生物安全实验室基本要求与个人防护设备

生物安全实验室的基本要求与建筑技术规范BSL-3实验室赵卫实验室在建筑上的结构特征，如实验室的布局、送排风系统等；★实验室设施★实验室设备安全设备的配置，如生物安全柜的选择和安装、高压灭菌器的型别、离心机安全罩等。四级生物安全防护水平★一级为最低级防护水平四级为最高级防护水平一级防护屏障（安全设备）一、生物安全实验室结构硬件软件标准操作程序二级防护屏障（设施）实验室管理规程病原体的防护水平BSL4BSL3BSL2BSL1__★微生物对人、动物、植物和/或环境的危害★程序和设施要求★必须的防护水平★对人员、环境和社会的保护程度一级生物安全防护水平（BSL－1）★适合于已知其特征的、在健康成人中不引起疾病的、对实验室工作人员和环境危害性最小的生物因子的工作。★许多通常与人类疾病不相关的病原微生物是条件致病性的。★对于在体内已经繁殖多代的疫苗株不要简单地认为是无毒的。BSL－1实验室★不需要特殊的一级和二级屏障、除需要洗手池外，依靠标准的微生物操作即可获得基本的防护水平。二级生物安全防护水平（BSL－2）★适用于操作我国的第三类（少量二类）危害的致病微生物。★适合于从未知病原的人身上取血、体液和组织。BSL－2实验室★微生物操作必需在一级生物安全防护水平的基础上，增加生物安全柜、高压灭菌器等。三级生物安全防护水平（BSL－3）★适用于操作我国第二类（个别第一类）病原微生物。BSL－3实验室★所有实验室操作应在生物安全柜或其它密闭容器中操作，如气密型气溶胶发生柜。二级屏障包括实验室的控制入口和为减小感染性气溶胶从实验室释放的特殊通风系统。四级生物安全防护水平（BSL－4）★适用于操作我国第一类病原微生物。另外，与四级生物安全防护水平的微生物具有相近的或一致的抗原关系的微生物也应该在该防护水平进行研究。★我国尚未发现或已经灭绝的微生物★III级生物安全柜或全身正压防护服能够把实验室工作人员与气溶胶化的感染性材料完全隔离开。★一般是独立建筑物或具有复杂的、特殊的通风系统和防止活的微生物释放到环境中的污物处理系统与其它建筑完全隔离。CDCbiocontainmentlaboratory,Atlanta对BSL-2的应用和意义1.应用最多2.最普遍病原生物的危险等级分布种类危害等级Ⅳ危害等级III危害等级Ⅱ危害等级I病毒185114219细菌311901真菌635寄生虫1232临床检验相关生物危险等级分布020406080100120140160180200病毒细菌真菌寄生虫一级二级三级四级人间传染的病原微生物名录类别合计病毒（朊）细菌真菌备注第一类2929（-）——第二类6951（4）104第三类27775（2）14555第四类66（-）——合计380160（6）15559380种人间传染病原微生物分类对BSL-2的应用和意义1.应用最多2.最普遍3.容易建容易通过4.风险小，使用方便5.节约6.训练队伍，可应急二、生物安全实验室的建设《实验室生物安全通用要求》GB19489-2008《生物安全实验室建设技术规范》GB50346-2011★气溶胶的形成；★处理大容量和／或高浓度微生物；★人员或设备过多；★啮齿动物和节肢动物大量孳生；★未经允许人员进入实验室；★工作流程中使用一些特殊的样品和试剂。能够造成实验室生物危害的主要因素BSL－1实验室的设施要求★应为安全运行以及清洁和维护提供充足的空间。★实验室的工作区域外有存放外衣和私人物品的设备。★应该有洗手池，最好安装在出口处。★窗子和门入口处安装防媒介昆虫和啮齿动物的纱窗和挡板。★实验室的墙壁、天花板和地板应当是光滑、易清洁、不渗水以及耐化学品和消毒剂的腐蚀。地板应当是防滑的，同时应尽可能地避免管线暴露在外。★实验台应当密封于墙上，不渗水，并可耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂的腐蚀并能适度耐热。★在实验室内进行操作时均应保证照明，避免不必要的反光和闪光。BSL－2实验室的设施要求★门应能够自动关闭，有可视窗。★有适当的火灾报警器。★不需特殊的通风设备。但在计划安装新的设备时，应当考虑要设置通风系统，使空气向内流动而不发生循环。如果没有通风系统，那么实验室窗户应当能够打开，同时要安装防虫的纱窗。在满足BSL－1实验室设施的基础上，增加以下内容：★实验室所在建筑内配备高压蒸汽灭菌器。★实验室内使用专门的工作服；戴乳胶手套。★有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源。★实验室出口有黑暗中可明确辨认的标识。BSL-2实验室应在实验室内配备生物安全柜对BSL-3的特殊要求ThespecealrequestforBSL-3(3区2缓)(Threeareaandtwobuffer)★清洁区Cleansingarea★潜在(半)污染区latency(semi)pollutedarea★污染区pollutedarea两缓Twobuffer缓冲2（缓2）是B和C间的缓冲室，其功能：缓冲隔离、换衣、换鞋和消毒洗手。Buffer2locatedbetweenBandCsectionforseparation,changingclothes,changingshoes,disinfection,andwashinghands.缓冲1（缓1）是A和B区的缓冲室，其功能：缓冲隔离、换衣、换鞋和消毒洗手。Buffer1locatedbetweenAandBsectionforseparation,changingclothes,changingshoes,disinfection,andwashinghands.两传递窗Twopassboxes一传Onepass二传Twopass其他传递Theotherpass传递窗存在的问题Theproblemsexistedinthepassboxes生物安全实验室及个人防护设备一、生物安全实验室设备要求生物安全柜★高压灭菌器离心机安全罩洗眼器个人防护装备等生物安全柜（BSC）有三个级别，一共有六种。Ⅲ级为密闭袖套操作，其余为前开口操作。种类Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级BSC的差异BSC排气循环正面气流速度排处连接Ⅰ100%00.38室外硬管ⅡA130%70%0.38-0.51室内无ⅡA230%70%0.51室外套管ⅡB170%30%0.51室外套管ⅡB2100%00.51室外硬管Ⅲ100%0不适用均可均可所有生物学污染的管道均为负压状态或由负压的管道通风系统包围。一级生物安全柜气流形式房间空气污染空气HAPE过滤空气二级生物安全柜气流形式房间空气HAPE过滤空气IIA1型三级生物安全柜气流形式房间空气污染空气HAPE过滤空气生物安全柜的选择★首先必须是通过安全认证的产品美国NSF标准，欧洲TUVEN12469标准★由厂家直接销售或可信度非常高的代理商提供的产品，保证售后服务★选择时注意生物安全柜的风帘宽度，风帘越宽，安全性越高★前部两侧的乱流问题是否得以解决★更换滤膜的成本是否较低SFDAYY0569-2005(中国国家食品药品监督管理局生物安全柜标准)生物安全柜的放置•预留出空间连接管道，外接的排气口要比楼层高2米•A/B3型和B2型安全柜要放置在专用房间•放置生物安全柜的实验室，电压必须稳定，电流大于14A•远离门和窗•与墙壁有30cm的间距★注意保洁，每天做完实验后，清除所有废弃物，再用75%酒精消毒。★一般滤膜有5-10年使用寿命，在仪器压力表显示压力为50%时候，需更换滤膜。安全柜使用注意事项高压蒸汽灭菌器原理：高压及饱和蒸汽高热释放的潜热灭菌。适用：耐高温、耐高压、耐潮湿物品。★下排式压力蒸汽灭菌器★预真空压力蒸汽灭菌器手提式压力蒸汽灭菌器卧式压力蒸汽灭菌预真空高压蒸汽灭菌器抽出灭菌器内冷空气，形成负压，再输入蒸汽使蒸汽迅速透入物品。结构：加真空泵。蒸汽压力可达105Kp，温度达132OC脉动真空压力蒸汽灭菌器★一次预真空是在灭菌前先抽真空；★脉动真空是边加热边反复抽几次真空。双扉BSL－1实验室安全设备的要求★对高压灭菌器、离心机安全罩没有要求★Ⅰ型生物安全柜BSL－2实验室安全设备的要求Ⅱ级A1型或B1型生物安全柜★应安装在实验室内气流流动小，人员走动少，离门和中央空调送风口较远的地方。★生物安全柜的周围应有一定的空间，与墙壁至少保持30cm的距离，便于清洁环境卫生。★立式或台式不排气（产生的蒸汽被回收）★立式或台式排气或排水口装有HEPA滤器高压灭菌器放置在BSL－2实验室内，或门外。二、个人防护装备是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。1眼睛（安全镜、护目镜）2头面部及呼吸道（口罩、面罩、个人呼吸器、防毒面具、帽子）3躯体（实验服、隔离衣、连体衣）4手、足（手套、鞋套）5耳（听力保护器）（一）眼睛防护装备1安全眼镜和护目镜★当进行可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时，应佩戴护目镜。★在进行潜在爆炸和使用或混合强腐蚀性和强酸溶液时，应佩戴面罩。当腐蚀性或生物危害液体喷溅至眼睛时，应在就近的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15到30分钟。事后须立即填写事故报告单并报告主管领导。便携式洗眼装置固定式洗眼装置2洗眼装置（二）淋浴装置和应急消毒喷淋装置------应急消毒喷淋装置在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要20分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。1、规定：BSL-2实验室必要时应有应急喷淋装置2、要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主管领导（三）头面部防护装备口罩仅可保护部分面部免受生物危害物质喷溅物的污染仅适用于BSL-1或BSL-2实验室中使用★一般在使用时可同时佩戴面罩，以组合使用的方法★保护整个面部单独使用不能对工作人员提供呼吸保护正确佩戴和卸下外科口罩示意图防护面罩1、保护整个脸部必须用标准的防护面罩以罩住整个脸部或用口罩加护目镜（或口罩加安全镜）。2、保护部分面部配戴安全眼镜或护目镜，但必须戴口罩以保护部分面部或配戴标准防护面罩。——一次性面罩注意：1、常常同时佩带安全镜或护目镜或口罩。2、实验完毕后必须先摘下手套，然后用手卸下防护面罩。防护帽避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)要求：工作人员在实验操作时应佩带防护帽无纺布制成的一次性简易防护帽（四）呼吸防护装备----防毒面具（面具、个人呼吸器和正压防护服）★当实验室操作不能安全有效的将气溶胶限定在一定的范围内时使用一次性防毒面具一次性防毒面具罩式防毒面具及其佩戴方式。1、在防毒面具中装有一种可更换的过滤器，它可以保护佩戴者免受气体、蒸汽、颗粒和微生物以及气溶胶损害的影响。2、过滤器必须与防毒面具的正确类型相配套原理正确佩戴一次性防毒面具使用要点：（1）佩戴时选择合适和合格的防毒面具（2）遮盖住鼻子、口和下颚（3）用橡皮筋（松紧带）固定在头部（4）调整在合适的面部位置并加以检验（5）吸气时防毒面具应该有塌陷状（6）呼气时在面具周围不应该漏气正压防护服使用中的全罩式防毒面具首先提起面具下方橡皮筋（松紧带）越过头部然后提起面具上方橡皮筋（松紧带）使面具脱离面部卸下一次性防毒面具一次性防毒面具使用完毕后应先消毒再丢弃（五）手部防护装备—手套1、在感染性物质有可能接触到粘膜和非完整皮肤时，须使用合适的手套。2、手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护。手套规范的使用方法：1.手套的选择：生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护。2.手套的检查：使用手套前应检查手套是否退色、穿孔（漏损）或有裂缝。可通过充气试验，将其浸入水中观察是否有气泡来检查手套的质量。乳胶手套聚脂手套3、手套的使用1）一般情况戴一副手套（BSL-1）。2）在生物安全柜中操作感染性物质应戴两副手套。3）外层手套被污染时，立即用消毒剂喷洒手套并弃于生物安全柜中的高压灭菌袋，戴上新手套。4）戴好手套后应完全遮住手及