第9章 化脓性球菌

2020/1/251细菌学各论刘斌波Mobile:13164173664E-mail:[e-mail]武汉大学基础医学院微生物学教研室2020/1/252细菌学各论怎样学？生物学性状内容致病性免疫性微生物学检查方法防治原则治疗方面预防方面标本涂片染色镜检分离培养鉴定致病物质所致疾病致病机制免疫的特点形态与染色培养和生化反应抗原构造分类或分型抵抗力2020/1/253第9章化脓性球菌2020/1/254概述按革兰染色分二类：G＋：葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等G－：脑膜炎双球菌、淋球菌等其中对人类具有致病性球菌－病原性球菌2020/1/255共性：①形态：球形或类球形②结构：无鞭毛，无芽胞③致病性：主要引起化脓性炎症－化脓性细菌（pyogenicbacteria)④对药物的敏感性：对青霉素、磺胺类药物敏感2020/1/256第一节葡萄球菌属（Staphylococcus）2020/1/257一、生物学性状（一）形态与染色：球形，多呈葡萄串状排列。无鞭毛及芽孢。G+（二）培养特性：•营养要求不高•需氧或兼性厌氧•温度37℃•pH7.4•菌落形态：中等大小，光滑型菌落，产生脂溶性色素。•在血琼脂平板上形成β溶血环（三）生化反应致病性葡萄球菌能发酵甘露醇2020/1/258金黄色葡萄球菌纯培养镜下形态（革兰染色）2020/1/2592020/1/25102020/1/25112020/1/2512（四）抗原构造2020/1/25131．蛋白质抗原：主要有葡萄球菌蛋白A（StaphlococcusProteinA；SPA）①SPA的概念即葡萄球菌蛋白A，是金葡菌细胞壁表面的蛋白质抗原，可与多种哺乳动物IgGFC段发生非特异性结合，此点为SPA协同凝集试验以及SPA具有抗吞噬等生物学效应的原理的基础。2020/1/2514协同凝集试验含A蛋白的金葡菌结合IgG的金葡菌IgGAg2020/1/2515②生物学效应：A．抗吞噬作用FabFcSPAIgGFcreceptorPHAGOCYTEBACTERIUM2020/1/2516B．促有丝分裂作用：SPA为人的T、B细胞激活剂→T、B细胞增殖C．诱发变态反应：使嗜碱性粒细胞释放组织胺2．多糖抗原为半抗原，具有群的特异性，故可用此抗原进行分群2020/1/2517（五）分类：方法很多1．根据色素、生化反应和致病性：金黄色葡萄球菌（S.aureus）：金黄色表皮葡萄球菌（S.epidermidis）：白色腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）：柠檬色2．根据凝固酶：凝固酶阳性菌株凝固酶阴性菌株2020/1/2518(六）抵抗力强于其他无芽胞菌干燥脓汁、痰液中存活2-3个月加热60℃1h或80℃30min耐盐性强(能在10～15%NaCl培养基上生长)对碱性染料敏感对多数抗生素敏感，但易产生耐药性2020/1/2519二、致病性（一）致病物质：主要为毒素和酶1．凝固酶（coagulase）：致病性葡萄球菌产生，非致病性葡萄球菌不产生。有两种：结合凝固酶：结合于菌体表面→使菌凝聚游离凝固酶：纤维蛋白元→纤维蛋白→血浆凝固作用：①抗吞噬②保护细菌③使病灶局限④易形成血栓2020/1/25202．葡萄球菌溶素（staphlolysin）由致病性葡萄球菌产生分类：按Ag性不同分为α、β……五种。作用：损伤细胞膜：如RBC，WBC，血小板，肝细胞等。3．杀白细胞素（leukocidin）作用：只攻击中性粒细胞和巨噬细胞，主要作用于细胞膜。4．肠毒素（enterotoxin）：约1/3的金葡菌能产生肠毒素，为外毒素特点：耐热：100℃30′，耐蛋白酶作用：引起食物中毒：进食含肠毒素食物后1～6h潜伏期，出现恶心、呕吐、上腹痛、腹泻等症状。呕吐最为突出。大多数病人于1～2d内可自行恢复，预后良好。2020/1/25215.表皮剥脱毒素（exfoliativetoxin）—表皮溶解毒素特点：为蛋白质，具有Ag性—类毒素引起剥脱性皮炎（患者皮肤呈弥漫性红斑和水疱→继之表皮上层大片脱落）6.毒性休克综合征毒素-1（toxicshocksyndrometoxin1,TSST-1)特点：起病急，高热，昏厥，休克，多器官衰竭2020/1/2522PathogenesisofstaphylococcalinfectionsStye:麦粒肿Carbuncle:痈Impetigo：脓疱疮2020/1/2523（二）所致疾病1．侵袭性疾病：局部化脓性感染特点：全身感染2．毒素性疾病：①食物中毒：特点：②假膜性肠炎：菌群失调③烫伤样皮肤综合征④毒素休克综合征2020/1/25242020/1/25252020/1/2526三、微生物学检查法1．取材：根据不同疾病取不同材料2．直接塗片镜检：革兰染色3．DifferentialTests：①致病性葡萄球菌的鉴别要点：②葡萄球菌肠毒素的检查（动物接种；免疫学方法（ELISA）；PCR等）2020/1/2527①致病性葡萄球菌的鉴别要点：性状金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素金黄色白色白色或柠檬色发酵甘露醇+--凝固酶+--α溶素+--耐热核酸酶+--SPA+--致病性+--2020/1/2528小猫试验总结微生物检查法标本脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检革兰阳性葡萄球菌生长现象色素，溶血，生化反应毒素检查2020/1/2529防治原则防注意消毒隔离注意个人卫生防止医源性感染防止耐药性产生治抗菌素药敏试验自身菌苗疗法2020/1/2530第二节链球菌属(streptococcus)2020/1/2531一、生物学性状（一）形态与染色：球形，成链状排列（二）培养特性：1．营养要求较高：血液，血清2．在血琼脂培养基上：细小菌落3．在液体培养基中：沉淀生长2020/1/25322020/1/25332020/1/25342020/1/2535（三）分类1．根据溶血现象分为：甲、乙、丙三个型2．根据抗原结构分类：①核蛋白Ag（P-Ag）：无特异性②多糖Ag（C-Ag）：有群特异性，分为A.B……20个群，对人致病主要在A群③表面蛋白Ag：表面Ag有型的特异性，主要有M，R，T，S四种：如A群约100个型2020/1/2536Classsification:Hemolyticactivity:-hemolyticstreptococcus:incompletehemolysis,greenzonearoundcolonies*opportunisticpathogens-hemolytic/pyogenicstreptococcus:completehemolysis,clearzonearoundcolonies*majorhumanpathogens-streptococcus:nohemolyzation,nopathogenicity2020/1/2537二、致病性（一）致病物质：主要介绍A群链球菌依靠外毒素和酶1．链球菌溶素（streptolysis）两种：slo和sls①slo：特点：对O2敏感；有Ag性；对机体细胞有毒性作用（如WBC）：引起WBC胞内内溶酶的释放，导致细胞死亡②sls：特点：对O2稳定；无Ag性2．致热外毒素（Pyrogenicexotoxin）：又称红疹毒素或猩红热毒素：发热，全身红斑3．透明质酸酶：溶解细胞间质的透明质酸→使病菌扩散→扩散因子2020/1/25384．链激酶（streptokinase；SK）使血液中纤维蛋白酶元→纤维蛋白酶，溶解纤维蛋白→又称溶纤维蛋白酶5．链道酶（streptodornase；SD）降解脓汁中具有高度粘稠性的DNA---又称链球菌DNA酶6．M蛋白：作用：抗吞噬与心肌、肾小球基底膜有共同抗原→超敏反应性疾病7．F蛋白（proteinF）：作用：粘附于上皮细胞，与致病性有关2020/1/2539（二）所致疾病1．急性化脓性感染①皮肤和皮下组织炎症特点:易于扩散②呼吸道感染2．中毒性疾病：猩红热3．超敏反应性疾病：①急性肾小球肾炎②风湿热2020/1/2540网状淋巴结炎—丹毒管状淋巴管炎2020/1/2541呼吸道感染引起小儿猩红热:临床特征为发热、全身弥漫性皮疹和疹退后的明显脱屑，病后可获得较强的免疫力。猩红热皮疹2020/1/2542A.急性肾小球肾炎:多见于儿童和青少年，大多数由A群M12型链球菌引起。临床表现为蛋白尿、浮肿和高血压。B.风湿热:主要在咽炎后有可能发生，由A族链球菌的多种型别引起。临床表现以关节炎、心肌炎为主。致病机理:Ⅱ、Ⅲ超敏反应2020/1/2543三、免疫性：1．抗M蛋白的抗体2．各型间无交叉免疫，型别多—反复感染3．链球菌致热外毒素抗体（SPE抗体）终身免疫，但无交叉免疫4.ASO试验（antistreptolysinOtest)用SLO检测血清中的ASO抗体，常用于风湿热、急性肾小球肾炎的诊断2020/1/2544四、微生物学检查法直接涂片镜检标本革兰阳性链球菌分离培养脓汁，血液，咽喉拭子与金葡菌的鉴别与肺炎链球菌的鉴别2020/1/2545五、防治原则•积极治疗儿童链球菌感染，防止风湿热或急性肾小球肾炎等并发症的发生。•选用青霉素，对青霉素过敏者可改用红霉素﹑林可霉素。疗程不应少于10天。2020/1/2546第三节肺炎球菌（Pneumococcus）是细菌性肺炎的主要病原菌2020/1/2547一、生物学性状（一）形态与染色：G＋，呈双排列，矛尖状，矛尖向外，宽端相对，有毒株有荚膜，人工培养后消失。（二）培养特性：营养要求高，在血培养基上－草绿色溶血环（三）抗原结构：荚膜多糖抗原、C多糖、M蛋白CRP（Creactionprotein,C反应蛋白):肺炎球菌的C多糖可与人血清中球蛋白非特异性结合，发生沉淀反应，所以又称该蛋白为CRP。CRP不是抗体，正常人血清中含量低，急性炎症或风湿热时，CRP含量升高，可用于风湿热的辅助诊断。2020/1/25482020/1/25492020/1/25502020/1/2551二、致病性：（一）致病物质：主要为荚膜（二）所致疾病：主要引起人类的大叶性肺炎三、与甲链的鉴别要点相同点：G＋球菌；草绿色溶血环不同点：见下表2020/1/2552肺炎双球菌甲型溶血性链球菌排列成双链状菌落脐状（因产生自溶酶）无脐状试验发酵菊糖+-胆汁溶菌试验+-奥普托欣试验抑菌圈直径20mm↑20mm↓2020/1/2553第四节奈瑟菌属（Neisseria）是一群G－球菌，常呈双排列该菌属中只有脑膜炎双球菌和淋球菌对人类致病性2020/1/2554脑膜炎球菌（meningococcus）引起流行性脑脊髓膜炎2020/1/2555一、生物学性状（一）形态与染色G－球菌，多呈双排列。在患者脑脊液中，多位于白细胞内呈肾形，两凹面相对（二）培养特性营养要求高常用培养基：巧克力血琼脂培养基初次分离培养：需供给5-10%CO22020/1/25562020/1/25572020/1/25582020/1/25592020/1/2560（三）抵抗力怕冷怕热，怕干燥，怕阳光，易产生自溶酶二、致病性（一）致病物质1．菌毛2．荚膜3．内毒素：为主要致病物质2020/1/2561飞沫传染源带菌者健康人鼻咽部上呼吸道症状病人生长繁殖（1-4天）↓脑双菌进入血流↓畏寒、发热、恶心、呕吐菌血症/败血症：↓通过皮肤瘀斑等症血脑屏障↓到达脑脊髓膜↓流行性脑脊髓膜炎（流脑）头痛，喷射性呕吐，发热，颈项强直等（为颅内压↑所致）（二）致病经过及所致疾病2020/1/2562小结:a.人类自然免疫力较强，感染后只有2-3%发病b.可为各种钝挫型c.多见于儿童d.病后免疫力较强，一般不会患第2次e.致病因素：主要是内毒素2020/1/2563儿童和成人的脑膜炎症状2020/1/2564三.微生物学检查法标本分离培养与鉴定脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭保暖、保湿、立即送检，培养基预温直接涂片镜检中性