第十一章厌氧菌鉴定

《微生物学检验》国家卫生和计划生育委员会规划教材微生物学检验《微生物学检验》国家卫生和计划生育委员会规划教材第十一章厌氧菌鉴定技术返回总目录本章内容第一节梭状芽胞杆菌属1第二节革兰阴性无芽胞厌氧杆菌2第三节革兰阳性无芽胞厌氧杆菌和放线菌属3第四节厌氧球菌4学习目标及重点学习目标：•掌握运送厌氧菌感染标本的常用方法，厌氧芽胞梭菌主要种类、生物学特性及鉴定要点•熟悉厌氧芽孢梭菌的临床意义•了解无芽胞厌氧菌的生物学特性及临床意义本章重点：★厌氧芽胞梭菌的生物学特性★厌氧芽胞梭菌的鉴定要点第一节梭状芽胞杆菌属一、破伤风芽胞梭菌（一）生物学特性1.形态与染色菌体细长杆状，有周鞭毛，无荚膜。芽胞呈鼓槌状，为本菌的典型特征破伤风芽胞梭菌形态特征芽胞芽胞鞭毛第一节梭状芽胞杆菌属2.培养特性专性厌氧，在血平板上可呈薄膜状生长，菌落半透明、灰白色、边缘疏松似羽毛状，伴β溶血。在庖肉培养基中，肉渣变黑，有腐败性恶臭3.生化反应大多生化反应阴性第一节梭状芽胞杆菌属第一节梭状芽胞杆菌属4.抵抗力芽胞抵抗力很强，在土壤中可存活数十年，能耐干热150℃1h，煮沸100℃1h方可杀灭。繁殖体对青霉素敏感第一节梭状芽胞杆菌属（二）微生物学检验根据破伤风病人典型的临床表现即可诊断，特殊需要时才进行细菌学检查。1．标本从可疑的感染伤口采取浓汁、组织液或坏死组织块等2．鉴定（1）直接涂片（2）厌氧培养（3）毒力试验第一节梭状芽胞杆菌属（三）临床意义感染途径：创伤感染条件：厌氧微环境致病物质：破伤风痉挛毒素和破伤风溶血毒素典型症状：苦笑面容、角弓反张第一节梭状芽胞杆菌属第一节梭状芽胞杆菌属二、产气荚膜梭菌（一）生物学特性1.形态与染色革兰阳性粗大杆菌，无鞭毛，在机体内可形成明显的荚膜。卵圆形芽胞，直径小于菌体宽度，位于中央或近极端第一节梭状芽胞杆菌属2.培养特性生长迅速，代谢活跃，45℃生长最好血琼脂平板：双层溶血环蛋黄琼脂平板：Nagler反应牛奶培养基：“汹涌发酵”产气荚膜梭菌在卵黄琼脂平板生长产气荚膜梭菌双层溶血环产气荚膜梭菌汹涌发酵第一节梭状芽胞杆菌属Nagler反应第一节梭状芽胞杆菌属3.生化反应发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇，产酸产气。明胶液化试验阳性，H2S产生试验阳性，吲哚试验阴性，卵磷脂酶阳性在乳糖蛋黄牛奶血琼脂上分解乳糖，有双层溶血环第一节梭状芽胞杆菌属（二）微生物学检验1．标本采集标本时严格避免正常厌氧菌群的污染和接触氧气2．鉴定（1）直接涂片（2）厌氧培养第一节梭状芽胞杆菌属（三）临床意义感染途径：创伤和消化道感染条件：厌氧微环境致病物质：外毒素、多种侵袭性酶和荚膜所致疾病：气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎第一节梭状芽胞杆菌属防治原则：及时处理伤口扩创、清创早期可用多价抗毒素血清抗生素使用第一节梭状芽胞杆菌属三、肉毒芽胞梭菌（一）生物学特性1.形态与染色专性厌氧、椭圆形芽胞，位于次极端，大于菌体宽度，使细胞呈汤匙状或网球拍状第一节梭状芽胞杆菌属2.培养特性严格厌氧，营养要求不高，在卵黄琼脂平板上，菌落周围出现浑浊圈。能消化肉渣，使之变黑，有腐败恶臭气味肉毒芽胞梭菌在疱肉培养基上的生长现象（右侧为对照）第一节梭状芽胞杆菌属3.生化反应生化特性随毒素型不同而有所差异4．抵抗力肉毒梭菌芽胞的抵抗力很强，能耐热100℃1h以上，干热180℃2h高压蒸汽灭菌30min芽胞可被杀死。肉毒毒素不耐热，经56℃30min可灭活第一节梭状芽胞杆菌属（二）微生物学检验1．标本及时采取可疑食品、早期患者的呕吐物、胃液、粪便及血清等，从患者血清中检出毒素是最直接最有效的方法。2．鉴定（1）直接涂片（2）厌氧培养第一节梭状芽胞杆菌属（三）临床意义感染途径：创伤和消化道感染条件：厌氧微环境致病物质：肉毒毒素所致疾病：食物中毒、创伤感染中毒第一节梭状芽胞杆菌属防治原则：加强食品管理和监督食品进食前加热煮沸治疗应尽早注射多价抗毒素第一节梭状芽胞杆菌属四、艰难梭菌（一）生物学特性革兰阳性粗大杆菌、有些菌株有周身鞭毛、卵圆形芽胞，位于菌体次极端，无荚膜、严格厌氧，营养要求较高，不易培养第一节梭状芽胞杆菌属（二）微生物学检验1．标本采集新鲜粪便标本2．鉴定（1）直接涂片（2）厌氧培养（3）毒性检测（三）临床意义假膜性肠炎返回章内容第一节梭状芽胞杆菌属一、脆弱类杆菌脆弱类杆菌占临床厌氧菌分离株的25%，占类杆菌分离株的50%，居临床厌氧菌分离株的首位。脆弱类杆菌在一定条件下可引起人体内源性感染，如脑脓肿、腹膜炎、阑尾炎、女性生殖系统及盆腔感染第二节革兰阴性无芽胞厌氧杆菌脆弱拟杆菌的两极浓染及菌体的多形性二、产黑色素普雷沃菌临床上较常见的条件致病菌，可引起内源性感染，常与其他厌氧菌、需氧菌或兼性厌氧菌引起混合感染。临床上是引起口腔与牙周感染、肺部感染及女性生殖系统感染常见菌之一产黑色素普雷沃菌培养特性第二节革兰阴性无芽胞厌氧杆菌三、不解糖紫单胞菌不解糖紫单胞菌主要分布于人类口腔、泌尿生殖道和肠道，在正常人体的检出率较低。主要引起人类牙周炎、牙髓炎、根尖周炎，也可引起胸膜炎、阑尾炎和细菌性阴道炎，尚可引起头、颈部和下呼吸道感染返回章内容第二节革兰阴性无芽胞厌氧杆菌第三节革兰阳性无芽胞厌氧杆菌和放线菌属一、生物学特性本群共同特点为革兰阳性，菌体与类棒状杆菌相似，两端可粗大，排列不规则，多呈“X”、“Y”、“人”、“川”等形状，大小不一、长短不等，有的出现分枝或分叉状，多形性明显。pH6．5～7．8生长良好，但乳杆菌属最适pH5．5左右、甚至pH3亦能生长。各菌生化反应不一，多数能发酵葡萄糖，触酶试验阴性，吲哚试验阴性菌属主要特征（G＋C）%丙酸杆菌属主要代谢产物丙酸53～67乳杆菌属唯一的代谢产物乳酸32～53双岐杆菌属代谢产物乙酸＞乳酸55～67真杆菌属主要代谢产物乙酸、丁酸、甲酸30～40放线菌属代谢产物琥珀酸、乳酸、少量乙酸和甲酸57～69二、微生物学检验确定为厌氧菌后，在排除芽胞存在的前提下，进行属间推断性鉴别返回章内容第三节革兰阳性无芽胞厌氧杆菌和放线菌属厌氧球菌是临床厌氧感染的重要病原菌，约占临床厌氧菌分离株的25%，其中主要包括革兰阳性的消化球菌、消化链球菌和革兰阴性的韦荣球菌一、消化球菌属本菌是人体正常菌群之一，常与其他细菌引起混合感染，包括腹腔感染，肝脓肿，外阴、阴道及盆腔感染，肺部和胸膜感染，口腔感染，颅内感染以及皮肤和软组织感染等第四节厌氧球菌二、消化链球菌属临床厌氧菌分离株中占比例较高，仅次于脆弱类杆菌，居第2位三、韦荣球菌属韦荣球菌是口腔、咽部、胃肠道和女性生殖道的正常菌群，为条件致病菌，引起人体内源性感染，感染多为混合感染返回章内容第四节厌氧球菌