蔬菜农药残留的快速检测原理和检测标准

蔬菜农药残留的快速检测方法原理及检测标准1、目前农药在蔬菜中的残留问题农药是把“双刃剑”，对促进农业增产有极其重要的作用。但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当，导致农产品农药残留严重超标，严重危害到广大人民群众的身体健康。在我国农药中，70％为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中，70％为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。2、农药中毒事件常有报道，究其原因1.农产品不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药，或施用不允许在蔬菜上使用的剧毒、高毒农药；2.现在标准施行的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行，无法对廉价的蔬菜进行随时随地或快速的检测而形成的监管不到位。重庆忠县复兴镇发生一起农药中毒事件3人死亡11人住院（2011年有机磷农药中毒）安康16村民农药中毒14户村民饮用了村里一口水井里的水，井水确实有些异味，下午4时许，已有村民出现身体不适症状。根据警方调查，中毒与井水有关春蚕间接农药中毒事件春蚕不吐丝，蚕农受到很大损失（花农中流行着一种叫可汗的农药,毒低效高.其中主要含有防治害虫的保幼激素）蔬菜喷杀虫剂忘告家人毒倒自家娃事发当天，在自家种的蔬菜上喷洒了农药杀虫，后来有事外出忘记了叮嘱子女，结果下午三姐弟准备晚餐时，摘了些蔬菜几人炒着吃，不料就发生了中毒，上吐下泻3、农药分类：按来源分类*按化合物结构分类无机化合物化学合成农药生物源农药矿物源农药有机合成化合物天然有机物抗生素生物农药有机氯化合物有机磷化合物拟除虫菊酯氨基甲酸酯杂环类化合物其它（苯氧羧酸类、脲类化合物）矿物源农药有效成分起源于矿产无机物和石油的农药。代表有硫酸铜、硫磺、石硫合剂、磷化铝、磷化锌和石油乳剂等生物源农药包括植物源农药和动物源农药及微生物源农药。植物类别有植物毒素、植物内源激素、植物源昆虫激素、拒食剂、引诱剂、驱避剂、绝育剂、增效剂、植物防卫素、异株克生物质等。动物资源开发的农药包括动物毒素、昆虫激素、昆虫信息素和天敌等。按作用方式分类胃毒性农药（敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）触杀性农药（对硫磷、敌敌畏、甲胺磷、马拉硫磷）内吸性农药（乐果、甲胺磷、氧乐果、久效磷）薰蒸性农药（溴甲烷、磷化铝、敌敌畏）特异性农药（乙烯利、赤霉素、灭幼脲）4、目前所使用的农药按其化学结构大致可分为以下几类：有机氯类；有机磷类；氨基甲酸酯类；拟除虫菊酯类杂环类化合物其它（苯氧羧酸类、脲类化合物）等。我国常用农药A、有机磷类滴滴畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、伏杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫磷、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、乙硫磷等我国常用农药B、有机氯类α-666、β-666、γ-666、δ-666、op–DDE、pp’-DDE、op’–DDD、pp’-DDD、pp’-DDT、op’-DDT、异菌脲、五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯杀螨醇、功夫、氯硝胺、百菌清、粉锈宁、甲氰菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。我国常用农药C、氨基甲酸酯类涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、3-羟基呋喃丹、涕灭威、呋喃丹、甲萘威、叶蝉散、仲丁威、速灭威等5.最大残留限量标准最大残留限量（MaximumResidueLimit，MRL）在农畜产品中农药残留的法定最高允许浓度，又称最高残留限量，以每千克农畜产品中农药残留的毫克数（毫克/千克）表示。目的：控制食品中过量农药残留以保障食用者安全，对超标的产品采取措施，即禁止食用。推行和指导合理用药，农产品监测超标时，表明未按规定用药。减少国际贸易纠纷，各国均制订本国的MRL。《食品中农药最大残留限量》标准GB2763-2014,规定了387种农药最高残留限量。国家标准作为一项加强农药管理的措施。其中，针对蔬菜、水果、茶叶等鲜食农产品农药残留超标多发、易发问题，新标准重点增加了蔬菜、水果等鲜食农产品的限量标准。水果农药残留限量增加４７３项，蔬菜（包括食用菌）农药最大残留限量增加４３１项。6、高毒农药禁限用管理措施农业部、工业和信息化部、环境保护部、国家工商行政管理总局和国家质量监督检验检疫总局于2011年6月15日发布第1586号公告，决定对高毒农药采取进一步禁限用管理措施。.高毒农药禁限用管理措施停止受理苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷、杀扑磷、甲拌磷、甲基异柳磷、克百威、灭多威、灭线磷、涕灭威、磷化铝、氧乐果、水胺硫磷、溴甲烷、硫丹等22种农药新增田间试验申请、登记申请及生产许可申请；停止批准含有上述农药的新增登记证和农药生产许可证（生产批准文件）。高毒农药禁限用管理措施撤销氧乐果、水胺硫磷在柑橘树，灭多威在柑橘树、苹果树、茶树、十字花科蔬菜，硫线磷在柑橘树、黄瓜，硫丹在苹果树、茶树，溴甲烷在草莓、黄瓜上的登记。本公告发布前已生产产品的标签可以不再更改，但不得继续在已撤销登记的作物上使用。高毒农药禁限用管理措施自2011年10月31日起，撤销（撤回）苯线磷、地虫硫磷、甲基硫环磷、磷化钙、磷化镁、磷化锌、硫线磷、蝇毒磷、治螟磷、特丁硫磷等10种农药的登记证、生产许可证（生产批准文件），停止生产；自2013年10月31日起，停止销售和使用。根据以上情况，制定出有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法，加强对农药残留的快速检测已成为十分必要的监管措施。7、农药残留主要的检测方法有两种：1、色谱检测法色谱检测法用作农残定量分析，可为农药残留执法提供依据。色谱法（包括气相色谱、液相色谱、气质联用等）。优点：灵敏度高、准确、定性定量；缺点：成本高、操作复杂、时间较长。7、农药残留主要的检测方法有两种：2、速测仪法速测仪法只能作为农残定性分析，易于在基层推广等特点，是目前我国控制高毒农药残留的一种有效方法，也是目前国内和我省应用最为广泛的农药残留快速检测方法。A速测仪法的主要优点：1.该方法具有快速方便、前处理简单、成本较低等优点，适用于现场定性测定，特别适合在蔬菜生产基地、批发市场及农产品检测部门开展快速检测工作。2.该方法可对有农药残留的蔬菜进行粗筛，将一部分农药残留含量较高的蔬菜控制在市场之外，避免因农药残留发生中毒事件。B速测仪法的主要缺点:1.酶试剂易失活，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好，实际应用中的确认率大约为60%~70%左右；2.存在检测盲区，只能检测有机磷和氨基甲酸酯两类农药，不能检测有机氯类、菊酯和其它类别的剧毒农药；3.不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等14种容易出现假阳性的农产品；8、农药残留速测法依据的标准中华人民共和国国家标准GB/T5009.199—2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会发布8、农药残留速测法依据的标准中华人民共和国农业行业标准NY/T488—2001蔬菜上有机磷和氨基甲酸醋类农药残毒快速检测方法2001-06-01发布2001-10-01实施中华人民共和国农业部发布9、速测仪的检测方法有两种:(NY/T488—2001和GB/T5009.199-2003)⒈速测卡法（纸片法）⒉酶抑制率法（分光光度法）10、两种快速检测方法的技术原理根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中的乙酰胆碱酯酶的活性造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，导致昆虫中毒致死的原理而设计。如果蔬菜中不含有机磷和氨基甲酸酯类农药，乙酰胆碱酯酶水解后，水解产物可与显色剂反应产生颜色。两种快速检测方法的技术原理如果蔬菜中含可以抑制乙酰胆碱酯酶的活性的有机磷和氨基甲酸酯类农药，这种酶就不能被水解，从而无显色反应。在溶液中加入乙酰胆碱酯酶和显色剂，用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是否存在。11、速测卡法（纸片法）纸片速测仪插入速测卡START+SET-DISP黄白按键加热片导纸条图2红11、速测卡法（纸片法）1.试剂1.1固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(速测卡)。1.2pH7.5缓冲溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠(Na2HP04·12H2O)与1.59g无水磷酸二氢钾[KH2P04]，用500mL蒸馏水溶解。2仪器2.1常量天平有条件时配备37℃±2℃恒温装置速测卡法（纸片法）3.分析步骤3.1整体测定法3.1.1选取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，震摇50次，静置2min以上。3.1.2取一片速测卡，用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。速测卡法（纸片法）3.1.3将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合反应。3.1.4每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。速测卡法（纸片法）3.2表面测定法（粗筛法）3.2.1擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴缓冲溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。3.2.2取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。速测卡法（纸片法）3.2.3放置10min以上进行预反应，有条件时在37℃恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必须保持湿润。3.2.4将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红色药片与白色药片叠合反应。3.2.5每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡。结果判定阳性结果阴性结果白色蓝色结果判定结果以酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制(为阳性)、未抑制（为阴性）表示。与空白对照卡比较，白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。对阳性结果的样品，可用其它分析方法进一步确定具体农药品种和含量。速测卡法（纸片法）注意事项1.有些蔬菜如生姜、葱、蒜、辣椒和番茄等的汁液中含有破坏酶活性或者使蓝色产物褪色的物质，处理这类蔬菜时，不要让其汁液太多释放出来，不要剪得太碎，浸提时间不宜过长，必要时可采用整枝蔬菜浸提或采用表面测定法进行测定。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。速测卡法（纸片法）注意事项2.试纸上的提取液不可太多而溢出试纸，亦不可太少而使反应不完全。3.最好将每一批样品处理好后一起加样，以免时间过长蒸干。速测卡法（纸片法）注意事项4.当温度条件低于37℃，酶反应的速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定，应以空白对照卡用（体温）手指捏3分钟时可以变蓝，即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。5.空白对照卡不变色的原因：一是药片表面缓冲溶液加的少，预反应后的药片表面不够湿润，二是温度太低。速测卡法（纸片法）注意事项6.如有条件，将农药速测卡放在10℃以下保存效果会更好，每小包产品开封后最好在三天内用完，如用不完，可放入将有变色硅胶吸潮剂的瓶中密封保存，如发现农药速测卡的红色药片由鲜红橙色变为暗淡的褐红色，说明纸片已吸潮失效。PR-3便携式农药残毒快速检测仪操作步骤1.接通电源，右侧开关拨至“开”，打开上盖按“START”键预热；2.当预热达到设置反应温度TEMP时，听到“哗”一声，屏幕显示“TEMP1”，预热结束，等待倒计时；3.去试纸外膜，插入试纸（白片在下端），在白片上分别加1-2滴提取液；PR-3便携式农药残毒快速检测仪4.再次按“START”键，单片电脑开始“TEMP1”倒计时；5.当听到连续“哗、哗、哗”声，屏幕显示“CLOS”，提示合上前盖，进入“TEMP2”倒计时；6.当听到六声“哗、哗、哗”音，本次操作结束，打开上盖观察试纸颜色变化；7.试纸显示蓝色为阴性，浅蓝色为弱阳性，白色为阳性