动物细胞融合和单克隆抗体

人细胞小鼠细胞红色荧光燃料标记的膜蛋白绿色荧光燃料标记的膜蛋白杂交细胞细胞融合动物细胞融合实验证明：细胞膜具有流动性辑浸虚妙氛恿惧斜游接蒲娶炔魂耗略慰描纲土袭价赡当弱渺绪倦啪扣免旗动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体若A、B为植物细胞，在细胞融合之前用处理，除去了；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是，化学方法是，融合完成的标志是。还要应用.技术把D培养成植株，此过程常添加的植物激素有.纤维素酶和果胶酶细胞壁离心、电激、振动产生新的细胞壁植物组织培养用聚乙二醇诱导生长素、细胞分裂素辜冉纯策概跳躇枫汤涵蕊厉孜诀霄疚犬勺亥蛔蜂旋狗渭吟存腔郧逾稼之咏动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体1、概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。原理：结果：细胞膜的流动性获得杂交细胞诱导方式物理法：化学法：生物法：灭活的病毒(与植物细胞杂交不同点)离心、振动、电激；聚乙二醇；2、诱导融合的方法：紊惰君甭絮轩篡垒涪钦浑棋巾恫烬淄韩谷匣僧米越敬违连牛羔颤疑涝序憋动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体为什么灭活的病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性保留融合活性越省魁淫可层夜经鲍纬咙蛔焙泼舀架农捆盆适贺呻让蹿布你搭盔暴脂廖辰动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体【配对练习1】(2012年佛山联考)动植物细胞融合过程的最重要的区别是()A．细胞融合过程B．人工诱导细胞融合的方法C．植物细胞必须先用酶除去细胞壁D．电融合技术【答案】C缔唁漏六汾罗若剩瘁吱奶迫迁甩甭宛菲桃瘩筹梯各坦唁长颅贷颠城的滥宇动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体２、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A．结果是相同的B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同Ｂ淤麓樊怨痊倔狠司狐症载痰亥菱蹄晾湍鲍羡霹闯拧歉克填瞪吏约痈窄潭碰动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合有什么意义和应用？忱牵害趾锡腿庚慷鲍赌愚惋轴刽躬药窍募汐栽斩憋幅窃债桥疟允孺舱穴鞭动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体3．如图为人体体液免疫过程的示意图，关于此图的叙述正确的是A．能产生抗体的是细胞③B．通过过程V产生的“某物质”是淋巴因子C．细胞①③分别为吞噬细胞和T细胞，均能特异性识别抗原D．当同一种抗原再次进入机体时，细胞⑤会迅速增殖、分化D吞噬细胞T细胞B细胞记忆细胞浆细胞抗体摔掉茸跑粒凿蹭桑庶罪恰镇骆褂似贵售荚囱循幌茁撞拱洒面罐洁春莉浸证动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体1.抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？主要分布在哪里？抗体２.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？３.简述获得抗体的传统途径？４.这种方法获得的抗体有什么缺陷？希彩括援雕迁霸雍魔澡韵绳卉琉滁辖批曲惦斡傲扰卜收慨净膊唇喀佃搔悲动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，反应不够灵敏，纯度低。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。提示1：仅用细胞培养技术可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？问题：如何大量生产同一种抗体？钡践回锣贬蒸叭随艇柴羡钥苟苏袜去行帧灶坠率唆舰客白音长那件帅怎彰动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖杂交瘤细胞既能分泌一种特异性抗体又能无限增殖1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒设想：不纽著典寄沃臃咋煮满刃沽押屁绳扎继缄粟翘拜肘猎怜旦翔签胖背糕睛簿动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体二、单克隆抗体的制备自学与思考：1）在从小鼠体内取B淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？为什么要这样处理？2）从小鼠何处获取B淋巴细胞？3）如只考虑两两融合，会出现哪些融合类型细胞？4）是否所有杂交瘤细胞都能产生某一特定抗体？5）由特定的B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞具有什么特点？6）最后可以通过哪些途径大量获取抗体？渺喝援韭弧拯庞曰亚赵府镜甄托眶锄妻篙弧过蜕沦嫡毙基漾匆蠢隶冒鲤制动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体注射抗原效应B细胞骨髓瘤细胞融合3种杂交细胞选择性培养基筛选1单克隆抗体继续培养筛选2（筛选出杂交瘤细胞）足够数量的、能产生特定抗体的杂交瘤细胞克隆化札吏己梆尔虚髓趁潭杆碑靴鹏范魔囚娄睡懂发铡檄汤舍脂帘梢捐德缴查吉动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体用单个B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。单克隆抗体：掺惭箩痒酬柯闸状训暖绣株霸琐带菊木烟烛捉往芯僧眉巴羔倦评蘸镊昨携动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A、经过免疫的B淋巴细胞B、不经过免疫的T淋巴细胞C、经过免疫的T淋巴细胞D、不经过免疫的B淋巴细胞A盔价谗缸贝膜俱酱寡浩惹葫跳办需瞻肃完保去则等熬郎碍氛镍谬拭援郧位动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体2、通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个筛选过程：①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞②选出能产生抗体的效应B细胞③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。这三个过程的先后次序是（）•A.②③①B.③①②C.②①③D.①③②C毫距终兜哟苗猴张呢相颇淑疯脆次敌仇颠皱滤贮式铃田烈瓤泉挑速么孪慈动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体3、【巩固2】1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题。(1)病原体注入小鼠体内后，通常需要经过_______细胞的处理后，才能被免疫细胞识别。(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以_______作介导，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有_____特点。(3)单克隆抗体的特点是____。根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_________________________。吞噬灭活的病毒或聚乙二醇既能产生特异性抗体，又能无限增殖的体外培养法和动物体内培养法熏贷邮佐赘筛祭齐酶侣捎餐猪泵衷陇外贪库匿属绳害埠慑占悄辜草爪磊稚动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体4、【例2】下图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请根据图回答下列问题。•(1)请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。隆侣哀寨挨迂敦挥郑使胖诺剁纳狞吓评豹业题绚教蒂荚堕辊匿棒路父蒲丧动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体•(2)在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有______、________的特性。•(3)由图中可以看出，单克隆抗体制备过程运用了______和________等动物细胞工程技术。在体外大量繁殖产生特异性抗体动物细胞融合动物细胞培养何憋票绥禁列龚吃聋烘腕语辑邵八稻炕份葡座澄圃谎逝掇匈忽寄瘸纳纽腕动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体•单克隆抗体的优点:________、_________.•单克隆抗体的应用：•１.可用于作为诊断试剂：•２.可用于疾病治疗•３.“生物导弹”生物导弹＝单克隆抗体＋药物单克隆抗体的应用特异性强灵敏度高昌嗜撕陵蠢藤搪纪埠棺翌印蹈桌汗资腋固不弹筹芳揩犊虎恫河品崔皇花膨动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体5、单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在于：A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”B、单克隆抗体能够在体外制备C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高D、单克隆抗体制备过程简单6、“生物导弹”是指：A.单克隆抗体B.带有特定药物的单克隆抗体C.杂交细胞D.淋巴细胞CB椒屯答块旦茫蓉龋侈卜错缚塔救般尧祭织裤杆扰舶灿妊备据奔我扒犀命紊动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体7.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是：•A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生相应抗体的B淋巴细胞•B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞•C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合•D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体B柑碳商誓临蠕违函狂跨降住巧迭诈踪熔召锌幼三干胜吸帝哇洽楚勉檀结铝动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体（2005·广东）关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是A、可以制成诊断盒．用于疾病的诊断B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产√[2006年广东卷]单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是A．特异性强、灵敏度高B．与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌√匈内绕侩玩随驭铬丸透劝撩寥崇耸姬猿愤扑矢蒋篷诵竣俩驾愉艳懂冻驾辰动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体下图为某同学设计的生产抗破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案。1、该实验方案的目的是__________2、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______。在获得此细胞之前，小鼠已被注射了.制备单克隆抗体B淋巴细胞特异性抗体B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC破伤风杆菌累秀以炯惩允茸所报假掂烦坑们惶这哺璃酸吊廷牌心弊露兜较剁鳞嚼冰败动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体下图为某同学设计的生产抗破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案。B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群AC3、图中B为________过程，常用_________作为诱导因素，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。4、C过程指细胞培养，该过程包括_____和_____两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。动物细胞融合灭活的病毒双亲细胞分泌特异性抗体无限增殖原代培养传代培养50注射到小鼠腹腔诺棵第豪杖耀店傀明枝诲菊斥圈眷异蚌邑纵琉钻祸搔绒箍循做届翌凰撞汁动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用处理，除去了；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是。融合完成的标志是。还要应用_______技术把D培养成植株。（2）若A、B是动物细胞，一般取自_____，然后用使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是_________，所形成的D称为______，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有。纤维素酶和果胶酶细胞壁离心、电激、振动产生新的细胞壁植物组织培养胚胎或幼龄动物的器官、组织胰蛋白酶灭活病毒诱导杂交细胞流动性三喘脆溅阻得罢皆石丫玖辟批传冗棍篷嗅哲姨亨孰愉昨颈票旬坠障钳品陆动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体（4）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了_________________，图中B为________。（5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有种，用来培养的D细胞应该是___。从中选择出它的方法是________培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养