1手性化合物拆分与鉴定

手性物质提取分离手性药物的结晶拆分方法：手性化合物的拆分是给外消旋混合物制造一个不对称的环境，使两个对映异构体能够分离开来。从方法学上来讲，可以分为结晶拆分法(物理拆分方法、化学拆分方法)、动力学拆分方法、生物拆分方法(相当部分是生物催化的动力学拆分)及色谱拆分方法。--手性药物的拆分方法—1、结晶拆分法--直接结晶法---在光学活性溶剂中的结晶拆分--直接结晶法---外消旋体的不对称转化和结晶拆分--直接结晶法---逆向结晶法逆向结晶法则是在外消旋体的饱和溶液中加入可溶性某一种构型的异构体[如(R)—异构体]，添加的(R)—异构体就会吸附到外消旋体溶液中的同种构型异构体结晶体的表面，从而抑制了这种异构体结晶的继续生长，而外消旋体溶液中相反构型的（S）—异构体结晶速度就会加快，从而形成结晶析出。--直接结晶法---优先结晶法优先结晶方法(preferentialcrystallization)是在饱和或过饱和的外消旋体溶液中加入一个对映异构体的晶种，使该对映异构体稍稍过量因而造成不对称环境，结晶就会按非稍的过程进行，这样旋光性与该晶种相同的异构体就会从溶液中结晶出来。--直接结晶法---自发结晶拆分法自发结晶拆分(spontaneousresolution)是指当外消旋体在结晶的过程中，自发的形成聚集体。--通过形成非对映异构体的结晶法--非对映异构体的形成和拆分原理--通过形成非对映异构体的结晶法--用于碱拆分的拆分试剂（酸性拆分剂）2、动力学拆分--组合拆分拆分原理是采用一组同一结构类型的手性衍生物的拆分剂家族(resolvingagentfamily)代替单一的手性拆分剂进行外消旋化合物的拆分。--复合拆分方法---形成π电子复合物的拆分（通过形成π电子复合物或π电子转移复合物的拆分方法主要应用十含芳香环化合物的拆分，所用拆分剂是手性的含π电子的酸）--复合拆分方法---金属配合物的拆分方法：有机过渡金属化合物与被拆分物形成非对映异构体的配位物而被分离。--包合拆分(inclusionresolution)方法--洞穴包合物拆分（拆分剂是手性的环状多元醚(冠醚)和环糊精）3、色谱分离：气相色谱，液相色谱，薄层色谱、超临界色谱和电泳-------气相色谱：按照拆分机制GC手性固定相可分为三类：基于氢键的手性固定相；基于配位作用的手性金属配合物固定相；基于包含作用的环糊精衍生物固定相。-----HPLC柱色谱法分离手性化合物：直接法：手性固定相CSP拆分：手性流动相CMP拆分间接法：手性试剂衍生化法CDF直接法间接法手性固定相拆分CSP手性流动相拆分CMP手性试剂衍生化法CDF定义将具有手性识别作用的配基，通过稳定的共价键连接或以物理方法涂敷于适当的固相载体上，以制备出手性固定相。CMP手性流动相又称手性添加剂法，这种拆分法是在流动相中加入手性试剂，利用手性试剂与各对映体结合的稳定常数不同，以及药物与结合物在固定相上分配系数的不同来进行分离。有：配体交换型手性添加剂、环糊精添加剂、手性离子对添加剂。该法是药物对映体在分离前与高光学纯度衍生化试剂(CDA)反应，形成非对映体，再进行色谱分离测定。优点分离时间短，而手性选择性和拆分能力高，多数药物在分离前都不需要进行衍生此法不需昂贵的手性柱，亦无须进行柱前衍生，手性添加剂可视要求而更换，使用比较方便。可使用已有的非手性同定相，花费少，通过选用具有强烈紫外吸收或荧光吸收的手性试剂，可提高检测敏感度，而且多数化反应，分离方法直接。的衍生化试剂具有良好的对热及水的稳定性。局限性色谱柱价格昂贵，部分固定相还存在稳定性差，柱容量低，柱强度差等缺点，且根据不同手性药物的性质不同，选用的分析方法也不同。系统平衡时间较长，添加剂消耗大，对于一些难分离的对映体效果差。手性试剂需要有高的光学纯度，各对映体的衍生化速率及平衡常数应一致，要求衍生化反应迅速、彻底，否则影响定量结果。衍生化和色谱分析过程中应不发生消旋化，外消旋药物需要有可被衍生化的基团，此外衍生化法步骤较烦琐，衍生化试剂绝大多数毒性相当大，而且该方法难以实现分析的自动化。液相色谱手性固定相大体有四类，1、Pirkle型固定相，它的母体结构是3-二硝基苯甲酰，然后接上诸如苯基甘氨酸或亮氨酸这样的基团，3.5-二硝基苯甲酰是公认的作为接受π-π相互作用的重要基团2、π-酸，π-碱活性手性固定相，这种类型的固定相已广泛用于分离胺，醇，硫醇，氨基酸，氨基醇等。3、环糊精类（最常用），它分α、β、γ三类，以β型用得最广，由于它可采用反相系统，既可分离手性物质，又可分离非手性物质，因此，迅速在液相色谱中推广，成为应用最广的手性固定相之一。PS.、环糊精（cycIodextrin，简称CD）是一种包含6~12个葡萄糖单元的手性环状低聚糖，环糊精作为手性固定相分离手性化合物的原理：由于CD独特的结构，能够选择性地包结多种客体分子，形成具有不同自由能的包结配合物（in-elusioncomplexes。作为固定相，其保留行为将呈现差别。若客体分子是对映异构体，则将形成非对映的包结配合物（diastereomericinclusioncomplexes,呈现对映体选择性，这是CD固定相分离手性化合物的主要依据。不同的CD，其腔尺寸大小不同，因而对与其形成包结配合物的客体分子大小有选择性。原则上讲，较大的腔尺寸适合于较大的客体分子。目前，β-CD固定相用得最多，是由于其价格便宜，而且适合于许多中等大小的分子，特别是芳香族化合物的对映体分离。4、高聚合手性固定相是目前流行的另一种商品固定相，主要包括蛋白质键合相和纤维素等，现阶段用得较多的蛋白质键合相是牛血清蛋白和α-酸糖蛋白。------林炳承，手性分子的色谱分离，色谱拆分新技术：模拟移动床色谱SMB，超临界流体色谱SFC，逆流提取技术CCC，包结拆分---------《化学制药工艺学》P96-140-----超临界流体色谱分离手性化合物SFC分离手性化合物可分为直接法和间接法两种。直接法包括使用手性固定相和手性流动相；间接法则基于手性衍生作用，先把对映物转化为非对映物，然后用非手性固定相分离。目前，手性固定相直接分离法是发展最快的领域，而间接法则相对使用较少。超临界流体色谱的手性固定相是在HPLC和GC手性固定相的基础上发展起来的。通常CSPs按手性选择器的类型分为酰胺类、环糊精类和聚糖类等，除冠醚类和蛋白质类外，绝大多数CSPs都可直接用于SFC，而不需任何改进处理。超临界流体色谱技术是一种非常重要的手性拆分方法，它较HPLC、GC技术而言，有分离效率高、分离时间短、产品质量好等优点，因而在食品、药物、农药、香料和聚合物等的手性分离方面有良好的应用前景。-----=毛细管电泳手性分离（CE）：（应用各种手性选择剂）手性分离中毛细管电泳具有以下优点:(1)很高的分离效率使具有较小分离选择系数的对映体也可以达到满意的分离度;(2)可供选择的分离模式多且变换简单,手性选择试剂直接加入载体电解质中,容易通过选用不同的手性选择试剂和改变背景电解质溶液的组成提高分离选择性;(3)手性选择剂的消耗量很少,运行成本较低。-------模拟移动床色谱（SimulatedmovingbedChromatography，SMB）在移动床色谱中，不仅流动相发生移动，固定相也要向相反方向移动，易洗脱的化合物(萃余液)随流动相移动，难洗脱的化合物(萃取液)随固定相移动。整个固定相的分离能力被持续利用，明显地提高了系统产率。。SMB可以节省90％的流动相并得到更高的产率。-------逆流色谱（CountercurrentChromatography，CCC）它主要分为液滴逆流色谱（DCCC）、旋转腔逆流色谱（RLCCC）、离心分离逆向色谱（CPC）、高速逆流色谱（HSCCC）四大类。适用于分离极性大的手性化合物及生物大分子。---------薄层色谱（TLC）和快速柱色谱（FlashChromatography）薄层色谱是最简便的色谱技术之一，具有操作方便、设备简单、色谱参数易调整等特点。主要分为手性固定相拆分和手性流动相拆分，用于定性分析。快速柱色谱是基于通过泵产生压力（低压），加速流动相通过预填充柱子的洗脱速度的一种快速制备柱层析形式。、---------分子印迹法氨基酸衍生物是目前作为分子印迹分离目标物质中较为活跃的一种。---------李丽虹，刘岚，罗勇等，以分子印迹聚合物微固定相手性拆分1,12联222萘酚及其衍生[J].色谱，2006,24(6;574.)手性物质结构鉴定测定手性化合物绝对构型的方法主要有：单晶X-射线衍射法，核磁共振法和圆二色谱法等。2、核磁共振法由于对映异构物的核磁谱图完全一样，需要转变成非对映异构物才可以区别。NMR检测手性化合物有三种方法:1.加手性位移试剂2.加手性溶剂3.加手性衍生试剂。3、