第三章 药剂卫生

第三章药剂卫生药剂教研室王利胜[e-mail]【目的要求】掌握物理灭菌法的特点、基本原理、方法和应用和常用防腐剂的正确用法和主要防腐剂的正确用法；2.熟悉药剂卫生的意义和基本要求，预防药剂污染和主要环节；3.了解制药环境卫生的要求和管理。第一节概述一、药剂卫生的概念（一）含义：药剂卫生主要论述药剂微生物方面的要求及达到要求所采取的措施和方法。（二）重要性1.药剂微生物污染将导致：药剂变质腐败疗效丧失降低产生有害物质引起机体感染、发热、中毒、致癌（二）重要性2.药剂卫生的意义:是实行GMP制度的基本保证；保证产品质量；作为药剂生产和质量控制的依据之一。（二）重要性3.研究药剂卫生的主要内容:研究药剂中如何杀菌、除菌的措施；如何防止细菌污染的措施；如何抑制细菌生长繁殖（防腐）的措施。二、药剂卫生的基本要求•致病菌：大肠杆菌：口服、动物、脏器药品不得检出；沙门氏菌：动物、脏器药品不得检出；绿脓杆菌：外用药品不得检出；金黄色葡萄球菌：外用药品不得检出破伤风杆菌：溃疡面、破创面不得检出二、药剂卫生的基本要求2、活螨：口服、创伤、粘膜、腔道药品不得检出；3、细菌总数与霉菌总数：不同剂型不同要求：细菌与霉菌总数限定制剂细菌总数个／g霉菌总数个/g提取的固体制剂、1000100西药1000100阴道、创伤、溃疡1000100含药材粉的片剂1万500含药材粉的丸剂、完整表皮、粘膜制剂含药材粉的散剂10万500液体制剂100及酵母菌100液体眼药100不得检出三、预防药剂污染的主要环节•药物原料•辅料材料•制药器械•环境条件•操作人员•包装材料四、制药环境的净化（一）中药制药环境的基本要求（二）空气洁净技术与应用（三）洁净室的卫生与管理（一）中药制药环境的基本要求1.环境2.布局3.设施4.水源（二）空气洁净技术与应用空气洁净技术是指创造洁净空气环境，以保证产品纯度，提高成品率的一门新技术。目的：控制生产场所中空气尘粒、细菌污染、适当温湿度以防止对产品质量的影响。常用的空气洁净技术1.非层流空调系统特点：紊流；仍有尘埃粒子；2.层流洁净空气技术特点：层流是粒子流体连续稳定的运动形式，似微孔滤膜过滤；无尘埃粒子、可达无菌要求。(1)水平层流洁净室（如无菌室）（2）层流净化工作台非层流空调净化线层流空调净化线（三）洁净室的卫生与管理1、我国GMP把洁净度分为四级：30万级；10万级；1万级；100级2、药厂不同区域洁净要求：控制区：10万级标准洁净区：1万级标准、100级标准第二节灭菌方法与无菌操作基本概念：•灭菌法：杀死或除去所有微生物的繁殖体和芽孢的技术方法。•灭菌：用物理或化学方法将所有致病菌和非致病菌的微生物、细菌的芽孢全部杀死的操作。3.消毒：用物理或化学方法将病原微生物杀死。•防腐（抑菌）：用低温或化学方法防止和抑制微生物的生长繁殖。5.灭菌原则：(1)以完全杀死芽胞为标准(2)要与药物性质相结合，保证药剂中药物的稳定性。一、F与F0值在灭菌中的意义与应用F与F0值:是验证灭菌可靠性(效果)的法定参数。（一）D值（二）Z值（三）F值与F0值（一）D值微生物死亡速度:为一级动力学过程：微生物残留数与时间的关系D值:D值在一定温度条件下杀死被灭菌物品中微生物数90%所需的时间.D值也可看作被灭菌药品中降低微生物一个数量级或一个对数值所需的时间。（二）Z值:降低一个lgD值所需温度数。单位：℃（t）（三）F值与F0值1.F值:在一定温度(T)下，杀死容器中全部微生物所需时间（min）T:每个Δt测得被灭菌物品的温度相当于D值与微生物数降低值的乘积：2.F0值F0值为一定灭菌温度（T）、Z值为10℃产生的灭菌效果与121℃Z值10℃产生的灭菌效力相同时所相当的时间。举例含有200个嗜热脂肪芽孢杆菌的5％葡萄糖水溶液蒸汽灭菌：温度℃D值（min)10587.81212.43.F0与F值比较F0值是F值的特定值。F0值是监测、验证灭菌效果；作为灭菌过程的技术参数.灭菌法分类：物理灭菌法：干热灭菌湿热灭菌紫外线灭菌辐射灭菌微波灭菌高速热风灭菌滤过除菌法：微孔薄膜滤器垂熔玻璃滤器化学灭菌法：化学气体浸泡无菌操作法：无菌操作室无菌操作二、物理灭菌法（一）干热灭菌法利用高温（火焰、干热空气）灭菌。特点：高温使细菌原生质凝固、细菌的酶系统破坏。火焰灭菌法物品迅速通过火焰3-4次加热20秒以上.2.干热空气灭菌法（1）设备:电热烘箱、高温烘房；真空干燥灭菌箱；（2）灭菌条件:180℃，1h以上；160－170℃，2－4h以上；140℃，≥3h杀热原：250℃，30min；200℃，≥45min2.干热空气灭菌法（3）适用范围:耐高温玻璃制品、瓷制品金属制品油脂类（软膏基质、油）湿热灭菌无效的非水性物质（甘油等）耐高温的粉末化学药品（4）缺点：要求温度高、时间长温度不易均匀（二）湿热灭菌法系指利用饱和水蒸气或沸水来杀灭微生物的方法。原理：热力破坏蛋白质和核酸中的氢键，导致核酸破坏，蛋白质变性或凝固，酶失去活性，微生物因而死亡。（二）湿热灭菌法特点：(1)蒸气比热大，穿透力强，所以灭菌效力高于干热灭菌法。(2)灭菌效果可靠,简便、经济、易控制(3)制剂生产中广泛可靠的灭菌方法。（二）湿热灭菌法适用范围对热敏感的药物不适用;其他药物均可选用。方法种类热压灭菌法流通蒸气灭菌煮沸灭菌低温间隙灭菌1.热压灭菌法在热压灭菌器内，利用大于常压的高压水蒸气灭菌的方法。特点灭菌作用强、最可靠;应用耐热药物及水溶液、外科敷料、手术器械及用具等物品灭菌。•灭菌条件:大于常压的水蒸气：压力：饱和蒸气压（表压：0.7kg/cm2）；温度：115℃；时间：30min；能杀灭所有细菌（增殖体）和芽孢。•湿热灭菌一般要求：F0=8－12•热压灭菌温度、压力与时间的关系组成：排气口、安全阀，压力表、温度计、密封圈盖、夹层等部件。灭菌器种类：手提式热压灭菌器卧式热压灭菌柜真空卧式热压灭菌柜（立式）2.流通蒸气和煮沸灭菌法流通蒸气灭菌无压力、不密闭容器,100℃蒸气灭菌;适用于一些注射剂生产，尤其是1-2ml注射剂及不耐高热的品种。煮沸灭菌•药物密闭容器放在水中煮沸30或60min。此法不能保证杀灭芽孢，因此制备过程要避免污染。3.低温间歇灭菌法将被灭菌药物用60-80℃加热1h先杀死细菌繁殖体后，室温放置24h，让芽孢发育成繁殖体，再第二次加热将其消灭，连续三次。特点适用于必须热压灭菌，但又不耐高温的制剂或药品。时间长、功效低，消灭芽孢效果差；本法灭菌的药品除本身具有抑菌作用，还须添加适量抑菌剂增强灭菌效果。4.影响湿热灭菌的因素微生物的种类和数量被灭菌药物的性质灭菌温度与时间蒸气的性质（三）紫外线灭菌法1、作用机理①主要作用细菌核酸及蛋白使其变性。②空气紫外线照射，产生臭氧发挥共同杀菌作用。（三）紫外线灭菌法2、特点①灭菌紫外线波长是220-290nm，最强是254nm②直线传播，其强度与距离的平方成比例地减弱③广泛应用于空气和表面灭菌；④玻璃容器中药物不用此法灭菌；⑤人体照射过久能产生结膜炎和皮肤烧灼现象（三）紫外线灭菌法3、使用方法•一般6-15m3、装30w紫外灯一只；灯距地面2.5-3m，温度10-55℃，湿度45﹪-60﹪。应在操作前照射1-2h,操作时关闭。•保持灯管清洁•注意有效使用期限（四）微波灭菌微波指频率在300MHz-300kMHz之间的电磁波。是利用高频电场使物质分子内部极化迅速升温的灭菌方法。灭菌原理：微波可穿透物质深部、水可强烈地吸收微波，使极性分子转动，由于分子间的摩擦而产生热能而呈现灭菌作用。（四）微波灭菌特点（1）穿透到物质深部，热是在被加热的物质内部产生的，所以加热均匀、升温迅速；（3）对较多中药化学成分均较为稳定；（4）对热压蒸气不稳定药物稳定（5）广泛应用于各类固液剂型、饮片、挥发油、药材的灭菌。（四）微波灭菌彻底杀灭各种细菌的微波灭菌条件：菌体微波频率功率温度时间大肠杆菌3.5KW110℃15s金葡球菌2450MHZ枯草杆菌芽孢140℃20s（五）辐射灭菌法系指应用β射线，γ射线的杀菌的方法。β射线:电子束灭菌法,适用薄、密度低的物料；60Co-γ射线辐射灭菌法：适用厚物料（五）辐射灭菌法1.特点：（1）被灭菌物不明显升高温度，适用于热敏性药物的灭菌；（2）γ射线穿透力强,特别适用于已包装密封的药品消毒灭菌可防二次污染；（3）杀菌作用可靠，广泛适用于固、液、半固体物料。（4）有可能使药效活性降低，使用中注意安全保护。（五）辐射灭菌法2.注意：（1）中药一般照射剂量：15万-100万伦琴；（2）合理选择照射剂量灭菌效果与样品染菌程度、微生物种类、药物性质有关。（3）价格较贵三、滤过除菌法1.概念：系指药液通过无菌滤器，除去活的和死的微生物而得到无菌滤液的方法。2.特点：（1）适用于很不耐热的药物溶液的除菌。（2）必须无菌操作（滤球、容器、药液、环境无菌等过程）。三、滤过除菌法3.常用除菌滤器•微孔薄膜滤器滤材:高分子薄膜滤器:夾滤材的滤器.微孔薄膜种类与规格:除菌用0.22μm孔经三、滤过除菌法•垂熔玻璃滤器垂熔玻璃滤球:规格：G1-G6号，用G6号滤过除菌（孔经2μm）；垂熔玻璃滤棒：规格：粗、中、细三号；仅用于灭菌制剂粗滤。垂熔玻璃漏斗：G1-G6号使用操作：四、化学灭菌法指用化学药品来杀灭微生物的方法。1.气体灭菌法环氧乙烷，易穿透塑料、纸板；甲醛蒸气熏蒸：室内2.浸泡与表面消毒法化学药品为杀菌剂,配成有效浓度喷雾、浸泡、涂抹。3.化学消毒剂种类及用途(1)表面活性剂0.1-0.2%新洁尔灭溶液；器械、洗手、皮肤消毒；(2)酚类2%苯酚、煤酚皂液(增溶)地面、环境消毒；(3)醇类75%酒精，作用弱表面、浸泡消毒；3.化学消毒剂种类及用途(4)氧化剂0.2-0.5%过氧醋酸、0.1%高锰酸钾器皿、塑料、玻璃消毒；(5)其他环境消毒用:漂白粉、石灰等，五、无菌操作法指药剂生产的整个过程均控制在无条件下进行的一种操作方法。目的防止药品在操作过程中污染.(一)无菌操作室的灭菌1.气体灭菌，工作前开启紫外灯2.采用空气层流洁净空气净化;3.室内空间、用具、地面、墙壁消毒剂擦拭。（二）无菌操作无菌操作室外布局：准备室—浴室—更衣室—缓冲间—传送柜—无菌室1.人员要求：洗澡—灭菌工作服、鞋帽—进无菌室；2.用具要求:干热灭菌或热压灭菌；（三）无菌检查法目的:无菌制剂需经无菌检验，以证实是否有活微生物存在。1.无菌检查法试管接种法薄膜过滤法检验合格方可应用2.中成药的微生物学及活螨检查•细菌种数•霉菌种数•大肠杆菌•沙门氏、痢疾杆菌•绿脓杆菌•金黄色葡萄球菌•厌氧菌（破伤风杆菌）•活螨第三节防腐与防虫一、防腐与防虫的措施防止微生物的污染防止仓库害虫的危害二、常用防腐剂防腐剂1.含义：系指能抑制微生物生长繁殖的物质。2.防腐剂的要求•用量小、无毒无刺激；•药液中溶解度能达到抑菌的有效浓度；•性质稳定，贮存时防腐效力不变，不与药物成分起反应；•无特殊气味；•能对一切微生物有防腐力(霉菌、酵母菌、G+、G－等）3.常用防腐剂及使用方法(1)苯甲酸类苯甲酸苯甲酸钠抑菌力：抑霉好；细菌、酵母菌弱应用范围：内服、外用、食品防腐机制：靠未解离分子抑菌pH影响：最佳抑菌pH4以下抑菌浓度：0.1％-0.25%;pH5：0.5％水中溶解度：较差，~钠较好注意：不用于眼用制剂及注射剂(2)尼泊金类（甲酯、乙酯、丙酯、丁酯）抑菌力：抑霉、酵母菌强、细菌弱应用范围：内服、食品；糖浆剂好防腐机制：靠未解离分子pH影响：pH4－7酸性中性碱性抑菌浓度：0.01％-0.25%可合并配用水中溶解度：较差注意：与非离子表面活性剂(如吐温)络合防腐力下降；用法：先溶于少量醇,再搅拌缓慢加入水中(3)山梨酸类（山梨酸、山梨酸钾）抑菌力：抑霉菌、细菌强应用范围：内服液体制剂、食品防腐机制：未解离分