有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性、微生物学检查法以及特异性预防和治疗原则等内容的一门学科。目前医学微生物学是生命科学中发展迅速、最富有活力的前沿学科。医学微生物学实验教学主要是向医学生传授病原微生物的生物学特性、在自然界的分布、如何检测和对疾病诊断的意义。将实验教学与理论教学相结合，通过接受基本技能的训练，培养学生独立思考、处理问题和解决问题的能力。二、教学基本要求实验课是完成理论课教学的重要手段和环节，实验课的教学要使学生掌握微生物学实验基本原理、方法及基本操作技能，掌握常见病原微生物的生物学特性、检测方法，通过综合实验系统的掌握微生物知识。三、教学内容及要求：1.通过使用显微镜油镜，掌握观察细菌基本结构和特殊结构的基本技能。2.掌握临床工作中细菌染色的基本方法。如革兰染色法和抗酸染色法。3.熟悉细菌培养的基本技术。4.熟悉细菌的分子遗传学，如细菌质粒的提取、纯化和鉴定技术，质粒的接合和转化试验。5.熟悉抗生素体内、体外的抑菌试验原理。6.通过实验课的操作，掌握临床常见病原性细菌的分离、鉴定程序。7.熟悉血清学诊断在某些细菌感染性疾病中的作用。8.利用提供的标本和材料，掌握、熟悉和了解细菌的生物学特征，如形态染色、菌落特征、生长现象以及理化因素对细菌的影响。9.掌握常见感染性真菌形态及培养特征。410.掌握病毒感染引起宿主细胞的变化。11.熟悉病毒鸡胚分离与鉴定的方法和流感病毒的血凝及血凝抑制试验。12.熟悉病毒的形态学观察。13.熟悉血清学方法诊断乙型肝炎病毒感染标志。14.了解分子生物学手段检测病毒性疾病。四、学时分配序号实验项目内容提要学时分配主要仪器设备实验地点备注1形态学观察熟悉油镜的工作原理及使用，掌握细菌基本形态和特殊结构，熟悉细菌在不同培养基中的生长及特殊培养现象2生物显微镜实验中心必修2口腔中细菌的检查掌握革兰染色的原理、实际意义，掌握革兰染色方法，了解口腔微生物群的基本情况2生化培养箱、生物显微镜实验中心必修3脓汁中葡萄球菌的分离鉴定掌握脓汁中葡萄球菌分离程序，分离接种方法，脓汁的涂片、染色，掌握致病性葡萄球菌的鉴定方法，血浆凝固酶，甘露醇发酵试验3生化培养箱、高压蒸汽灭菌器、超净台实验中心必修4抗生素体外抑菌实验熟悉体外抑菌实验的方法和种类2生化培养箱、超净台实验中心必修5病原性肠道杆菌的分离鉴定掌握病原性杆菌的分离程序，掌握鉴别肠道致病性和非致病性杆菌的方法或技能，熟悉糖发酵反应，动力试验，初步鉴定其致病性，根据血清学实验进行最终鉴定3生化培养箱、高压蒸汽灭菌器、超净台实验中心必修6细菌质粒实验掌握接合性R质粒的发生机制，熟悉质粒结合实验的操作方法；掌握利用碱变性法抽提细菌耐药性质粒，并做出鉴定性分析2生化培养箱、超净台实验中心必修7结核杆菌实验掌握抗酸染色法，掌握结核杆菌形态及培养特性2生物显微镜、生化培养箱实验中心必修8真菌形态学观察掌握常见真菌及其他微生物形态、培养特征；利用真菌小培养掌握丝状真菌的镜下结构2生化培养箱、超净台、生物显微镜实验中心必修9白念珠菌的分离鉴定熟悉白念珠菌的分离鉴定程序，熟悉芽管形成实验，及类酵母型菌镜下结构2生物显微镜、生化培养箱、超净台实验中心必修10病毒培养方法掌握病毒培养方法（鸡胚接种、动物接种、细胞培养）2超净台、CO2浮箱实验中心必修11病毒的形态学特征熟悉包涵体的镜下形态学特征，掌握细胞病变效1生物显微镜、倒置显微镜实验中心必修5应CPE现象12流感病毒分离鉴定掌握流感病毒分离鉴定的程序、血凝和血凝抑制的机理，明确血凝抑制试验的临床意义2生化培养箱、超净台实验中心必修13病毒血清学诊断技术掌握ELISA方法，检测标本中的乙肝病毒的抗原抗体系统方法，对其结果应给予合理的解释2酶标仪、超净台实验中心必修14病毒诊断的分子生物学技术熟悉RT-PCR技术检测HCVRNA2PCR仪、凝胶成像系统、超净台实验中心必修15观看录像微生物学发展史细菌耐药性破伤风性传播疾病艾滋病3电脑实验中心必修五、考核方式：课程结束后进行实验理论笔答考试和实验基本操作考核。对无实验成绩者，本课程不予通过。6《医学免疫学》实验教学大纲课程名称：医学免疫学技术英文名称：TechniquesofImmunology实验课学时：24适用对象：医学、药学专业本科生指导教材及参考书：指导教材：《基础医学实验教程》，李凡、刘永茂主编，高等教育出版社，2002年。参考书：《免疫学常用技术》，柳忠辉主编，科学出版社，2002年。主要仪器设备：超净台、电泳仪、二氧化碳孵箱、低温高速离心机、倒置显微镜、恒温箱、酶标仪。执笔人：李一一、课程性质、目的与任务医学免疫学主要研究免疫系统的组成、功能以及相关疾病的基本免疫机制，发展有效的免疫学措施达到预防与治疗疾病为目的的一门必修课。免疫学在以基因、分子、细胞、整体功能各有不同、互为基础的层次上研究免疫细胞生命活动的基本规律，开拓了认识生命奥秘的诸多重要途径。免疫学自身也发展成为生命科学中快速发展的前沿学科。因此，通过免疫技术的学习使学员掌握现代免疫学基本技术和最新进展。从基础医学研究与临床医学实际出发，在熟悉和掌握基本实验技术基础上，掌握分析与综合的科研思维方式。二、教学基本要求通过免疫学技术的学习使学生认识到免疫学理论与技术的有机结合，在熟悉和掌握基本实验技术基础上，掌握免疫学实验设计的总体思路，培养学生的创新能力与个性发展。1．系统性实验体系的建立。免疫学研究的核心内容是免疫应答，免疫应答是免疫系统受到抗原刺激后从静态到动态转化的一系列复杂过程，在这一过程中，免疫系统（免疫细胞、免疫分子）所发生的变化是通过抗原刺激所引发的，因此选用抗原免疫动物，动物体针对抗原可产生特异性体液免疫与细胞免疫，这样，我们就可以将原来的孤立的检测抗体与检测细胞免疫功能的实验有机的串联起来。对学生来讲，一方面，使学生对免疫应答的理解从理论的抽象到实践的具体。另一方面，使学生认识到可以通过相应的手段，即免疫学技术进行测定体液免疫与细胞免疫的相对变化。因此，我们设计了两大系统实验，选用两种不同性质的抗原（颗粒性、可溶性）免疫小鼠,将免疫学基本实验贯穿始终，既能涵盖要求学生掌握的免疫学实验内容，又能从中培养学生的科研思路。2．系统实验的题目与内容。在系统性实验体系学生实验涉及的相关免疫学实验技术是：1.免疫血清制备（免疫动物、血清分离），2.抗体测定（双相琼脂扩散、ELISA），3.免疫印迹实验，4、淋巴细胞转化试验，5、抗人“O”型红细胞抗体测定（凝集反应），6、补体参与7的溶血反应（补体依赖细胞