药物分析芳酸及其酯类药物的分析

本类药物的结构特征（共性）①苯环本类药物的游离羧基酸性比较强，可成盐或成酯。②羧基-COOH直接与苯环相连.如水杨酸类、苯甲酸类药物;或羧基为磺酸基或通过烃氧基与苯环相连，如其他芳酸类。③其他取代基：如酚羟基、氨基等P113本章主要涉及三类药物（1）水杨酸类：代表药物有水杨酸、阿司匹林、对氨基水杨酸钠等药物。（2）苯甲酸类：代表药物如苯甲酸及其钠盐、丙磺舒、泛影酸、氨甲苯酸等。（3）其他芳酸类：代表药物有布洛芬、氯贝丁酯、酚磺乙胺、依他尼酸钠等。SA(Na)ASA3.一、水杨酸类（一）典型药物1、大多为固体，具有一定的m.p。2、除其盐易溶于水外，其余药物在水中难溶，易溶于有机溶剂。3、酸性较强。水杨酸酸性（pKa2.95)阿司匹林（pKa3.49）苯甲酸（pKa4.25)碳酸（pKa6.3)。4、对氨基水杨酸钠有芳伯氨基，可用NaNO2法测定。5、具有苯环和其他特征官能团，均具有UV和IR特征吸收光谱。6、芳酸酯类易水解，生产和贮存时注意防止水解。（二）主要理化性质COOHSO2-N(CH2CH2CH3)2二、苯甲酸类苯甲酸（钠）羟苯乙酯丙磺舒COOH(Na)COOC2H5OHCH3COOHNHCH3甲芬那酸1、大多为固体，具有一定的m.p。2、除其盐易溶于水外，其余药物在水中难溶，易溶于有机溶剂。3、具有苯环和其他特征官能团，均具有UV和IR特征吸收光谱。4、苯甲酸盐的中性溶液与三氯化铁反应生成赭色沉淀。5、含硫的丙磺舒能分解为亚硫酸钠。6、大多可用氢氧化钠液滴定，苯甲酸钠可采用双相滴定法测定含量。（二）主要理化性质三、其他芳酸类（一）典型药物氯贝丁酯布洛芬ClOCCOOC2H5CH3CH3CHCH2CCH3COOHCH3CH3（二）主要理化性质1、氯贝丁酯为无色或黄色油状液体，有特臭，易溶于有机溶剂，难溶于水。可加碱水解。2、布洛芬为固体，具一定m.p。易溶于有机溶剂，难溶于水。3、均具有UV和IR特征吸收光谱。4、均可用氢氧化钠滴定液进行滴定。根据其理化性质，主要的鉴别试验有显色反应、沉淀反应和吸收光谱法等。一、三氯化铁反应1.水杨酸及其盐FeCl3试液紫堇色铁配位化合物中性或弱酸性pH4-6H+FeFe+12HCl+4FeCl3SAOHCOOH6O-COO-（）23本反应的适宜pH为4～6，在强酸性溶液中配位化合物分解。•阿司匹林加热后也可与三氯化铁试液反应呈紫堇色；•对氨基水杨酸钠加稀盐酸呈酸性后，与三氯化铁试液反应呈紫堇色；•贝诺酯加氢氧化钠试液煮沸后，加盐酸呈微酸性后，与三氯化铁试液反应呈紫堇色2.苯甲酸的碱性水液或苯甲酸的中性溶液，与三氯化铁试液反应生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀。3.丙磺舒加少量氢氧化钠试液使生成钠盐后，在pH5～6水溶液中与三氯化铁试液反应，即生成米黄色沉淀。4.布洛芬也有类似反应（紫色）。二、重氮化-偶合反应（芳香第一胺反应）碱性β－萘酚偶氮染料1.对氨基水杨酸钠NaNO2试液PAS-NaH+重氮盐（无色）橙红色或猩红色+NaNO2+HClPAS-NaOHCOONaNH2N≡N+Cl-＋NaCl+2H2OOHCOONa（1）NaOH橙红色COOHOHN=N--OH＋NaCl+H2OCOOHOHN≡N+Cl-+OH（2）2.贝诺酯具潜在芳伯氨基，加酸水解后生成对氨基酚也有本反应发生。三、氧化反应甲芬那酸与重铬酸钾试液反应。四、水解反应1.阿司匹林等芳酸酯Na2CO3试液水杨酸钠＋醋酸钠H+化SA↓（白色）＋HAc↑（臭味）ASASA-Na+Na2CO3⑴ASACOONaOCOCH3+NaAc+CO2↑COONaOHSA-Na＋H2SO4⑶2NaAc+H2SO42HAc(臭)＋Na2SO42.双水杨酸也有类似反应；3.氯贝丁酯加碱水解后，可与盐酸羟胺及三氯化铁生成紫堇色异羟肟酸铁。4.羟苯乙酯的乙醇溶液煮沸后，可与硝酸汞试液反应。⑵2SA-NaCOONaOH（白色）＋Na2SO42SACOOHOH五、分解产物反应1.苯甲酸盐分解升华反应2.丙磺舒与氢氧化钠加热融熔后，分解生成的亚硫酸钠经硝酸氧化成硫酸盐而显硫酸盐反应。HOOCSO2N(CH2CH2CH3)2+3NaOHONa+H2O+CO2+Na2SO3+HN(CH2CH2CH3)2Na2SO3+[O]Na2SO4＋Ba2＋BaSO43.丙磺舒高温加热HNO3SO2（臭）六、UV吸收光谱UV吸收光谱为电子光谱，一般只有2～3个较宽的吸收峰，分子结构中的微小改变，紫外吸收光谱变化不大，故其鉴别特征不如IR光谱。一般可利用紫外特征吸收光谱（最大与最小吸收波长）及两波长处吸收度比值。七、IR吸收光谱IR吸收光谱为分子的振转光谱，它比UV光谱专属性好，因此多用于药物的鉴别。图如下：一、阿司匹林中特殊杂质的检查主要项目有：游离水杨酸、溶液澄清度、易炭化物。（一）合成工艺CO2H++(CH3CO)2O乙酰化＋HAcASASACOOHOHCOOHOHONaONaCOONaOCOCH3COOH（二）水杨酸的检查：ASA中SA的来源有：（1）生产过程中乙酰化不完全；（2）贮藏过程中水解产生。检查原理：利用阿司匹林结构中无酚羟基，不与高铁盐（Fe3+)作用，而水杨酸则可与Fe3+反应生成紫堇色，在相同条件下与一定量水杨酸对照液生成的色泽进行比较，不得更深，从而控制游离水杨酸的限量。阿司匹林原料与其制剂（片剂、肠溶片、栓剂）均需作本项检查，限量分别为0.1％、0.3%、1.5%、1.0％。二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查（一）间氨基酚杂质的产生两种来源途径：（1）合成原料中反应未完全留下；（2）在贮藏时受热受潮脱羧（－CO2)产生。（二）双相滴定法及检查原理中国药典2000版（Ch.P2000)采用双相滴定法进行。利用PAS-Na不溶于乙醚，而间氨酚易溶于乙醚性质，在乙醚中加入水，用盐酸（0.1mol/L）滴定，以消耗一定量盐酸滴定液来控制其限量。生成的盐酸盐在乙醚中不溶，而溶于水中。三、羟苯乙酯中有关物质的检查本品有关物质检查采用反相TLC法（略）四、甲芬那酸中特殊杂质的检查检查“铜盐”与“有关物质”：VIS、AAS与TLC法（略）五、氯贝丁酯中特殊杂质的检查对氯酚及挥发性杂质检查：GC、HPLC法（略）（三）HPLC法USP(24)采用离子对高效液相色谱法检查间氨酚的限量。一、酸碱滴定法（中和法）：阿司匹林原料与其片剂在Ch.P2000中采用本法进行，但具体操作方法有所不同。（一）直接滴定法:用于阿司匹林原料测定原理：+NaOH中性乙醇酚酞+H2O利用ASA中游离羧基的酸性，以中性乙醇为溶剂，直接以NaOH滴定液滴定。OCOCH3COOHOCOCH3COONa注意事项：（1）为便于溶解而又防止在滴定时水解发生，使测定结果偏高，需采用中性乙醇为溶剂。（2）滴定时应不断振摇，速度稍快，室温下进行，否则可使样品发生水解而使结果偏高。（3）以酚酞为指示剂，粉红色出现30秒不退即为终点。（4）计算公式：（详见P70～71）。含量％＝Ｖ·Ｔ·ＦＷ×100％其中：V—终点消耗NaOH滴定液体积；F—滴定液校正因数＝实际浓度/规定浓度；W—样品重量（mg)T—滴定度；（二）两步滴定法:用于阿司匹林片及其肠溶片的测定。因片剂中加入了稳定剂酒石酸和枸橼酸，故不能采用直接滴定法，而须采用先中和与供试品共有的酸（稳定剂及水杨酸），再将阿司匹林在碱性条件下水解后进行测定的方法。1、中和（第一步）：+NaOH+NaAc+SA-Na+酒石酸钠2、水解与测定（第二步）：（水解）加40.00ml(过量)NaOH液水浴加热15分钟+NaAc中性乙醇酚酞OCOCH3COONaOCOCH3COONaOCOCH3COOHSA-NaCOONaOH(回滴)2NaOH(剩余)+H2SO4酚酞Na2SO4+2H2O注意事项:(1)碱液在受热时极易吸收空气中CO2，用酸回滴时使测定结果偏低。故需在相同条件下作空白试验校正。(2)第一步时以溶液出现粉红色30秒不退即得，再精密加入40ml氢氧化钠滴定液（可从滴定管上加入）。（3）水浴加热应在15分钟以上并振摇，保证水解完全。（4）计算公式：见下页（详见P70～71）。（三）水解后剩余滴定法USP(24)用于ASA原料的测定（略）羟苯乙酯也采用此法。(V空-V样)H2SO4.T.F.W片每片ASA含量占标示量%=————————————————100%W样.标示量1000二、亚硝酸钠滴定法（重氮化法）为Ch.P2000PAS-Na采用的含量测定方法，永停法指示终点。ArNH2+NaNO2+2HCl→[Ar-N+≡N]Cl-+NaCl+2H2O其中：V空、V样—回滴时消耗硫酸滴定液的体积数（ml）。W片—平均片重（g）。标示量（g/片）。原理：苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水，其水溶液呈碱性，可用盐酸滴定液滴定，但在滴定过程中析出的游离酸不溶于水，并使滴定终点的pH突跃不明显，不利于终点的正确判断。利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，在水相中加入与水不相溶的有机溶剂（如乙醚），并置分液漏斗中进行滴定反应，滴定过程中产生的苯甲酸不断萃取入有机溶剂层中，使滴定反应完全，终点清晰，同时可降低苯甲酸的离解。三、双相滴定法四、UV法（一）直接UV法中国药典采用此法测定丙磺舒含量，中国药典多采用百分吸收系数（）法计算。注意这一方法的计算公式：五、HPLC法1.Ch.P(2000)用于测定ASA栓剂2.丙磺舒原料含测含量相当于标示量％=A×D×V×W片（E1%）1cm×100×W样×S标×100％（二）离子交换－UV法氯贝丁酯含测（三）柱分配色谱－UV法USP（24）用于ASA胶囊含测E1%1cm一、血清中ASA和SA浓度的HPLC测定法（略）二、尿中丙磺舒的固相萃取净化－HPLC分析法（略）三、HPLC法测定人血浆中布洛芬含量（略）本章小结1、芳酸及其酯类药物的结构特征及分类，熟悉其理化性质（溶解性、酸性）。2、掌握水杨酸类、苯甲酸类药物的代表药结构。3、掌握水杨酸类药物的鉴别反应（三氯化铁反应、水解反应、重氮化－偶合反应）。4、掌握阿司匹林、对氨基水杨酸钠中的特殊杂质（水杨酸、间氨基酚）。5、掌握直接滴定法、两步滴定法对阿司匹林片进行含量测定的原理与计算。6、掌握双相滴定法对苯甲酸钠进行含量测定的原理。