体外受精和早期胚胎培养(公开课)

第二节体外受精和早期胚胎培养榜山中学杨美山2013.5.141988年3月10日我国首例试管婴儿“神州试管婴儿之母”张丽珠教授和我国大陆首例试管婴儿郑萌珠试管婴儿1978年7月26日，世界首例试管婴儿“路易斯．布朗”在英国诞生，现已成为母亲。根据资料回答下列问题：1.资料上用到了什么生物技术？试管婴儿技术（包括体外受精、胚胎体外培养）和胚胎移植技术。2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何异同？相同之处：都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。存在困难：1、引进一头良种成年奶牛需要3万－5万元。2、牛的生育率低，一头牛一胎只一个，一生只能生育四五次。（牛的妊娠期约280天）讨论1：是否有可能让引进的良种牛快速大量的繁殖？为什么？牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右。公牛产生的精子数目就更多了（精子数:50亿/mL)理论基础：讨论2：如何让引进的良种牛快速大量的繁殖？试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。快速繁殖动物优良品种目的：技术手段：体外受精和早期胚胎培养试管动物技术的三个基本操作环节：第一步：体外受精第二步：胚胎的早期培养第三步：胚胎移植精子卵子受精卵早期胚胎幼体①②③新个体哺乳动物个体发育过程试管动物思考：子代数目的多少取决于精子数还是卵子数？方法1：给供体注射促性腺激素，使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子（超数排卵），之后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。方法2-1：从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集卵母细胞借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫，同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。方法2-2：从活体卵巢中采集卵母细胞比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同，为什么？比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同，为什么？2.精子的收集和获能1)收集的方法:假阴道法,手握法和电刺激等2)获能处理:培养法：把精子放入获能液中。（啮齿动物、家兔和猪）化学法：把精子放入一定浓度肝素等溶液中。（牛、羊）3.受精在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程离心的目的是什么？卵母细胞的培养的目的是什么？CO2培养箱二、胚胎的早期培养复习：动物细胞培养的条件是什么？二、胚胎的早期培养发育培养液成分:水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.为充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母细胞，不妨将屠宰场和“胚胎工厂”合建。这样屠宰场的产品就不仅是鲜肉，还会生产出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料，你看这个想法可行吗？奇思妙想采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎胚胎移植受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂市场采集卵巢中的卵母细胞“试管牛”工厂化生产的技术流程图保存剩余的卵子和精子的方法是什么？试管动物与克隆动物相比生殖方式：技术手段：遗传规律：有性生殖无性生殖核移植技术、胚胎移植遵循无体外受精胚胎移植胚胎移植采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂市场采集卵巢中的卵母细胞“试管牛”工厂化生产的技术流程图1哺乳动物的体外受精主要包括___________，___________和_______等主要步骤。卵母细胞的采集精子的获取受精2收集精子的方法①___________：②___________：③___________：假阴道法手握法电刺激法3对家畜进行卵母细胞采集时，可用()处理A.促性腺激素B.促性腺激素释放激素C.肝素D.性激素4从活体动物的卵巢中直接采卵时，不正确的方法是A.超声波探测仪B.内窥镜C.腹腔镜D.阴道镜5体外受精的场所A.在水溶液中B.在盐溶液中C.在获能溶液或专用的受精溶液中D.在酒精溶液中3.2体外受精和早期胚胎培养一、从试管牛说起二、体外受精1.卵母细胞的采集和培养2.精子细胞的采集和获能3.体外受精过程三、胚胎的早期培养1.概念：应用人工创造条件，对获取的早期胚胎进行体外培养。2.培养液成分：