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丙型肝炎实验室检测策略病原学病原—丙型肝炎病毒(HCV)HCV的特性黄病毒科有包膜单股正链RNA病毒(9.6kb)3000氨基酸组成的多聚蛋白病毒基因组具有高度变异性增殖速度快,每日复制量:10兆(1012)病毒颗粒结合囊泡融合与病毒释放RNA复制正链负链翻译与多肽链加工脱壳与膜融合病毒装配与成熟胞饮作用HCV生活周期DavisGLetal.SeminLiverDis.1999;19(suppl1):103-112.HCV、HIV的比较HCVHIV病毒类型RNA病毒(黄病毒科)RNA病毒(逆转录病毒科)血液传播血液水平传播为主,输血制品、静脉吸毒、不洁注射、性乱、纹身美容等血液水平传播为主性乱、输血制品、静脉吸毒、不洁注射、母婴传播少见可见抗体无保护作用无保护作用预防目前无疫苗目前无疫苗HBV和HCV特点比较HBV双链DNA病毒嗜肝DNA病毒科4个开放读框高病毒血症高感染性与宿主基因整合无细胞毒性HCV单链RNA病毒黄病毒科1个开放读框低病毒血症低感染性不与宿主基因整合细胞毒性(?)HCV基因型分为6个主要基因型及不同亚型命名:以阿拉伯数字表示HCV的基因型,以小写的英文字母表示亚型(如1a、2b)基因1-3型呈全球性分布欧美和亚洲1和2型为主,东南亚为3型,中东为4型,南非5和6型为主我国以1b、2a型为主丙型肝炎病毒基因分型1a,1b2a,2b,3a1a,1b2a,2b,2c,3a45a1b1b,61b,3a1b,3a3b4ClinicalMicrobiologyReviews,2000,13(2)223-235HCV1b和2a型是我国主要流行型1a,1b,2b,3a2aHCV感染的自然史HCV感染的自然史HCV急性感染痊愈的血清学特征HCV急性感染进展为慢性感染的血清学特征HCV实验室检测技术规范第一章丙型肝炎病毒第二章丙型肝炎病毒抗体检测第三章丙型肝炎病毒抗原检测第四章丙型肝炎病毒核酸检测第五章丙型肝炎病毒基因型检测第六章丙型肝炎病毒细胞培养第七章实验样品的采集、保存、运输第八章丙型肝炎病毒检测实验室的室内质量控制及能力验证第九章实验室生物安全丙型肝炎病毒抗体检测筛查试验:酶联免疫吸附试验、胶体金法快速试验、化学发光试验、免疫荧光试验补充试验:重组免疫印迹(RIBA)蛋白印迹试验丙型肝炎病毒抗原检测目前采用双抗体夹心ELISA定性或定量检测样品中游离的HCV核心抗原或总核心抗原丙型肝炎病毒核酸检测HCVRNA定性检测:血液筛查、发现窗口期感染HCVRNA定量检测:判断抗病毒治疗疗效实时荧光定量PCR、b-DNA技术丙型肝炎病毒检测策略诊断:确定个体HCV感染状况血液筛查:防止输血传播HCV监测:了解人群HCV感染率及变化趋势筛查试剂样品阴性反应初筛试验阳性反应复检试验均阴性反应一阴一阳均阳性反应补充试验原有试剂双孔或原有试剂加另一种不同原理(或厂家)试剂报告阴性图临床诊断筛查检测流程复检阳性样品阳性反应免疫印迹试验阴性反应报告阴性图HCV临床诊断补充试验检测方法一流程可疑报告可疑报告阳性初/复检阳性样品可疑免疫印迹试验阴性反应报告阴性图HCV临床诊断补充试验检测方法二流程阳性反应报告阳性报告可疑根据S/CO值判断高S/CO值低S/CO值另一种抗体筛查试剂或NAT血液筛查相关的检测策略样品阳性反应初筛试验阴性反应复检试验阳性反应阴性反应报告阳性待确证抗体筛查试剂报告阴性图血液筛查检测流程疫情监测相关的检测策略样品阴性反应初筛试验阳性反应复检试验阴性反应阳性反应报告阴性筛查试剂1报告阳性筛查试剂2图HCV感染疫情报告检测流程谢谢
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