020尿液分析操作程序

内蒙古北方医院检验科质量管理体系文件第三节标准作业程序尿液分析操作程序文件编号：LAB-SOP-JC-020版本：C/0页数：第1页共8页1目的规范尿液分析试验，确保检测结果准确性和重复性。2标本采集与要求2.1收集尿液的容器和尿量收集尿液标本的容器多种多样，留取标本最基本的要求是使用清洁、干燥、方便的容器。无论采用何种容器，都必须满足下列要求：2.1.1门诊病人凭交费发票在检验科窗口领取一次性尿杯。根据检验单要求留取尿样，交由检验科窗口工作人员。2.1.2病房送检的尿标本容器上应使用标签，并注明病人的姓名、科别、床号、检测项目等，尽可能注明收集标本的时间。2.1.3容器只限一次性使用、清洁，不含有干扰试验的物质。2.1.4所用容器至少可容纳50ml尿液，开口应大于4cm，底部要宽，以防止尿液溅出。2.1.5容器应方便运输，便于保存。2.1.6对于儿科患者，特别是新生儿，可使用小型，特殊的容器。2.1.7对尿量，尿液分析和妊娠试验不少于10ml。2.2收集尿液标本的方法2.2.1自然排尿法适用于尿液分析检查、细菌检查和细胞学检查。取尿标本时，注意防止尿道口分泌物的污染，特别是女病人易受阴道分泌物污染。临床最常用的方法是采用中段尿法，即尿流开始的小部分弃之，收集中段尿于尿杯中。细菌检查，必须用无菌盐水彻底清洗外生殖器，然后收集中段尿于无菌容器中。2.2.2膀胱导管或穿刺法对于自然排尿困难的病人或为了避免女病人阴道分泌物的污染，可采用膀胱导管。但此法可能把细菌带入膀胱而引起感染，故不宜经常使用。为了获得单次尿标本，在耻骨弓上穿刺膀胱取尿有时被用来代替导管取尿。2.3尿液标本的种类2.3.1首次晨尿标本收集早晨起床后的第一次尿液标本，此尿液最适合于尿液常规检查和HCG内蒙古北方医院检验科质量管理体系文件第三节标准作业程序尿液分析操作程序文件编号：LAB-SOP-JC-020版本：C/0页数：第2页共8页定性定量试验，特别是细菌及亚硝酸盐、尿蛋白和细胞、管型等有形成分的显微镜检查。2.3.2随机尿标本随机留取任何一个时间的尿液标本，不受条件的限制。此类标本容易获得，是尿液分析等检查最常用的方法，但受饮水、饮食和收集时间等多种因素影响，病理成分容易漏诊。仅适用于门诊、急诊病人的过筛检验。2.3.3空腹尿标本即进食前的尿液标本。此标本对糖尿病患者尿糖测定有较大意义。2.3.4餐后尿标本即通常在餐后两个小时收集的尿液。其对于病理性蛋白尿、糖尿检查更为敏感。午餐后尿，对尿胆原检查特别有益。2.3.5三小时尿标本即收集上午3小时的尿液标本。具体的做法：嘱病人于留尿前一天少饮水，使得尿液浓缩呈偏酸性，不含晶形或非晶形盐类。早晨8点排空膀胱的尿液，然后卧床3小时，至11点收集所有尿液标本。此标本适用于病人每小时或每分钟细胞排泄率。2.3.6十二小时尿标本即患者正常进食，晚上8点排空膀胱的尿液，于容器中加入约10ml甲醛作为防腐剂，再收集以后12小时内所有尿液标本。曾常用于细胞、管型等有形成分的计数，如尿Addis计数等，因患者标本采集繁琐和有形成分长时间保存困难，现己少用，建议使用3小时尿标本。2.3.7二十四小时尿标本病人于早晨8点排空膀胱的尿液，再收集以后24小时内所有尿液标本。此标本用于体内代谢产物的定量检测，如尿蛋白、微量白蛋白排泄率、糖、肌酐定量、儿茶酚胺等检查。2.4尿液标本的保存尿液化学物质和有形成分不稳定，排出后即开始发生物理和化学变化，如胆红素、尿胆原见光易分解；抗坏血酸消失。细菌生长导致尿液成分的改变:尿素经细菌酵解生成氨，尿pH升高，使尿液有形成分破坏；葡萄糖被细菌降解，使病理性尿糖消失。因此，应提倡常规检查在排尿后尽快送检。室温保存的尿液标内蒙古北方医院检验科质量管理体系文件第三节标准作业程序尿液分析操作程序文件编号：LAB-SOP-JC-020版本：C/0页数：第3页共8页本须2小时内测定完毕，检测的标本不保存。标本如不能及时分析，必须采取保存措施，冷藏法或化学防腐法。2.4.1冷藏法冷藏可抑制微生物生长，维持尿液pH恒定，使尿中有形成分的形态基本不变。但4oC条件下，冷藏不得超过8小时，有时冷藏时非晶形磷酸盐和尿酸盐可析出形成沉淀影响尿沉渣检查，故检验前应恢复至室温。2.4.2化学防腐法常用的化学防腐剂有：（1）甲苯：于尿液表面加甲苯数滴，使成一薄层隔绝空气，防止细菌生长繁殖，通常用于一般化学成分检查；（2）甲醛:每100ml尿液加40%甲醛0.5ml可抑制细菌生长并固定尿中有形成分，适用于尿液有形成分的检查，但不能使用于具有还原性醛基的化学成分（如糖、17-羟皮质类固醇）检查；（3）盐酸：每1000ml尿标本中加入浓盐酸1ml即可，使尿液维持在pH2，此标本主要可用于17-羟皮质类固醇、17-酮类固醇、儿茶酚胺、丙酮定量等。2.5尿液标本收集的注意事项临床医护人员和实验室工作人员应指导病人正确留取尿标本的方法。根据不同实验要求，留取不同种类的尿液标本、不同的取样方式和尿量。尿液分析、尿生化、HCG定性试验、尿液细胞计数、尿含铁血黄素标本，一般留取约20ml。注意防腐剂使用的种类、使用的方法，并嘱咐病人注意防腐剂对自己的伤害。2.6不合格尿液标本的处理对标识不明、标本量不合适、防腐剂和容器使用不当等不合格的标本，按程序文件《样品核收、登记和保存程序》处理。3测定方法干化学法。4测定分析原理4.1尿比重尿比重测定是在流动池中进行，在吸入标本过程中流动池中充满了尿标本。光电二极管发出650nm光照射到流动池。尖端的光电元件CCD测定总反射光的角度。标本的折射指数是反射光与标准曲线反射光角度进行比较(贮存于仪器的曲线图)，再转换成尿液比重。内蒙古北方医院检验科质量管理体系文件第三节标准作业程序尿液分析操作程序文件编号：LAB-SOP-JC-020版本：C/0页数：第4页共8页4.2尿pH尿pH测定基于模块中两种指示剂反应，甲基红、溴麝香草酚兰。在尿液pH为5-9时，这种试剂带的颜色变化经历从橘红、黄绿至蓝色。4.3尿白细胞尿液中的白细胞主要是中性粒细胞，试剂带反应利用中性粒细胞酯酶的特性，反应区含有吲哚酚酯，它能被粒细胞酯酶分解成吲哚酚，后者与重氮盐反应形成紫色缩合物。4.4尿亚硝酸盐亚硝酸盐与Gress氏检测原理相同，在尿液中的硝酸盐被细菌分解代谢为亚硝酸盐：硝酸盐→尿液中细菌还原作用→亚硝酸盐。在酸性条件下，亚硝酸盐和氨苯基磺胺重氮化反应生成重氮盐化合物，后者与3-羟基1.2.3.4-四氢苯并喹啉偶联生成红色的偶氮化合物，红色化合物的强度于亚硝酸盐的浓度呈正比。4.5尿蛋白质蛋白模块检测区含有缓冲化合物和溴酚兰指示剂。在一定pH条件下，溴酚兰指示剂产生出阴离子，与带阳离子的蛋白质（主要是白蛋白）发生颜色变化，从黄色转变成绿色。4.6尿葡萄糖葡萄糖测定的原理是基于特异的葡萄糖氧化酶-过氧化物酶，葡萄糖氧化酶作用与尿液中D-葡萄糖使其形成β-D-葡萄糖内酯和过氧化氢，过氧化氢再被过氧化氢酶催化释放出氧，后者使色源呈现不同的颜色变化（从黄色变化为兰绿色再变化为绿色）。4.7尿酮体尿酮体测定原理基于朗格氏法，在碱性条件下尿液中的乙酰乙酸和丙酮与硝普钠和甘氨酸反应生成紫红色化合物。本实验对乙酰乙酸和丙酮特异，但不与β-羟丁酸发生作用。4.8尿胆原在酸性基质下，尿胆原与对甲氧基苯重氮氟酸盐发生重氮偶联生成红色的重氮盐化合物。4.9胆红质试剂带测定尿胆红质是在酸性基质下，胆红质与重氮盐偶联反应行成红-紫内蒙古北方医院检验科质量管理体系文件第三节标准作业程序尿液分析操作程序文件编号：LAB-SOP-JC-020版本：C/0页数：第5页共8页色的重氮盐化合物。4.10红细胞血红蛋白或肌红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化四基联苯胺和有机物氢过氧化物反应，使四甲基联苯胺呈现绿色。5试剂5.1试剂来源：罗氏尿液分析试纸条试剂。贮存条件及稳定性：2-30℃保存至有效期。试剂准备：即开即用，开封后，可稳定保存14天。5.2校准物来源：罗氏尿液分析校准条。贮存条件：2-30℃保存。5.3质控物来源：伯乐质控品。贮存条件：2-8℃保存至有效期。6仪器URYSIS2400尿液分析仪。7操作程序见《URYSIS2400尿液分析仪操作程序》。8生物参考区间尿比重：1.000-1.040。尿pH：随机尿：pH为4.8-7.4；晨尿：pH为5-6。尿白细胞：正常人＜10个白细胞/µl；可疑范围为10-20个白细胞/µl；病理状态＞20个白细胞/µl。尿亚硝酸盐：正常人尿液中亚硝酸盐为阴性。尿蛋白质：正常人尿液中蛋白低于10mg/dl。尿葡萄糖：正常人空腹尿糖1.1mmol/L(20mg/dl)；日间尿糖1.7mmol/L(30mg/dl)。尿酮体：正常人尿液中乙酰乙酸低于0.5mmol/L(5mg/dl)。尿胆原：正常人尿液尿胆原低于17µmol/L(1mg/dl)，为弱阳性。内蒙古北方医院检验科质量管理体系文件第三节标准作业程序尿液分析操作程序文件编号：LAB-SOP-JC-020版本：C/0页数：第6页共8页胆红质：正常成人尿胆红质低于3.4µmol/L(0.1mg/dl)。红细胞：正常人尿液中红细胞为0～5个/µl。9性能指标灵敏度：白细胞：28Leu/µL；亚硝酸盐：0.07mg/dl；尿蛋白质：12mg/dl；尿葡萄糖：40mg/dl；尿酮体：5mg/dl；尿胆原：1.4mg/dl；胆红质：0.6mg/dl；红细胞：7Ery/µL。10可追加检测时限不可追加。11结果编辑和报告签发检验结果自动传入LIS系统，由当日报告审核人员审核后发放，详见《实验室信息系统操作手册》。12报告时间急诊标本和门诊标本30分钟，其余标本1个工作日发报告。13临床意义13.1尿比重13.1.1连续24小时尿比重有助于初步了解肾脏的浓缩稀释功能。13.1.2尿比重增高:见于血容量不足引起的肾前性少尿、周围循环衰竭、肾病综合症、急性肾小球肾炎、糖尿病、注射含碘造影剂、左旋糖酐、甘露醇时。13.1.3尿比重减低：大量饮水、慢性肾小球肾炎、慢性肾衰、肾小管间质疾病、尿崩症等。13.2尿pH13.2.1尿PH降低：可见酸中毒、高热、痛风、糖尿病酮症酸中毒、低钾性代谢性碱中毒、口服氯化铵或维生素C等酸性药物。13.2.2尿PH升高：见于碱中毒、尿潴留、膀胱炎、应用利尿剂、肾小管性酸中毒等。13.3尿白细胞白细胞尿是肾脏和泌尿道炎症的一个重要的诊断症状，例如：细菌感染：膀胱炎，尿道炎，急慢性肾盂肾炎；酵菌，真菌和病毒引起的非细菌性感染；寄生虫传染如吸虫病；肾小球病；无痛性肾病；中毒；尿排泄失调。13.4尿亚硝酸盐内蒙古北方医院检验科质量管理体系文件第三节标准作业程序尿液分析操作程序文件编号：LAB-SOP-JC-020版本：C/0页数：第7页共8页尿亚硝酸盐阳性常见于肠杆菌科的细菌；尿液中亚硝酸盐阳性是细菌性泌尿系感染常见的症状。干化学法亚硝酸盐检查阳性可以提示急性感染。13.5尿蛋白质13.5.1生理性蛋白尿是机体剧烈运动、发热、低温、刺激性紧张，交感神经兴奋所致。13.5.2病理性蛋白尿：肾小球性蛋白尿、肾小管性蛋白尿、混合性蛋白尿、溢出性蛋白尿、组织性蛋白尿、假性蛋白尿。13.6尿葡萄糖13.6.1血糖增高性糖尿：见于涉入或输入性糖尿、应激性糖尿、代谢性糖尿、内分泌性糖尿；如甲亢、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤等。13.6.2血糖正常性糖尿：见于家族性肾性糖尿、新生儿糖尿、后天获得性糖尿、肾病综合症以及妊娠期和哺乳期妇女。13.7尿酮体13.7.1糖尿病性酮尿：常伴有酮症酸中毒。13.7.2非糖尿病性酮尿：高热、严重呕吐、腹泻、过分节食、妊娠剧烈吐酒精性肝炎、肝硬化等。13.8尿胆原13.8.1增高：溶血性黄疸、急性黄疸性肝炎。13.8.2减低：见于阻塞性黄疸、长时间大量应用抗生素。13.9胆红素：胆红素增高见于肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸、先天性高胆红素血症。13.10红细胞血尿主要的病因与肾和泌尿生殖道有关。如结石、肿瘤、肾小球肾炎、肾盂肾炎、泌尿系感染（膀胱炎，泌尿生殖