医院常规空气细菌培养

医院感染管理操作规范环境卫生学标本采集操作规范急诊班丽萍2014-8-15医院感染管理操作规范空气培养1，采样及检查原则，采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测；送检时间不得超过6h,样品保存于0一4℃条件时。送样时间不得超过24h。2、采样时间，选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。3、采样高度，与地面垂直高度80一150cm.4、布点方法，室内面积≤30m2，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端各距墙lm处各取一点；室内面积＞30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙lm.1.面积≤30m2，设一条对角线取三点，即中间一点，两端各距墙1米处各取一点（图1)2．室内面积30m2，设两条对角线，东，西，南，北，中取五点，其中东，西，南北距墙均1米（图2）五、结果分析I类区域：10cfu/m3II类区域：200cfu/m3III类区域：500cfu/m3六、附录Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病房（参照洁净室空气培养方法与标准）。Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房。Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房和房间。Ⅳ类区域：传染病科及病房。7、操作步骤与质量标1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。(3)剪指甲、洗手；(4）选择消毒处理后与进行医疗活动之前的期间采集空气样本；(5）室内面积＜30m2设一条对角线上取3点，即中心一点，两端各距离墙1m。取出3个培养皿，将培养皿翻转放在采样点上；室内面积＞30m2设东、西、南、北、中；或东南、西南、东北、西北、中5点，其中东南、西南、东北、西北点均距墙1m，取出5个培养皿将培养皿翻转放在采样点上。摆放相应高度的凳子或治疗车、桌，采样高度与地面垂直高度80一150cm;(6)打开平皿盖，将盖口向下扣放，计时；(7）暴露5分钟；(8)纪录采样房间面积、时间、地点、位置、采样人及采样时环境条件（如湿度、温度）(9）看表、5分钟；（10）收取平皿；（11）如室内面积＜30m2一条对角线上取3点，放平皿时先放最里边（内边），收取时先收最外边点上的平皿；物体表面采样1、采样时间，选择消毒处理后4h内进行采样。2、采样面积，被采表面＜100c㎡，取全部表面；被采表面≥100c㎡，取100c㎡。3、采样方法，用5x5cm2的标准灭菌规格板；放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。4、细菌菌落总数检查，物体表面细菌菌落总数（cfu/c㎡）=平皿上菌落的平均数x采样液稀释倍数采样面积（c㎡)5、操作步骤与质量标准面≥100cm²，取100cm²；(5)将5cm²x5cm²的灭菌规格板，放在被检平面物体表面；(6)点燃酒精灯；(7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面”的试管，打开试管塞；(8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液；(9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管；（10）用棉拭子在规格板空心处（11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子；（12）连续采样4个规格板面积；（13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞；（14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子放人装l0ml采样液的试管中；（15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等）采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样；（16）纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。6、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明确。医护人员手采样1、采样时间，在接触病人、从事医疗活动前进行采样。2、采样面积及方法，被检人五指并拢，将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30cm²)，并随之转动采样棉试子，剪去手接触部位，将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm²）计算。3、结果计算手细菌菌落总数（cfu/cm²)=平皿上菌落的平均数×采样液稀释倍数30×24、操作步骤与质量标准(1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；(2）备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、灭菌棉拭子、试管、试管架、笔、纪录单、湿度、温度计；(3)剪指甲、洗手；(4）在接触病人、从事医疗活动前进行采样；(5）取一支灭菌棉拭子，取标记“手”的试管；(6）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液；(7）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管；（8)嘱被检人五指并拢；(9)将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积30cm²)，并随之转动采样棉试子；(10）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞；(11)用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉拭子投人装l0ml采样液的试管中；(12）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管；（13)将酒精灯盖严，整理用物；(14）纪录采样时间、对象、采样人；(15)立即将标本送验、培养。5、采集标本要无菌观念强、操作熟练、标记清楚明感谢大家的分享