四川几种重要药用植物病害调查与川芎根腐病（Fusarium

四川农业大学硕士学位论文四川几种重要药用植物病害调查与川芎根腐病（Fusariumsolani）防治初探姓名：胡容平申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：龚国淑20080601四川几种重要药用植物病害调查与川芎根腐病（Fusariumsolani）防治初探作者：胡容平学位授予单位：四川农业大学相似文献(10条)1.期刊论文严吉明.叶华智.秦芸.伍光庆.YANJi-ming.YEHua-zhi.QINYun.WUGuang-qing四川药用植物病害调查与病原鉴定Ⅱ.四川药用植物病害-西南农业学报2008,21(2)对四川省的54种药用植物的病害进行田间调查和采集病害标本,通过症状观察和病原鉴定,鉴定出病害115种.基本掌握了四川药用植物的病害种类及其危害情况,为今后深入的研究和病害防治提供了重要依据.2.期刊论文陈小红.叶华智.严吉明.秦芸.伍光庆.CHENXiao-hong.YEHua-zhi.YANJi-ming.QINYun.WUGuang-qing四川药用植物病害调查与病原鉴定I.主要栽培药用植物病害-西南农业学报2006,19(1)对四川省24种主要栽培药用植物病害种类进行田间系统调查,采集病害标本,通过症状观察和病原鉴定,确诊了113种病害,其中25种为国内新记录.明确了每种药用植物的主要病害,为药用植物病害的防治和深入研究提供了重要依据.3.期刊论文陈元生.CHENYuan-sheng药用植物病害发生现状与防治对策-安徽农业科学2007,35(13)系统阐速了广东46种药用植物的病害发生现状、危害情况、发生特点,提出了病害防治原则及以农业防治和生物防治等无污染防治为主、化学防治为辅的防治对策.4.学位论文陈小红四川省主要药用植物病害种类调查及川麦冬炭疽病的研究2005本文介绍了四川省主要栽培药用植物病害种类调查与病原鉴定及川麦冬炭疽病研究的结果。　　本文对川麦冬炭疽病的病原种类进行了鉴定，研究了病原菌的生物学特性，病原菌的越冬和药剂的杀菌作用，结果表明，引致川麦冬炭疽病的病原菌有两种，即百合科刺盘孢和胶孢炭疽菌，明确了两菌菌丝生长、产孢和分生孢子萌发的条件范围和最适条件及致死温度；五种杀菌剂对川麦冬炭疽病菌菌丝生长和孢子萌发均有抑制作用，多菌灵对病菌菌丝生长的抑制作用最强，但对孢子萌发的抑制作用稍差；代森锰锌对病菌菌丝生长的抑制作用最弱，但对C.liliacearum孢子萌发的抑制作用最强；退菌特对病菌菌丝生长的抑制作用较强，对C.gloeosporioides孢子萌发的抑制作用最强；甲基托布津和百菌清对病菌菌丝生长和孢子萌发均有较强的抑制作用。5.期刊论文黄剑.张智广.黄荣茂.宋宝安贵州省重点药用植物病害调查研究-农药2002,41(10)贵州作为中国中药的主产区之一,中药资源极其丰富.本文报道了贵州省重点药用植物资源病虫害的调查研究结果,并对当前病害的防治提出了建议.6.会议论文丁万隆.程惠珍.陈君.李先恩.魏建和应用木霉制剂防治几种药用植物病害2002拮抗作用测定中,木霉菌对北沙参菌核病菌、西洋参立枯病菌及黄芪根腐病菌等药用植物病原菌有较强的拮抗作用.温室盆栽及田间防治试验结果表明,木霉制剂对这些病害的防治效果显著,可以替代常用农药.7.学位论文汪胜福龙胆草斑枯病病原菌的分离纯化及系统鉴定研究2006本实验在总结前人研究基础上，针对黑龙江省地区发生的龙胆斑枯病病原菌进行了系统的研究鉴定，为专属性地防治龙胆草药用植物的病害准确鉴定出病原物，同时也为改进化学农药防治和中药防治等措施奠定了基础，进而提高龙胆单位面积产量。此研究过程中利用传统形态学鉴定、GC-MS气质联用色谱法检测菌株全细胞脂肪酸聚类分析技术、ISSR分子生物学标记技术三大方法进系统地鉴定了来自黑龙江省北安市赵光农场、七台河北方中草药研究所、佳木斯市莲江口农场、黑龙江中医药大学药用植物园四个粗糙龙胆种植地区分离纯化得到的44个龙胆斑枯病病原菌株。首先，对上述四个产地的龙胆斑枯病叶片进行五点法采样，并对整体病害症状进行观察记录；采用病叶组织分离法结合分生孢子悬液纯化法进行分离纯化菌株，对黑龙江省北安、七台河、佳木斯、黑龙江中医药大学药用植物园四个不同地区的龙胆斑枯病病叶进行病原体分离纯化，分别得到15、9、12、8个菌株，总计44株病原菌。传统形态学鉴定在宏观方面主要观察病叶的病斑形状、病斑直径大小、病斑颜色、发斑部位、分生孢子器着生位置；微观方面主要观察分生孢子器和产孢细胞的形态、孢子形态、孢子长度大小、隔膜数。参照国内外关于龙胆斑枯病病原菌研究鉴定情况结合所分离的病原菌形态学观察初步得出结论为：所分离纯化的44个菌株，形态学无显著性差异，依据真菌分类检索表均归为同一个种属，即为半知菌亚门球壳孢目壳针孢属真菌中的小孢壳针孢即为SeptoriamicrosporaSpeg.其次，由于龙胆斑枯病病原菌属于球壳孢目真菌范畴，传统形态学在此分类鉴定研究上目前已存在很大不足，无法确定龙胆斑枯病病原菌是否存在变异。故利用GC-MS气质联用色谱法检测菌株全细胞脂肪酸聚类分析技术进一步鉴定。通过NaOH-甲醇法进行全细胞脂肪酸甲酯化处理菌株样品，GC-MS进行检测，确定谱峰，进而利用百分面积归一化法计算相对峰面积对气相色谱图中多个谱峰进行聚类分析，将所分离得到的44个菌株分为三类，结合前期传统形态学鉴定情况并根据国际微生物命名原则给予相应命名：北-11022与七-91018为一类(d=25)，此类命名为Septoriamicrospora(speg)var.wxj.；北-51022与七-31022为一类(d=7)，此类命名为Septoriamicrospora(speg)var.wsf.；其他40株为一类(d≤4)，即为Septoriamicrosporaspeg.。然后，基于重复序列，设计了20条引物AW40694-AW40713对四个产地44个菌株的DNA模板进行重复序列间区(ISSR)PCR扩增，从中筛选出6条在44个菌株中扩增共得到36条带。为此进行了CTAB法的改进，提取出较高质量的龙胆斑枯病原菌DNA模板；建立了适合龙胆斑枯病原菌的ISSR反应体系：20μl的PCR反应体系中含模板DNA1.0μl、ISSR引物2.0μl、Mg2+1.2μl、dNTP0.4μl、Taq酶0.5μl、Buffer2.0μl、H2O12.2ul。ISSR-PCR扩增程序为：94℃预变性5min,94℃变性30sec,50℃退火复性45sec,72℃延伸2min，共计40个循环，循环结束后72℃延伸6min。利用PopGen32软件分析获得遗传距离和遗传相似度，MEGA2软件构建了龙胆草斑枯病菌的遗传距离聚类图UPGMA；聚类分析结果显示，在0.26水平上将以上龙胆斑枯病原菌株分为3类：北-51022、北-41022、莲-31207、七-31022、七-71022、莲-11022、七-21207、北-31105、校-101106它们九个聚为一类；北-11022、七-91018、莲-21022、北-101001、莲-21106、七-101022、七-51001、莲-71106、莲-61207、七-41105这十个聚为一类；其他25个与标准菌株聚为一类。可见，ISSR分子遗传标记所聚类的差异个体明显多于GC-MS气质联用色谱法中聚类分出的差异个体；但气相色谱法差异个体相应分类的趋势与DNA分子遗传标记分类趋势基本一致。利用ISSR分子生物学标记技术再次对分离纯化得到的44个菌株进行鉴定分类，是进一步佐定了龙胆斑枯病病原菌的变种情况。最后，三种方法的结果综合来看，得出最终结论：北-51022与七-31022这两株、北-11022与七-91018这两株，分别各为一类，但都是在SeptoriamicrosporaSpeg.这个种下又分出两个变种或称亚种；根据国际微生物命名法则：北-11022这类命名为Septoriamicrospora(speg)var.wxj.；北-51022这类命名为Septoriamicrospora(speg)var.wsf.。8.期刊论文丁万隆.程惠珍.陈君应用木霉制剂防治几种药用植物病害的研究-中国中药杂志2003,28(1)目的:应用木霉制剂防治几种药用植物病害.方法:木霉菌对药用植物病原菌室内抑菌效果及木霉制剂温室和田间防治试验.结果:拮抗作用测定中,木霉菌对黄芪根腐病菌、北沙参菌核病菌、西洋参立枯病菌、丹参根腐病菌及款冬花菌核病菌有较强的拮抗作用.温室盆栽及田间防治试验结果表明,木霉制剂对北沙参菌核病的防治效果分别为83.6%和72.5%;对黄芪根腐病菌和西洋参立枯病菌的田间防治效果分别达到80%和60%.结论:木霉制剂防治上述病害的田间施用量以10g*m-2为宜,可以替代多菌灵等常用农药.应用木霉制剂防治药用植物病害中药材的规范化种植提供了技术保证.9.期刊论文刘莹.周如军.傅俊范.严雪瑞.郝宁.LIUYing.ZHOURu-jun.FUJun-fan.YANXue-rui.HAONing厚朴提取液对5种药用植物病原菌的抑菌活性研究-河南农业科学2009,(5)采用生长速率法和悬滴法,测试了厚朴乙酸乙酯提取液对人参锈腐病菌(Cylindrocarpondestrustans)、人参黑斑病菌(Alternariapanax)、五味子根腐病菌(Fusariumoxysporum)、穿山龙黑斑病菌(Alternariadioscoreae)和紫草白霉病菌(Ramularialithospermi)5种药用植物病害致病菌的离体抑菌活性.结果表明:厚朴提取液对以上病原菌都有一定的抑制作用,对于同一种病原菌来说,厚朴提取液对其孢子萌发的抑制效果好于对其菌丝生长的抑制效果.在相同的供试浓度下,厚朴提取液对紫草白霉病菌的菌丝生长抑制效果最好,试验中还发现,当浓度大于0.5mg/mL时,对人参黑斑病菌的孢子萌发抑制效果最好.10.学位论文王帅药用植物源杀菌剂筛选及其抑菌效果研究2006本论文针对近年来严重影响辽东山区中草药生产的几种药用植物病害和一些重要的经济作物病害，对辽宁地区特产的药用植物提取液的抑菌活性进行了筛选，并对初步筛选抑菌效果较好的丁香(Eugeniacaryophyllata)和五味子(Schisandrachinesensis)的抑菌效果进行了深入研究。结果如下：1.选用已报道有一定抑菌作用，且在辽宁地区来源十分广泛的31种药用植物，以草莓灰霉病菌(Botrytiscinerea)、穿山龙黑斑病菌(Alternariadioscoreae)、五味子根腐病菌(Fusariumsp.)为供试菌种，采用生长速率法、孢子萌发法进行抑菌试验，从中筛选出具有杀菌和抑菌活性的药用植物。药用植物样品的提取采用三次浸渍提取法，从筛选的结果发现，丁香(Eugeniacaryophyllata)和五味子(Schisandrachinesensis)的抑菌效果较好，菌丝生长抑制率大于60.8％，孢子萌发抑制率达到64.2％以上，且比较稳定。2.初步筛选出两种药用植物材料丁香(Eugeniacaryophyllata)和五味子(Schisandrachinesensis)，对其进行常见经济作物及药用植物真菌病害的抗菌谱测定，采用牛津杯抑菌圈法，结果表明两种供试材料均能产生明显且直径较大的抑菌圈，具有很好的抑菌功效。3.选择7种溶剂丙酮、乙醇、95％甲醇、四氯化碳、正己烷、乙醚、水对两种药用植物材料丁香(Eugeniacaryophyllata)和五味子(Schisandrachinesensis)进行震荡提取，确定能够获得最多的抑菌活性物质成分的有机溶剂，可以达到更高的抑菌效果，结果表明，95％乙醇提取液的抑菌效果最好。4.对丁香(Eugeniacaryophyllata)和五味子(Schisandrachinesensis)提取液的作用机理进行了初步研究，试验结果表明，丁香(Eugeniacaryophyllata)和五味子(Schisandrach