志贺氏菌检验方法

志贺氏菌检验方法志贺氏菌简介志贺氏菌检验12生物学性状志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短小，长约2-3μm,宽0.5-0.7μm。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。为兼性厌氧菌，在有氧和无氧条件下均能生长；最适生长温度为36℃，最适pH为7.2～7.4；36℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2mm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。致病因素志贺氏菌的致病因素包括侵袭力、内毒素，外毒素。志贺氏菌的菌毛能粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细胞表面，继而在侵袭蛋白作用下穿入上皮细胞内，一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶。各型痢疾杆菌都具有强烈的内毒素。志贺氏菌A群Ⅰ型及部分II型菌株还可产生外毒素，称志贺氏毒素。志贺氏菌属（Shigella）是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌。细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。可经由食物，水，日常接触，苍蝇等传播。抵抗力志贺氏菌属在外界环境中的生存力，对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱，对酸敏感。一般在潮湿土壤中能存活34天，37℃水中存活20天，在粪便内（室温）存活11天。日光直接照射30分钟，56-60℃10分即被杀死，对高温和化学消毒剂很敏感，1%石炭酸中15-30分钟即被杀死，对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感，但易产生耐药性。志贺氏菌检验流程图36℃±１℃，6h～8h41.5℃±１℃，16h～20h厌氧培养XLD琼脂MAC琼脂或志贺氏菌显色培养基36℃±１℃，20h～48h挑取可疑菌落TSI，葡萄糖半固体，营养琼脂斜面血清学分型生化鉴定志贺氏菌属分群及分型结果报告检样25g（或25mL）样品+志贺氏菌增菌肉汤225mL检样25g（或25mL）样品+GN增菌液225mLXLD琼脂平板志贺氏菌沙门氏菌菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径1mm～2mm。麦康凯琼脂平板无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径2mm～3mm。培养物中出现下述情况之一者即可弃去：a）在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长；b）发酵乳糖或蔗糖的；c）不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的；d）产气的（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）；e）产生硫化氢的；f）有动力的培养物2——志贺氏菌3——沙门氏菌4——大肠杆菌血清学分型凡疑为志贺氏菌，挑取营养琼脂斜面上的培养物，做玻片凝集试验。先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查；如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见附表。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1～15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3～12型多价血清及各型因子血清检查。进一步的生化试验1.VITEKGNI+(革兰氏染色，氧化酶)2.API20E(革兰氏染色，氧化酶)3.志贺氏菌生化鉴定套装ThankYou!