本科 第03章 消毒与灭菌

第3章消毒灭菌教学要求1、掌握消毒、灭菌、防腐和无菌的基本概念。高压蒸气灭菌的机理、应用范围及注意点。紫外线杀菌法、滤过除菌法机理、应用范围及注意点。2、理解其它热力灭菌的种类、原理及应用范围。3、了解常用化学消毒剂的的种类、杀菌机理及应用。影响消毒灭菌效果的因素。消毒灭菌常用术语灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的方法。消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。消毒剂。防腐（antisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖的方法。清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。无菌（asepsis）和无菌操作：无菌是无活菌，灭菌的结果。防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。第一节物理消毒灭菌法一、热力灭菌法最常用（一）原理高温对细菌有明显的致死作用：①蛋白质的变性；②核酸的断裂（二）干热灭菌法1.焚烧：最彻底，适用于病理性废弃物品或动物尸体第一节物理消毒灭菌法一、热力灭菌法（二）干热灭菌法2.烧灼：火焰灭菌，适用接种环、试管口3.干烤：干烤箱，160-170℃，2h，适用于高温下不损坏，不变质、不蒸发的物品。玻璃、瓷器4.红外线：电磁波、在表面好。红外线烤箱所需温度和时间同干烤箱。适用于医疗器械灭菌红外线烤箱第一节物理消毒灭菌法一、热力灭菌法（三）湿热灭菌法最常用在同一温度下比干热效力大（1）湿热条件下菌体蛋白较易凝固变性（2）湿热的穿透力比干热大（3）湿热的蒸汽有潜热存在。第一节物理消毒灭菌法一、热力灭菌法（三）湿热灭菌法1.巴氏消毒法：61.1-62.8℃，30min；71.7℃，15-30s。牛乳、酒类等液体低温杀灭病菌。2.煮沸法：100℃5min（繁殖体）2h（芽孢）。食具、刀剪、注射器。加NaHCO3提沸点到105℃3.流动蒸汽消毒法：蒸汽100℃15-30min（繁殖体），类似蒸笼。第一节物理消毒灭菌法一、热力灭菌法（三）湿热灭菌法4.间歇蒸汽灭菌法：反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌。不耐高热的含糖，牛奶等的培养基。5.高压蒸汽灭菌法（1）最常用，最好（2）103.4kPa，121.3℃，15-20min，杀所有微生物（3）常用于耐高温、耐湿物品的灭菌，如一般培养基、生理盐水、手术敷料等。第一节物理消毒灭菌法二、辐射杀菌法1.紫外线杀菌（1）波长：240-300nm的紫外线有杀菌作用，其中以265-266nm最强（2）杀菌机制：作用于DNA，形成胸腺嘧啶二聚体，干扰DNA的复制与转录。（3）杀菌作用特点①穿透力弱，用于空气及物品表面的消毒②只杀繁殖体，不能杀芽孢③对人皮肤、眼睛有损伤，注意防护。（4）适用范围：手术室、传染病房、无菌实验室的空气消毒，或不耐热物品的表面消毒第一节物理消毒灭菌法二、辐射杀菌法2.电离辐射（β射线、γ射线）用途：干扰DNA合成，大量的一次性医用塑料制品的消毒食品、药品、生物制品，不破坏营养。3.微波用途：产生热效应。非金属器械、食品、食具、检验室用品、药杯等。第一节物理消毒灭菌法三、滤过除菌法1.用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，达到无菌的目的。2.细菌不能过孔径，可除去，不能除去病毒。3.用于不耐高温的血清、毒素、抗生素除菌4.液体除菌用滤菌器，空气除菌用生物洁净技术。滤菌器和层流室（生物洁净室）第一节物理消毒灭菌法四、干燥与低温抑菌法1.干燥：可使细菌内的水分逸出，使细菌生命活动停止。保存食物。2.低温：可使细菌的新陈代谢减慢，影响细菌的生长。保存菌种。3.冷冻真空干燥法：保存菌种的最好方法保存微生物数年-数十年。第二节化学消毒灭菌法一、原理1.促进菌体蛋白质变性或凝固2.干扰细菌的酶系统和代谢3.损伤细菌细胞膜第二节化学消毒灭菌法二、种类（一）高效消毒剂：杀死芽孢1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂；3.醛类消毒剂；4.环氧乙烷（二）中效消毒剂1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂（三）低效消毒剂1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾第三节消毒灭菌的运用一、医疗器械物品的消毒灭菌（一）高危器械物品需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。（二）中危器械物品不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。（三）低危器械物品只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。（四）快速周转的医疗器械牙钻、牙科手术器械等用瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂第三节消毒灭菌的运用二、室内空气消毒灭菌1.物理消毒法：①紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用；②滤过除菌：空气通过孔径小于0.2μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。2．化学消毒法：包括化学消毒剂喷雾和熏蒸：①过氧乙酸喷雾、熏蒸；②过氧化氢喷雾；③二氧化氯溶液喷洒；④中草药点燃烟熏。三、手和皮肤的消毒手上有暂住菌和常驻菌用肥皂和流动水经常并正确洗手病原微生物污染时应用消毒剂消毒。第三节消毒灭菌的运用（四）黏膜的消毒口腔-过氧化氢（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌粪、尿、痰、脓液--次氯酸钠、漂白粉（六）病人污染物品的消毒（七）饮水的消毒自来水--氯气，少量饮用水—漂白粉（八）环境的消毒病人住过的房间、地面--过氧乙酸、含氯消毒液厕所、阴沟—生石灰（有效成分是氢氧化钠）第四节影响消毒灭菌效果的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三、微生物的数量四、消毒剂性质、浓度与作用时间五、温度六、酸碱度七、有机物第五节病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类根据传染性和危害分四类：其中一类和二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。二、病原微生物实验室的分级根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平（BSL）及实验室生物安全国家标准，实验室分一、二、三、四级。三、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动。1.杀灭芽胞最常用和最有效的方法是：____________。a.紫外线照射b.煮沸5minc.巴氏消毒法d.流通蒸气灭菌法e.高压蒸气灭菌法2.灭菌方法错误的是____________。a.手术室空气-紫外线b.排泄物-漂白粉c.饮水-氯气d.含血清培养基-高压蒸气灭菌e.温度计-75%酒精3.下述不可能杀灭细菌芽胞的方法是：____________。a.煮沸法b.巴氏消毒法c.间歇灭菌法d.干热灭菌法e.高压蒸气灭菌法4.关于紫外线，说法错误的是____________。a.其杀菌作用与波长有关b.可损坏细菌的DNA构型c.265-266nm杀菌作用最强d.其穿透力弱，故对人体无损害e.紫外线适用空气和物体表面的消毒5.常用于空气或物体表面的消毒____________。a.高压蒸气灭菌法b.紫外线照射法c.滤过除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法6.常用于基础培养基灭菌____________。a.高压蒸气灭菌法b.紫外线照射法c.滤过除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法7.常用于手术器械的灭菌____________。a.高压蒸气灭菌法b.紫外线照射法c.滤过除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法8.常用于血清的除菌____________。a.高压蒸气灭菌法b.滤过除菌法c.紫外线照射法d.巴氏消毒法e.干烤法9.将牛奶加热62℃30分钟的目的是____________。a.使牛奶中的蛋白质变性，易于吸收b.杀灭牛奶中的所有微生物c.杀死牛奶中的病原菌d.使牛奶不含活菌e.防止或抑制微生物在牛奶中生长和繁殖10.乙醇消毒剂常用的浓度是：____________。a.100％b.95％c.75％d.50％e.30％