临床微生物检验考试重点总结

第一章微生物感染与宿主免疫1.显性感染：如果宿主的抗感染免疫力较弱，或侵入的病原体数量较多、毒力较强，机体的组织细胞受到不同程度的损害并出现一系列的临床症状和体征，则称为显性感染。2.病原菌的毒力包括侵袭力和毒素。病原菌在宿主间传播、侵袭、定植并逃逸免疫的能力，称为侵袭力。3.侵袭力【黏附：可由黏附素介导，革兰阴性菌为菌毛，革兰阳性菌为磷壁酸。宿主黏膜上皮细胞表面的黏附素受体一般是糖蛋白或糖脂。】第二章细菌的大小与形态1.细菌的大小以微米（um）为测量单位。2.鞭毛功能动力，鞭毛是细菌的运动器官，呈现旋转运动是由基础小体的同心环旋转产生，推动力来自于质子动能，即质子浓度梯度流动所释放的ATP。鞭毛旋转方向决定运动类型。3.观察细菌动力可用悬滴法或压滴法在显微镜下直接观察其运动，也可将细菌穿刺接种半固体培养基观察动力。4.选择培养基：在培养基中加入某些特殊化学物质，抑制某些细菌生长而有助于需要的细菌种类生长，使需要菌从混杂的微生物群体中分离出来。第三章细菌的遗传与变异1.细菌的遗传物质包括染色体、质粒。2.质粒：是细菌染色体外的DNA，携带有编码某些遗传特性的基因，它能独立于染色体进行自我复制。3.质粒功能：质粒编码多种蛋白质，赋予宿主菌多种生物功能，如毒力因子、致育性、耐药性、解降酶、限制酶和修饰酶。4.质粒的特性：a.不相容性【是指相似的质粒在同一细胞中不能共存】b.可转移性【质粒的转移方式随不同质粒而不同，最重要的一种方式是有质粒编码的接合系统】c.自主复制质粒【利用宿主系统独立于染色体进行复制】d.质粒可自然丢失或用人工方法消除。5.培养特性变异新从患者体内分离的沙门菌通常为光滑型，经人工培养后菌落呈粗糙型，这种变异称S-R变异。S-R变异常伴有抗原、毒力和某些生化特性的改变。第四章病毒的基本性状1.病毒的结构可分为基本结构和辅助结构。病毒的基本结构包括核心、衣壳。辅助结构是包膜（是包围在病毒核衣壳外面的双层膜结构），包膜对乙醚是敏感的，若呈阳性，则说明有乙醚存在。第五章真菌的基本性状1．营养体呈单细胞类型的真菌又称酵母菌。营养体呈多细胞类型的真菌是由菌丝和孢子交织组成，称为丝状菌或霉菌。第六章微生物的分类和命名1.细菌的科学名称的生物双名式，有一个属名和一个种名构成，属名在前，是名词，首字母大写；种名在后，是形容词。第七章感染病病原学诊断与预防1.病原学检测（标本采集的原则）：⑴尽早采集：一旦怀疑细菌感染，应及时采集标本进行细菌学检验。⑵选择不同采集时机和标本种类：根据临床症状和流行病学资料可预测感染性疾病的病原体，根据病程和感染部位的不同，选择合适时机采集不同种类标本。⑶在抗生素应用前采集：应尽可能在抗生素留取前标本。⑷遵守无菌操作：应严格注意无菌操作，不得被其他部位细菌污染。盛放标本的容器应无菌。⑸正确保存和运送：采集的标本及时运送，如路途遥远，一般应冷藏（但对脑膜炎和淋病奈瑟菌，需保温35~37℃）。2.革兰染色的影响因素：①涂片厚薄②酒精脱色时间③染液贮存时间④细菌生长时期3.氧化-发酵实验（O-F实验）细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧降解的，称为发酵型，此类细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖，通常为兼性厌氧菌。利用此实验可区分细菌的代谢类型。4．β-半乳糖苷酶实验（ONPG实验）只有β-版乳糖苷酶而缺乏半乳糖苷渗透酶（或是其活性很弱)的细菌，不能很快将乳糖运送到菌细胞内，通常需要几天时间乳糖才被分解，称迟缓分解乳糖。5．氧化酶试验：氧化酶或称细胞色素氧化酶，是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。做氧化酶实验时，此酶首先使用细胞色素C氧化，然后氧化型细胞色素C在使对苯二胺氧化，产生颜色反应。本试验肠杆菌科阴性，弧菌科、非发酵菌阳性（除个别菌种外）、奈瑟菌属均阳性。用途:G-杆菌的鉴别。6.荚膜肿胀试验原理：有荚膜的细菌如肺炎链球菌等，当与相应的抗血清反应时荚膜将明显增宽，在显微镜下可见在蓝色细菌周围有边界清晰的环状物，厚薄不等，而对照侧无，则为荚膜肿胀试验阳性。用途：常用于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等的检测。7.二倍体细胞培养：广泛用于病毒分离和疫苗制备。第八章抗微生物化学疗法1．纸片扩散法（K-B法）：培养基：pH为7.2~7.4，琼脂厚度为4mm。对营养要求较高的细菌如链球菌、肠球菌属、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌等需加入相应的营养添加剂。细菌接种：用0.5麦氏管校正菌液浓度（1.5×108CFU/ml），在琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转平板60°以保证接种菌的均匀分布，各纸片中心相距24mm，纸片距平板內缘15m，苛养菌应孵育在含CO2的环境中，肠球菌检测对苯咗西林和万古霉素的耐药性须孵育24h。2.最低抑菌浓度（MIC）：稀释法所测得的某抗菌药物能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度称为最低抑菌浓度。用途：是体外药敏试验衡量细菌对抗菌药物的敏感指标。3.K-B法影响因素：1.培养基：培养基的质量如pH、硬度、湿度、深度。2.药敏纸片：药敏纸片的含药量、药敏纸片的保存和厚薄。3.接种菌量4.试验操作质量：孵育条件和温度、时间，抑菌圈测量工具等。4.E-试验：是一种结合稀释法和扩散法的原理和特点测定微生物对抗菌药物的敏感度的定量技术，E试条是一种宽5mm，长50mm的商品化塑料试条。5.联合药物敏感试验：体外联合药物敏感试验的意义：(1)治疗混合性感染(2)预防或延迟细菌抗生素耐药性的发生(3)联合用药可以减少剂量以避免达到病毒性剂量（4）联合用药比单一用药时常常效果更好。抗菌药物联合用药可以出现4种结果：1.拮抗作用2.无关作用3.累加作用4.协同作用。2.联合抑菌试验判断标准：FIC指数0.5协同作用；0.5~1为相加作用；1~2为无关作用；2为拮抗作用。第九章微生物检验质量保证与生物安全1.培养基的一般质量控制：(1）外观：每种培养基均应标注清楚、无浑浊，固体培养基应无菌落生长。(2）无菌试验：培养基制作完成后，应检测每批培养基的灭菌效果，无菌生长为合格。(3）培养基的量：斜面培养基的长度为试管长度的2/3。双塘铁培养基底层至少有1cm的直立段。MH平板的厚度为4mm，即直径为90mm的平皿，注入25ml的培养基即可。其他平板厚度一般为3mm，在90mm直径的平皿中注入15—20ml的培养基。(4）培养基pH：配制好的培养基pH应与规定的pH相差±0.2以内。(5)性能试验：每一批新配制的、新购入的培养基，均应用已知性质的标准菌株进行预测，合格方可使用。2.生物安全水平及适用范围：⑴一级生物安全防护实验室BSL-1：是微生物基础实验室，进行试验用的都是最低等级的污染物或安全的微生物，并且完全符合标准实验室操作，如枯草芽孢杆菌等。⑵二级生物安全防护实验室BSL-2：适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物，属于第三类病原微生物的如：沙门菌属、乙型肝炎病毒等的试验操作。⑶三级生物安全防护实验室BSL-3：操作对象一般是可以经呼吸道传播的危险微生物，如：结核分枝杆菌。⑷四生物安全防护实验室级BSL-4：进行试验研究的物质是一些非常高危险性并且可以致命的有毒物质，可以通过空气传播并且现今并没有有效的疫苗或者治疗方法来处理，如:出血热病毒。第十章医院感染1.医院感染（NI）：又称医院获得性感染，包括在医院获得而出院后才发生感染，但不包括入院前已存在的感染或入院时已处于潜伏期的感染。探视者在医疗机构中获得的感染、工作人员的职业性感染也属于医院感染，入院48h后发生的感染通常认为是医院感染。2.医院感染病原体特点：（1）病原体以细菌最多见，真菌感染明显增多（2）大多数为条件治病微生物（3）多数病原菌对抗菌药物具有耐药性或多重耐药（4）免疫功能低下患者可以感染多种病原体。常见的医院感染：泌尿道感染。第十一章血流感染1.血液标本采集：.①采血时机：理想的血液细菌培养应该是患者接受抗生素治疗之前进行，故采集血培养应尽可能在患者寒战或发热前。②采血部位：应行径皮外周静脉穿刺采血，应严格无菌操作。③采血份数：对每名患者应至少从不同部位采集至少2~3份，对怀疑亚急性感染性心内膜炎的患者，应间隔1h，连续采集3份血进行培养④采血量：通常采血量应是培养基的1/5或1/10，成人患者每次最好采集10~15ml；对于儿童患者，每瓶至少注入1~5ml⑤血培养瓶的使用：根据不同的血培养方法，采集到的血液标本应立即注入血培养瓶或含有聚茴香磺酸钠SPS的无菌容器中，并尽快进行培养。第十二章中枢神经系统感染1.用于常规细菌检测的脑脊液应为1ml或大于1ml；用于检测抗酸菌的脑脊液量应为5ml或大于5ml。第十三章皮肤及软组织感染1.皮肤和软组织感染的细菌学检查A、封闭性脓肿：局部消毒后，用注射器抽取脓液和脓肿标本置于厌氧运送培养基内送检。B、放线菌感染标本：选取流出脓液中的额“硫磺样颗粒”置于无菌试管内送检。2.检验方法：①肉眼观察②直接显微镜检查③分离培养与鉴定。第十四章呼吸系统感染1．急性呼吸道感染约有70%~80%由病毒引起。2.痰液标本的采集法中的气管镜采集法：通过支气管镜用保护性导管支气管刷采取的呼吸道标本，受上呼吸道菌群污染的可能性最小，最适合进行细菌培养（包括需氧与厌氧培养）。3.上呼吸道标本的分离培养：常规接种血平板、巧克力平板及麦康凯平板。4.痰液标本的检查方法【一般细菌、真菌涂片检查目的是①确定标本是否适合做细菌培养，采用标本直接涂片镜检，依据在低倍视野中鳞状上皮细胞10个，或白细胞25个，同时几乎见不到鳞状上皮细胞为符合要求的痰标本，否则视为不合格痰标本②初步判定是否有病原菌存在】。第十五章胃肠道感染消化道感染病及临床特征常见疾病临床特征食物中毒餐后半小时至48h可出现腹痛、恶心、呕吐、腹泻等症状。有些表现为神经系统症状，如头痛、怕冷、发热、乏力、瞳孔散大、视力模糊、吞咽及呼吸困难等霍乱腹泻是发病的第一个症状，其特点为无发热，无里急后重感，多数不伴腹痛，起初大便含粪质，后为黄色水样便或“米泔水”样便；喷射状呕吐。不同程度的脱水、肌肉痉挛、低血钾、尿毒症、酸中毒及循环衰竭等病毒性腹泻腹泻呕吐。轮状病毒性腹泻秋冬季发生率最高，夏季发病率较低、水样便、发热者多为低热伤寒高热且持续不退；食欲不振，舌尖与舌缘的舌质红，即伤寒舌。腹胀，多有便秘，少数则以腹泻为主，右下腹可有轻度压痛，重者可有昏迷或出现脑膜刺激征，脾肿大。结肠炎黏液便及脓血便样腹泻，重者数十次或腹泻与便秘交替出现，左下腹或下腹阵痛，严重便秘，还可有腹胀、消瘦、乏力、肠鸣、失眠、多梦怕冷等症状细菌性痢疾发热腹痛、黏液脓血样腹泻、里急后重。中毒型急性发作时，可出现高热、感染性休克症状，有时出现脑水肿和呼吸衰竭1.直接涂片检查：粪便标本中由于含有大量的正常菌群，在直接涂片上根据其染色性和形态无法区别病原菌，故一般不做直接涂片检查。2.与抗生素相关性腹泻（ADD）有关的病原菌主要有艰难梭菌、金黄色葡萄糖菌、产气荚膜梭菌等。第十七章泌尿系统感染1.膀胱穿刺法：常采用耻骨上膀胱穿刺抽取尿液法，该方法是目前判断膀胱内有无细菌感染的金标准，常在怀疑厌氧菌感染时采用。2.怀疑结核分枝杆菌感染时用集尿法采集。3.尿液中一般细菌及假丝酵母菌培养菌落计数105CFU/ml提示可能为泌尿系统感染。第十八章生殖系统感染1.培养法是WHO推荐的淋病筛查的唯一方法，也是实验室诊断的“金标准”。2.脑脊液VDRL（性病研究实验室实验）实验有助于神经梅毒的诊断。3.淋病奈瑟菌、衣原体、生殖道支原体、杜克嗜血杆菌的分离培养是淋病、生殖道沙眼衣原体感染、生殖道支原体感染、软下疳实验室诊断的“金标准”，阳性者可确诊。第二十二章球菌1.葡萄球菌属：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，最适宜生长温度35℃，最适pH7.4，在普通平板上培养18—24h，形成直径2mm左右，呈金黄色、白色或柠檬色等不同色素，凸起、表面光滑、湿润、边缘整齐的菌落。多数菌株耐盐性强；凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）近年来成为医院感染的主要病原菌。2.葡萄球菌的分离培养：血标本应先增菌培养，脓液、尿道分泌物、