疫苗生产流程

疫苗生产项目简介疫苗，是指为了预防、控制传染病的发生、流行，用于人体预防接种的疫苗类预防性生物制品。其原理是将病原微生物（如细菌、立克次氏体、病毒等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。疫苗生产项目简介疫苗生产项目简介当我们拿到一个工程项目时，首先要做的就是明确设计的依据，这个依据应该包括：工艺技术、设备及公用辅助设施等有关基础资料、生产规模、生产方式、生产班制,国家及行业主要有关规范和规定等，只有有了这些依据，我们下一步的工作才能做到有的放矢。然后就是确定工程范围，明确我们要做的工作。疫苗生产项目简介确定了以上的各项工作后，设计工作就要正式开始了，作为市场开发人员，我们要大致了解一下一般设计的基本原则，这样能方便我们工作的开展：1、根据生产工艺特点和GMP实施指南要求，全面规划，精心设计，在满足生产需要的前提下，做好工艺设备平面布置，使之既符合消防安全又节约能耗、方便生产。2、设计中要重视技术进步，认真吸取国内外先进经验，积极慎重地采用新工艺、新设备以确保产品质量和提高生产效率。选用运行可靠、质量高的国产设备及国外设备。疫苗生产项目简介3、设计中要把节约和合理利用能源放在重要位置加以考虑。积极采用节能措施，尽量选用节能工艺和设备，充分利用地下资源，搞好水的循环利用。4、设计中要精打细算，把有限的资金用在关键设备上，使资金使用更加合理化。5、严格按照国家环保法和有关文件精神搞好“三废”治理和职业安全卫生设计工作。疫苗生产项目简介生产工艺确定了，我们要根据工艺流程来进行工艺平面布置，在这里最重要的一点就是不能出现交叉污染的风险，这又要简单的了解一下疫苗的分类。目前使用的绝大部分疫苗，都是用于预防病毒或细菌的感染的。它们主要分为三类：减毒活疫苗；灭活的全菌体或全病毒疫苗；组分疫苗—亚单位疫苗、多糖疫苗或结合型疫苗、类毒素等。疫苗生产项目简介(一)灭活疫苗：目前常用的有流行性乙型脑炎疫苗，狂犬病疫苗（二倍体细胞与地鼠肾细胞可用于生产狂犬病病毒固定毒灭活疫苗），流感灭活疫苗。常用甲醛为灭活剂，以灭活病毒核酸而不影响其抗原性。•(二)减毒活疫苗:通常采用自然法或人工法，通过动物传代或细胞传代筛选对人毒力低的变异株病毒。常用的有脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗、流感温度敏感突变株疫苗、流行性腮腺炎疫苗、风疹疫苗、黄热病疫苗以及一些联合疫苗（如麻疹、腮腺炎、风疹联合疫苗）。疫苗生产项目简介(三)亚单位疫苗：用化学试剂裂解病毒，提取包膜或衣壳上的亚单位，除去其核酸，以此制成的疫苗称亚单位疫苗。如流感病毒的包膜提取后制成的血凝素和神经氨酸酶亚单位疫苗。下面是几种疫苗的培养方法。疫苗生产项目简介疫苗名称疫苗株死∕活制备细胞培养方法脊髓灰质盐疫苗灭活猴肾细胞转瓶培养脊髓灰质盐疫苗活VERO细胞微载体培养狂犬病毒疫苗死人二倍体细胞微载体培养流行性乙型脑炎疫苗灭活人二倍体细胞多层滋养增殖器单纯疮疹死豚鼠胚成纤维细胞转瓶培养疫苗生产项目简介(病毒生产制备的方法：•1、动物接种，如狂犬病毒、脑炎虫媒病毒采用鼠、兔脑内接种后收取脑组织制成悬液。•2、鸡胚、鸭胚接种：如流感病毒、副流感病毒（NDV-F）、仙台病毒等，目前尚无敏感细胞，常采用9～10日胚龄的尿囊腔接种，37℃孵育72小时收获尿液，用鸡红血球测定血凝效价。Q热用7日龄鸭胚进行卵黄囊接种收获卵黄囊，马脑炎病毒常采用10日龄鸡胚体接种，收获全胚体液等。疫苗生产项目简介•3、细胞培养法•不同的病毒选用相应的敏感细胞，采用转瓶培养、多层培养、微载体培养或悬浮搅拌培养等方法,先大量增殖细胞，然后接种一定量的病毒,继续培养适当时间时，冻融细胞后，离心收获上清。•以上病毒大量生产后可制作病毒疫苗（死疫苗或减毒活疫苗），也可用来作干扰素诱生剂或提取病毒表面抗原成分。疫苗生产项目简介一.生产过程举例１：发酵纯化Ⅰ纯化Ⅱ灭活吸附二、生产过程举例２：安全/抑制有效病原体安全/尤其产生不稳定病毒去除杂质及所需产物特性相近的外来物质在辅助剂帮助下完成对大疫苗颗粒的灭菌过滤滤发酵收集/灭活加工配制和灌装疫苗生产项目简介疫苗生产项目简介•无论一种疫苗在试验阶段是多么有效，但如果其最终产品悬液不能稳定地储存和运输，那么它的商业价值就会受限，面对这一问题，人们开发了各种剂型，但目前常用的，也是最有效的方法还是冻干，制药企业可以将其运用到那些昂贵的、不稳定的疫苗生物制品的生产中。疫苗生产项目简介•通过以上简单的介绍，我们知道了疫苗生产包括原液生产和制剂生产，为了得到真正的能用于实际的疫苗，我们就需要建设用于疫苗生产的车间，为疫苗的生产提供环境和物料方面的支持，那么建设一个疫苗生产车间需要哪些专业的配合呢，下面我们分别进行说明。疫苗生产项目简介•首先是工艺专业，因为已经确定了工艺平面和设备平面布置，下面的主要工作就是配管了，工艺管道是物流的通道，是疫苗生产的血管，它为生产提供原料、水、蒸汽等。对于一般的疫苗项目来说，用到的主要的工艺管道包括：注射用水、纯蒸汽、纯水、压缩空气、氧气、氮气、冷却水、废水等系统，而对产品质量起到关键作用的则是注射水、纯水、纯蒸汽系统。疫苗生产项目简介•注射用水一般用纯化水通过蒸馏法制得，化学纯度可达99.999%，为保证注射用水的质量，必须随时监控蒸馏法制备注射用水的各生产环节，定期清洗与消毒注射用水制造与输送设备，严防内毒素产生，一般应在八十摄氏度以上保温、六十五摄氏度保温循环或四摄氏度以下的无菌状态下存放，并在制备后十二小时内使用。疫苗生产项目简介•纯化水为饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它适宜方法制备的水，水中不含任何附加剂，制备过程中应防止防止微生物污染，常用作溶剂或精洗用水，临用前准备；纯蒸汽作为灭菌消毒的一种介质，是利用纯化水或注射用水再次加热蒸发产生的。工艺管道一般全部采用不锈钢材质。注射水和纯蒸汽为电刨光316L，其余为机抛。疫苗生产项目简介以往工程实例疫苗生产项目简介•疫苗的生产需要在一个相对洁净的区域内生产，这就要靠洁净维护和洁净空调来实现，下面先说说洁净维护系统：作为生物医药厂房，它与其它洁净厂房的区别不是很大，主要在于：1、生物医药厂房对维护结构（即壁板和顶板等）的密封性能要求更高；2、生物医药厂房对维护结构的平整度要求更高；生物医药厂房建筑必须针对生物医药工程存在的气溶胶泄露的可能发生环节进行全面考虑，在产生安全隐患的地方进行彻底的密封处理。生物医药厂房的维护结构的密封性能和平整度性能主要体现在以下几个方面：1、双圆弧天轨；疫苗生产项目简介2、圆弧转角；疫苗生产项目简介3、单圆弧收边；疫苗生产项目简介4、可调式地轨+PVC地面；7544疫苗生产项目简介5、双层玻璃观察窗；疫苗生产项目简介6、暗架龙骨吊顶；暗架天花板节点图ABBAC疫苗生产项目简介各种型材三维图：疫苗生产项目简介整体效果：疫苗生产项目简介由以上图片显示，双圆弧天轨、圆弧转角、单圆弧收边、可调式地轨+PVC地面、双层玻璃观察窗、暗架龙骨系统从根本上保证了生物医药厂房围护结构的平整性能和密封性能，从而最大程度上保证了生物医药厂房的安全性。疫苗生产项目简介疫苗生产项目简介•洁净维护为疫苗的生产提供了一个相对洁净的环境，可以阻止外部的灰尘的进入，而对于内部空气的净化与室内产尘的清除，就要靠洁净空调系统来实现了，目前，疫苗车间常用的空调系统为FFU与高效口联合送风的方式，FFU的集中布置在轧盖间和分装间，此部分为整个疫苗生产线的核心中的核心部位。根据欧盟GMP要求，此部分必须用A+B的送风方式。即在设备区域必须满足A级（相当于百级），在设备外侧部位必须满足B级（相当于静态百级动态万级）来保护A级区域。其余部位则通过高效送风口来实现洁净度的要求。疫苗生产项目简介•在洁净空调系统中，室外新风先通过新风过滤去除空气中较大粒径的杂质，然后通过加热、表冷、加湿段等来调节送风的温湿度，目前常用的有两种做法，一种是设置单独的新风空调，达到新风处理的目的，此新风空调可满足初步洁净度的要求，还可以根据需求对温湿度进行控制；另一种做法是不设置信封空调，所有的洁净度和温湿度都靠净化空调来实现，对于空气质量相对较好，温湿度负荷不是很大的地区，用第二种方法可以节省投资和占地面积，而对于空气质量不是很好或者温湿度负荷较大的地区，则容易导致过滤器短时间内堵掉、机组过大、不易调节等问题，所以具体选用哪种方式要根据具体情况来确定。疫苗生产项目简介•经过机组处理过的洁净空气通过风管送到各个洁净区域，再经过高效过滤器送到室内，这与普通的空调送风没有太大的区别，不同之处在于疫苗生产车间有消毒杀菌的需求，是生产过程中的重要一环，所以选择一个好的杀菌方式是相当重要的，目前常用的就是用外置臭氧发生器消毒，可以满足一般的消毒杀菌的要求，但对于部分有防爆要求的全新风房间，怎要根据具体的情况选择合适的杀菌方式。疫苗生产项目简介风管安装实例保温安装实例疫苗生产项目简介•因为现在的集成度较高，好多地方手工控制都都不能满足要求，所以无论工艺的管道、设备，还是空调机组和排风装置，都要加自控装置，对于疫苗生产车间来说，主要要控制的方面包括工艺管道系统的流量、温度、TOC、电导率、PH值，暖通空调方面的尘埃粒子在线监测等，下面分别作一介绍。疫苗车间自控组成•洁净空调自控系统•冷冻站自控系统•纯水自控系统•注射用水自控系统•在线粒子检测系统•FFU控制系统•门禁监控系统•系统集成自控框架图自控网络结构•INTERNET互联网•企业管理网(局域网LAN)•工业控制网(单环工业以太网)•现场总线(双DP,RS485总线等型式)控制结构WEB服务器PCS7工程师/操作员+用户通过IE登录WEB服务器进入PCS7自控系统WEB服务器实现用户远程登录系统页面，支持电子签名，跟踪记录.按用户权限分级登陆。系统集成数据服务器（OPC）收集所有子站的实时过程数据，建立历史数据库，支持在线数据存储和查询。文件报表输出PCS-7工程师站自控系统组态、控制；洁净室粒子状态画面；FFU实时状态画面显示；水系统实时动态控制分装间药品流程Am2Am2Am2注射原液稀释后拿到分装线，灌装加塞，送入冻干机。从冻干机拿出来的粉剂运到扎盖机扎盖后，变成成品运出车间。设备布局和药品流程分装间在线粒子计数采样点布置B点位布置:理瓶1#；灌装头2#压塞3#；冻干机4~5#；0.5μ+5μ二通道,28.3L/min,激光在线粒子计数.采样头的安装方式空调自控原理图1.房间温度控制2.房间湿度控制3.房间压差监测4.系统风量控制5.高效压差报警6.灭菌器\分装烘洗线运行状态FFU控制(群控方式)连接方式：1台FFU控制器，分路网线连接现场FFU。工作站在值班室实现控制每组FFU的启/停，无级调速，显示FFU的运行状态及故障报警工作状态：开启全部FFU,使洁净室达到A级工作状态值班状态：部分开启FFU或降速运行,使洁净室保持在B级状态。EUGMP对灭菌生产操作区洁净室的分类（动态）RoomclassificationMaximumconcentrationlimits(particles/m3fair)forparticles/AirborneViables(cfu/m)0.5μ5μViablecfu/m3And/φ90mmsettleplateA–Operational3,5001(e)11/4hrsB–Operational350,0002,000105/4hrsC–Operational350,00020,00010050/4hrsD–Operational200100/4hrs0.5μ主要是控制洁净室尘埃的主要指标,5μ主要为控制微生物的主要指标.粒子计数器的通道选择为0.5μ和5μ有关CGMP(FDA&EUGMP)等级划分原则•ClassA:主要无菌区经过消毒的药品、容器以及药品包装物裸露在周围环境之中，而周围环境必须保证维持药品的消毒效果。空气清洁度相当于的“第100级（ISO第5级）”,无论是操作还是空闲时都必须非常干净.1.灌装操作灭菌管