浮游植物的采集、计数与定量方法

浮游植物的采集、计数与定量方法浮游植物（Phytoplankon）又称浮游藻类，是水中悬浮生活的若干种藻类的总称。浮游植物及其生产力的作用：水生态系统的重要成员与重要功能之一：是鱼类天然饵料的重要组成部分；由于浮游植物对环境的变化十分敏感，故在环境监测中，也有重要作用。种类和数量浮游植物的现存量：定义：指的是某一瞬间单位水体中所存在的浮游植物的量。两种表示方法：•用数目单位表示的密度，一般用个／升为单位，五、六十年代用之；•用重量单位（mg/L）表示的现存量称为生物量（Biomass）。70年代以来被广泛使用。不同水体，不同种类的藻类在个体上有很大差异，仅仅用数量就很难评价。这就要求，浮游植物的定量工作，必须以测算生物量为目标。在早期不同水体饵料生物的丰欠调查中，人们往往只注重浮游植物的种类或数量，其原因在于：浮游植物生物量测算繁琐。一、采样：1、工具25目2．采样点的选择及采样层次的确定选择采样点的原则是，采样点在平面上的分布要有代表性。根据调查的目的而定。一般要求湖心、库心、江心必须采样，有条件时采样点可适当多设一些，如大的湖湾、库湾、河流的上、中、下游水体的沿岸带、浅水区等也要设点采集。凡水深不超过2米者，可于采样点水下0.5m处采水，水深2～10米以内，应距底0.5米处另采一个样，水深超过10米时。应于中层增采一个水样。⑴池塘：样点可设在距岸边1m处。水深小于2m时采一中层水样。若水深大于2m时，最好采上、中、下层水样。亚表层：水下20cm左右。中层：水体中间部分。下层：离底20cm左右。⑵水库及河流：样点可设在上、中、下游。上游：设十个点（亚表层或中层）中游：水在2－3米深时设一个点，采2个样（上中层和中下层）下游：设2－3个样点。中心点3个样（上、中、下层），两测点各一个样（中层）⑶湖泊：中心区设一点。进水口和出水口也应设点。3．采样量及采样次数每一个采样点应采水1000ml。若系一般性调查，可将各层采的水等量混合，取1000ml混合水样固定；或者分层采水，分别计数后取平均值。（分层采水可以了解每一采样点各层水中浮游植物的数量和种类）采样次数可多可少。有条件时还可逐月采样一次，一般情况可采样一次，最低限度应在春季、夏季末、秋初各采样一次。二、固定保存鲁哥氏液即将6克碘化钾溶于20ml水中，待其完全溶解后，加入4克碘充分摇动，待碘全部溶解后定容到100ml即配成鲁哥氏液。沉淀浓缩：上述水样，摇匀后倒入1000ml瓶子中沉淀24小时，用虹吸管小心抽出上面不含藻类的“清液”。剩下30－50ml沉淀物转入50ml的定量瓶中；再用上述虹吸出来的“清液”少许冲洗三次沉淀器，冲洗液转入定量瓶中。浓缩时切不可搅动底部，万一动了应重新静止沉淀。凡以碘液固定的水样固定的水样，瓶塞要拧紧。还要加入2－4％的甲醛固定液（福尔马林），即每100ml样品需另加4ml福尔马林，以利于长期保存。采水时，每瓶样品必须贴上标签，标签上药剂在采集的时间、地点、采水体积等，其他详细内容应另行做好记录，以备查对，避免错误。三、计数方法工具：将浓缩沉淀后水样充分摇匀后，立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml样品，注入0.1ml计数框内（计数框的表面积最好是20×20㎜），小心盖上盖玻片（22×22㎜2），在盖盖玻片时，要求计数框内没有气泡，样品不溢出计数框。然后在×10或×40倍显微镜下计数。每瓶标本计数数量：计数两片取其平均值，每片大约计算50～100个视野，但视野数可按浮游植物的多少而酌情增减。如平均每个视野不超过1～2个时，要数200个视野以上，如果平均每个视野有5～6个时要数100个视野，如果平均每个视野有十几个时数50个视野就可以了。同一样品的两片计算结果和平均数之差如不大于其均数的±15％，其均数视为有效结果，否则还必须测第三篇。在计数过程中，常碰到某些个体一部分在视野中，另一部分在视野外，这时可规定出在视野上半圈者计数，出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞表示，对不宜用细胞数表示的群体或丝状体，可求出其平均细胞数?。计算时优势种类尽可能鉴别到种或属，注意不要把浮游植物当作杂质而漏计。四、数量与生物量的计算：1．一升水中的浮游植物的数量（N）可用下列公式计算：式中：Cs—计数框面积（㎜2），一般为400㎜2。Fs—每个视野的面积（㎜2），лR2，视野半径r可用台微尺测出（一定倍数下）。Fn—计数过的视野数。V—一升水样经沉淀浓缩后的体积（ml）U—计数框的体积（ml）为0.1ml。Pn—计数出的浮游植物个数。此常数用K表示，则上述公式可简化为：N=K×Pn。PnUVFnFsCsNPn代表某种藻类的个数，计算结果N只表示一升水中这种藻类的数量；Pn若代表各种藻类的总数，计算结果N则表示一升水中浮游植物的总数。前者若求浮游植物数量将各计算结果相加即可。2．生物量一般按体积来换算这是因为浮游植物个体积小，直接称重较困难，且其细胞比重多接近于1。可用形态相近似的几何体积公式计算细胞体积。细胞体积的毫升数相当于细胞重量的克数。下列体积公式，可供计算生物量时参考：圆锥体：V=1/3лR2h圆柱体：V=лR2h球体：V=4/3лR3椭圆体：V＝4/3ab2л（a为长轴半径，b为短轴半径）圆台体：V＝1/3лH（+）长方体与正方体ab×h或a3不规则性藻类可分可为几个部分计算。硅藻细胞的计算通式：V＝壳面面积×带面平均高度每种藻类至少随机测量20个以上，求出这种藻类个体种的平均值，一般都制成附表供查找。此平均值乘上一升水种该种藻类的数量，即得到一升水中这种藻类的生物量（mg/L）。由于同一种类的细胞大小可能有较大的差别，同一属内的差别就更大了，因此必须实测每次水样中主要种类（即优势种）的细胞大小并计算平均重量，其他种类可以参考附表计算。藻类的生物量可直接作为初级生产力的一种指标，根据几次定期测算的现存量之差亦可估计出生产量。定量结果应列出:总生物量各门生物量优势种属的生物量。在条件许可时还可以用较简单的测定叶绿素法，来对照或代替生物量。但叶绿素法不能反映种类组成情况。