市科技计划项目可行性研究报告提纲[1].doc

1贵阳市科技计划项目可行性研究报告书项目名称：姜黄素酯衍生物-survivn特异性核酸前体药物双靶向杀伤膀胱癌的研究项目承担单位：贵阳医学院（盖章）起止年限：2009.1-2011.12项目主管部门：贵阳市科技局社会发展攻关计划编制日期：2008.3.10贵阳市科技局印制2贵阳市科技局可行性研究报告提纲一、立项的背景与意义简述本项目的社会经济意义，申请立项的必要性等。二、国内外研究现状与发展趋势简述本项目国内外发展现状，存在的主要问题及近期发展趋势，并将本项目与国内外同类技术或产品进行对比说明。三、项目实施主要内容、技术关键与创新点、预期目标1、详细说明本项目实施的主要技术内容，解决的关键技术，描述项目的技术或工艺路线。2、重点说明本项目的创新点，包括技术创新、产品结构创新、生产工艺创新、产品性能及使用效果的创新等。3、说明项目的技术来源，合作单位情况，知识产权归属情况。4、说明项目实施各阶段及项目完成后预期取得的主要技术成果（包括新技术、新工艺、新产品等）技术水平及相应技术指标等。产业化项目可以是成果工程化或中试成果，以及产业化过程中的技术创新、产品创新、机制创新等。基础研究项目主要是学术论文、著作等。四、应用或产业化前景与市场需求主要说明本项目技术或产品市场需求。目前主要使用领域的需求量，未来市场预测。分析项目国内外市场竞争能力、预测市场占3有份额。五、现有工作基础、条件和优势说明本项目已开展的前期工作，项目实施在技术、设备、人才、资金等方面具备的条件和优势，项目实现预期目标的基础条件。六、项目实施方案、组织方式与课题分解简述项目实施方案、组织方式、管理措施、课题分解等。七、进度安排与年度计划内容分年度列出项目实施进度、年度主要工作内容和主要目标。八、承担单位和主要研究人员简况说明项目承担单位基本情况（产业化项目还应重点说明企业的财务经济状况）、项目组主要研究人员的基本情况，重点介绍项目负责人情况。同时应列出项目负责人及专家组成员姓名、性别、年龄、单位、学历、职称及从事专业简表。九、经费预算来源、使用计划及还款能力分析简述项目总投资及资金筹措渠道，注明申请市应用技术研究与开发资金：其中拨款和借款经费数量，根据项目进度和筹资方式，编制资金使用计划。对申请借款的，应对还款来源、还款能力进行分析。经费使用概算：总经费（万元）：万元分类经费（万元）：1、人员费：2、设备费：3、能源材料费：4、试验外协费：45、差旅费：6、会议费：7、咨询服务费：8、管理费：其他相关费用十、经济、社会效益分析基础研究和科技攻关项目可对项目完成后预期的经济社会效益作简要分析。中试和产业化项目，应对项目完成后的规模及产品生产成本和销售收入情况的估算、新增产值、利润、税收、创汇、投资回报情况以及社会效益进行综合分析，并就项目的风险性进行实事求实的阐述。十一、通讯联系：1、项目承担单位通讯地址1）地址：2）邮政编码：3）电话号码：4）电传：5）联系人：6）项目实施的地点：2、项目承担单位所有制性质及法人代表1）所有制性质：2）法人代表：3、项目承担单位开户银行名称及帐号1）开户银行名称：2）帐号：注：以下材料可作为附件，在提交项目可行性研究报告时根据项目情况任选：高新技术企业认定证书、科技成果（新产品）鉴定5证书、专利证书、获奖证书、技术合同（转让合同、合作合同等）、查新报告、特殊产品生产许可证、临床批文、环保证明等。提交的项目可行性研究报告文本需打印（A4），一式二份（附软盘），每份必须盖章。论证委员会推荐名单：序号姓名工作单位现从事专业技术职称签名1234567896一、立项的背景与意义近年来膀胱癌患者发病率增高，目前缺乏膀胱癌初筛的有效瘤标，确诊手段相对滞后,绝大多数属于有创性检查（如膀胱镜检）令患者惧检。因而给早期诊断和治疗这类疾病带来极大的困难。化疗也是此类病人的主要治疗方法之一，但化疗药物昂贵，缺乏肿瘤特异性，遵循一级药代动力学原则，即杀伤肿瘤细胞的同时，也一定比例地损伤正常组织和细胞，因而副作用大，故研究进展缓慢。目前，膀胱癌的基因治疗成为研究热点之一。多数基因治疗主要围绕某一高表达癌基因的下调、抑癌基因表达的上调，或者转入“自杀基因”等，试图在分子水平，对细胞凋亡或细胞周期过程产生效应。然而，这些不同程度存在靶基因的特异性，运输载体的安全性，作用的瞬时性和不稳定性，药代动力学不确定性，以及可能引起宿主的免疫干扰等诸多问题，所以多数还处于临床前实验阶段。本项目若能得到资助，我们将充分运用贵州省民族中医药资源，结合现代中西医药理技术、计算机信息技术、肿瘤的基因治疗技术、生物技术等交叉学科的优势，完成新型姜黄素/核酸前体药物的设计、合成和制备。为膀胱癌靶向的基因生物治疗和药物治疗的双功能杀伤效应开辟新的视野，使核酸引导的膀胱癌分子化疗成为可能。最终为以此序列导向并连接各种抗癌药物治疗膀胱癌奠定一定的基础。为进一步研究Survivin基因的功能，并为创建一种从尿液检查即能早期发现膀胱癌的无创有效诊断方法进行有益的探索。另外，运用该严格筛选最佳反义寡核苷酸序列的方法，可为其他肿瘤的基因治疗提供新的思路和途径。最终为解决我省这类患者的疾苦，为膀胱癌的诊断和治疗提供新方法。同时为我省医疗卫生事业的发展，构建和谐社会，节约医疗经费，创建循环型，节约型经济等多方面作出无声的贡献。二、国内外研究现状与发展趋势由于核酸是具有二级和三级结构，碱基之间、化学键之间的相互作用均存在自由能的差异性，最终核酸形成具有保持稳定性的茎区和体现活性的环区，所谓“茎环结构”（stemsandloopsstructure）。如果筛选到靶基因此区域的结合位点,根据其合成的反义序列才能基本体现其封闭活性，有效调控靶基因的表达，影响其生物学功能。常规的反义技术通常只考虑核酸的一级线性结构，存在一定的随机性、盲目性和经验性,因其“空间屏蔽效应”，由此合成的反义核酸不一定能与靶基因有效结合。Monial等曾报道根据核酸的一级线性结构，运用常规反义技术中的“随机鸟枪法”，在靶基因的近50条线性反义序列中筛选到4条序列，其靶基因表达有效抑制率只接近70%，其余均不足10%，并且耗费大量的时间和经济成本。如果采取反义基因技术封闭癌基因，同时运用基因引导联7接化疗药物，就可能达到基因治疗和药物治疗的双重靶向杀伤效应。同时，如果能探索出一种能早期初筛膀胱癌的无创检查诊断方法，解决这部分患者的疾苦，无疑将会为膀胱癌的诊断和治疗提供新的思路。Survivin基因是IAPs（凋亡抑制蛋白）家族新成员，抑制恶性肿瘤细胞的凋亡，使肿瘤不断增殖，永生化。已经证实在绝大多数肿瘤组织中高表达，而在正常分化组织或癌旁组织中不表达（除了胸腺和生殖腺外）。研究它与膀胱癌的相关性也是目前热点之一，但是将其运用于膀胱癌的基因和/或药物治疗对其生物学行为影响的系统研究，国内外还未见报道。本课题是以Survivin基因为靶点，检测其在膀胱癌组织和尿液中的表达，探索早期发现膀胱癌的无创，简单，费用低廉的筛查方法。另外采取寡核苷酸文库/RnaseH切割法，结合计算机信息技术，运用RNADraw软件分析，高通量严格筛选此基因二级结构、空间构象中最佳反义结合位点，合成特异性靶向反义寡核苷酸序列，证实经此方法获取的Survivin基因最佳反义寡核苷酸序列能相对有效地影响膀胱癌细胞的生物学行为，相对常规的反义序列的封闭效应有显著性优势。姜黄素是西南地区和贵州省相对资源独特的中医药药材姜黄中提取的植物多酚，它具有抗炎、抗肿瘤作用，显著抑制肿瘤增殖、诱导肿瘤凋亡。同时其是植物性药物，相对安全。由于其很可能成为具备良好应用前景的抗肿瘤药物，逐渐成为研究的热点。但是，设计其末端的L-氨基酸衍生物羟基与靶核酸Survivin反义序列的5’磷酸藕联，合成制备特异性核酸前体药物交联系统既能封闭靶核酸Survivin的表达影响膀胱癌生物学行为，又能运用姜黄素的抗肿瘤作用杀伤肿瘤细胞起到双功能效应作用于膀胱癌的研究，国内外尚无报道。我们将从此展开研究。本项目若能得到资助，我们将充分运用贵州省民族中医药资源，结合现代中西医药理技术、计算机信息技术、肿瘤的基因治疗技术、生物技术等交叉学科的优势，完成新型姜黄素/核酸前体药物的设计、合成和制备。为膀胱癌靶向的基因生物治疗和药物治疗的双功能杀伤效应开辟新的视野，使核酸引导的膀胱癌分子化疗成为可能。三、项目实施主要内容、技术关键与创新点、预期目标主要内容（1）测IAPs家族成员survivin在膀胱癌组织及尿液中的表达，为膀胱癌的早期诊断探索出一条更为有效的无创性检查方法，有效提高膀胱癌早期诊断效率。并进一步探讨survivin在膀胱癌发生发展的分子生物学作用。（2）结合计算机技术高通量筛选Survivin的肿瘤特异性最佳反义寡核苷酸序列。8（3）设计、合成、制备姜黄素酯/Survivin最佳反义寡核苷酸序列前体药物交联系统。（4）分别检测随机反义寡核苷酸、高通量筛选Survivin的最佳反义寡核苷酸序列和前体药物交联系统对膀胱癌杀伤作用并作对照研究上述实验步骤基本上能够完成，具有较强可行性。技术关键与创新点1本项目充分运用贵州省民族中医药资源，结合现代中西医药理技术、计算机信息技术、肿瘤的基因治疗技术、生物技术等交叉学科的优势，完成新型姜黄素/核酸前体药物的设计、合成和制备，国内外未见报道。2RNA干扰技术虽然能有效封闭靶基因，但有研究表明它为双链核酸，不能联接小分子化疗药物。本项目经过严格筛选的肿瘤特异性survivin反义寡核苷酸与将抗肿瘤药物交联，既能封闭癌基因达到基因治疗效果，又能引导抗癌药物进入膀胱癌细胞，达到膀胱癌靶向的基因生物治疗和药物治疗双重作用，使核酸引导的膀胱癌分子化疗开辟新的视野，国内外未见报道。3目前绝大多数采用的普通核酸反义技术仅按照核酸的一级线性结构通过碱基互补配对原则合成反义序列。没有考虑核酸内部的二级结构、自由能的变化、碱基的空间构象等，而这些是影响反义序列封闭效率的重要因素。本项目采取寡核苷酸文库/RnaseH切割法，结合计算机信息技术，运用RNADraw软件分析，高通量严格筛选此基因二级结构空间构象中最佳反义结合位点，合成构建特异性靶向反义寡核苷酸序列，检测经此方法获取的Survivin基因最佳反义寡核苷酸序列对膀胱癌细胞的生物学行为影响的有效性，证实此反义寡核苷酸序列能有效封闭膀胱癌中Survivin基因的转录和表达，促进膀胱癌细胞的凋亡，是反义酸技术的延伸。预期目标一检测IAPs家族成员survivin在膀胱癌组织及尿液中的表达，为膀胱癌的早期诊断探索出一条更为有效的无创性检查方法，有效提高膀胱癌早期诊断效率。二运用计算机信息技术高通量严格筛选目的基因的最佳反义结合位点，获取由此合成的survivin反义寡核苷酸序列有效封闭膀胱癌中Survivin基因的转录和表达，促进膀胱癌细胞的凋亡。并为其他肿瘤的基因治疗提供方法学上的重要参考。三合成姜黄素酯/survivin特异性反义核酸交联前体药物，经过体内、体外研究，显示其有基因治疗和药物治疗双功能靶向杀伤膀胱癌的效果，为基因导向的膀胱癌的药9物治疗奠定一定的基础。四如果高通量筛选的survivin基因的最佳反义寡核苷酸序列连接抗肿瘤药物研究进展顺利，将合成的此前体药物交联系统申请专利。五争取在国内外重要核心期刊发表论文数篇。六培养硕士研究生数名。四、应用或产业化前景与市场需求本项目若能得到资助，我们将充分运用贵州省民族中医药资源，结合现代中西医药理技术、计算机信息技术、肿瘤的基因治疗技术、生物技术等交叉学科的优势，完成新型姜黄素/核酸前体药物的设计、合成和制备。为膀胱癌靶向的基因生物治疗和药物治疗的双功能杀伤效应开辟新的视野，使核酸引导的膀胱癌分子化疗成为可能。最终为解决这类患者的疾苦，同时为我省医疗卫生事业，构建和谐社会，节约医疗经费，创建循环型，节约型经济等多方面作出无声的贡献。五、现有工作基础、条件和优势（1）申请者2005年于华中科技大学同济医学院泌尿外科专业博士毕业。在校期间，曾从事2项国家自然科学基金的研