模块一血栓与止血常用筛选试验及血凝仪的使用

第二章血栓与止血一般验验TestOfThrombusAndHemostasis第三节血凝仪及临床应用•一期止血项目：BT和PLT血栓和止血检查Testsofthrombusandhaemostasis原发性血小板增多症血小板数量增加vWDvWF减少，过敏性紫癜单纯血管通透性和脆性增加所致的血管性紫癜特发性血小板血小板数量减少减少性紫癜BTPltBTPltBTPltBTPlt疾病试验结果病因一期止血缺陷•筛选试验的选择和应用BT和PLT都正常:过敏、单纯性和其他血管性紫癜等。BT↑，PLT↓:原发性或继发性血小板减少性紫癜。BT↑，PLT↑:原发性或继发性血小板增多症。BT↑，PLT正常:血小板无力症、贮藏池病以及低（无）纤维蛋白原血症、血管性血友病（vWD）等。APTT、PT、进一步做以下筛选试验：（二期止血）血栓和止血检查TestsofthrombusandhaemostasisDIC肝病血友病（A、B、FⅪ缺乏)获得性因子Ⅶ缺乏APTT↑PT→APTT→PT↑APTT↑PT↑内凝异常外凝异常共同途径异常试验结果疾病1.仅有APTT延长提示内源性途径因子异常：尤其是Ⅷ、IX、XI不能用正常血浆纠正：提示抗Ⅷ、抗IX抗体存在2.仅有PT延长提示外源性因子异常VII缺乏Vitk缺乏（II、VII、IX、X为Vitk依赖因子）严重肝病3.全部异常共同凝血途径异常（纤维蛋白原、凝血酶原、V、X因子缺乏）存在血液凝固调节的异常普通肝素(uFH):首选APTT作为监测试验，使APTT测定值维持在正常对照值的1.5~2.5倍口服抗凝剂的监测:选用血浆凝血酶原时间即PT监测，使PTR维持在1.8~2.5为佳。WHO推荐INR作为首选口服抗凝剂的监测试验，维持在2.0~3.0之间。抗凝治疗实验室监测项目的选择和应用纤溶系统亢进筛查试验•FDP：原发性纤溶亢进继发性纤溶亢进均阳性•D-二聚体：继发性纤溶亢进阳性凝血因子筛选试验：包括测定：活化部分凝血活酶时间（APTT），凝血酶原时间（PT），凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（Fg）定量。凝血四项称为第三节血凝仪及临床应用•掌握血凝仪的检测原理和基本结构•熟悉半自动、全自动血凝仪的特点，血凝仪的性能评价以及各种检测方法的优缺点•了解血凝仪的分类、临床应用、仪器的维护和进展请记住哦！血凝仪内容概要•血液凝固分析仪概述一、血凝仪分型与检测原理二、血凝仪基本结构与评价三、血凝仪的维护四、血凝仪临床应用与进展血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪（automatedcoayulationanalyzer,ACA）是采用一定分析技术，对血栓与出血有关成分自动检测的临床常规检验仪器在血栓/出血实验室中最基本的设备就是血液凝固分析仪（简称血凝仪）血液凝固分析仪概述发展史•1910年，Kottman发明了最早的血凝仪•1950年，Schnitger和Gross发明了基于电流法的血凝仪•20世纪70年代前为血凝仪的初级阶段血液凝固分析仪概述•20世纪70年代，较精确的各种自动血凝仪先后问世，其特点是：单通道、终点法的半自动血凝仪，也称第一代产品•20世纪80年代末，多通道、多种分析方法与原理的半自动血凝仪相继诞生，称之为第二代产品各代血凝仪的特点血液凝固分析仪概述•20世纪90年代以来，多通道、多方法、多功能全自动（即第三代）血凝仪不断涌现一、血凝仪分型与检测原理（一）血凝仪分型按自动化程度半自动血凝仪全自动血凝仪全自动血凝工作站三者有何区别？一、血凝仪分型与检测原理（二）血凝仪检测原理主要检测方法：凝固法、生物化学法、免疫学法等。彼此有何不同？一、血凝仪分型与检测原理血凝仪检测原理（二）底物显色法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子（一）凝固法生物学法流法——纤维蛋白原——纤维蛋白——导电光学法散射比浊法——凝固过程中散射光变化透射比浊法——凝固过程中吸光度变化浊度变化光度变化双磁路磁珠法——钢珠振幅衰减程度判断终点（三）免疫学法抗原抗体免疫扩散法火箭电泳双向免疫电泳免疫比浊ELISA法直接比浊乳胶比浊散射比浊透射比浊一、血凝仪分型与检测原理1．凝固法原理是通过检测血浆在凝血激活剂作用下发生一系列物理量（光、电、超声、机械运动等）的变化，再由计算机分析所得最终结果，称生物学法。按测量原理分为电流法、光学法和磁珠法。呵！是血浆凝固的变化一、血凝仪分型与检测原理•光学法（比浊法）：是根据血浆凝固过程中浊度的变化，导致光强度变化来测定相关因子12111有何不同？谁优一、血凝仪分型与检测原理光学法血凝仪工作流程一、血凝仪分型与检测原理纤维蛋白的形成与吸光度啊？为何在50%？一、血凝仪分型与检测原理双磁路磁珠法原理：测试杯的两侧各有一组驱动线圈，产生恒定的交替电磁场，使杯内去磁小钢珠保持等幅振荡运动；凝血激活剂加入后，随着纤维蛋白的增多，血浆黏稠度增加，小钢珠运动振幅逐渐减弱，将运动幅度衰减到50时确定为凝固终点一、血凝仪分型与检测原理双磁路磁珠法原理与光电磁法有何不同？与光电磁法有何不同？与光学法原理区别一、血凝仪分型与检测原理双磁路磁珠法与光学法原理主要区别•前者是检测血浆凝固过程中磁电信号变化•后者是检测该过程中光信号的变化一、血凝仪分型与检测原理2.免疫学法原理以纯化的被检物质为抗原，制备相应的抗体，然后利用抗原抗体反应对被检物进行定性或定量测定。血凝仪使用免疫比浊法一、血凝仪分型与检测原理3.生物化学原理：实质为光电比色原理，是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性，也称底物显色法二、血凝仪的基本结构与评价（一）血凝仪基本结构：1.半自动血凝仪基本结构主要由样本预温槽和试剂预温槽、加样器、检测系统（光学、磁场）及微机组成全自动呢？二、血凝仪的基本结构与评价（二）血凝仪评价1.一般性评价：①产品质量50%；②价格25%；③厂商评估10%；④担保5%；⑤售后服务5%；⑥可接受性5%。二、血凝仪的基本结构与评价2.技术性能评价：重复性测定、线性范围、准确性、携带污染率、干扰因素、可比性分析等几方面携便式血凝仪二、血凝仪的基本结构与评价（三）血凝仪的特点1.半自动血凝仪：①手工加样加试剂；②操作简便；③应用检测方法少；④价格便宜；⑤速度慢；⑥测量精度好于手工，但低于全自动哦？为什么？三、血液凝固分析仪的维护（一）半自动血凝仪的维护①保持测试槽清洁，严禁有异物进入；②避免阳光直晒和远离强热物体；③防止受潮和腐蚀；④仪器和加珠器都必须远离强电磁场干扰源；⑤电源电压为220V±10％，最好使用稳压器；⑥使用一次性测试杯及钢珠二、血凝仪的基本结构与评价2.全自动血凝仪基本结构包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出设备及附件等就这么简单？二、血凝仪的基本结构与评价（三）血凝仪的特点2.全自动血凝仪：①自动化程度高；②检测方法多；③通道多，速度快；④项目任意组合，随机性；⑤测量精度好，易于质控和标准化；⑥智能化程度高，功能多；⑦价格昂贵；⑧对操作人员的素质要求高。三、血液凝固分析仪的维护（二）全自动血凝仪的维护①清洗或更换空气过滤器；②检查及清洁反应槽；③清洗洗针池及通针；④检查冷却剂液面水平；⑤清洁机械运动导杆和转动部分并加润滑油；⑥及时保养定量装置；⑦更换样品及试剂针；⑧数据备份及恢复等四、血凝仪的临床应用与进展（一）临床应用1.凝血系统的检测2.抗凝系统的检测3.纤维蛋白溶解系统检测4.临床用药的监测四、血凝仪的临床应用与进展（二）进展主要体现在：①多方法、多功能、快速高效；②智能化程度高，软件开发进一步完善；③全自动血凝分析仪工作站；④床旁分析；⑤在临床中的应用日趋广泛第四节血栓与止血检查的质量控制•抗凝剂：109mmol/L枸橼酸钠溶液•抗凝剂与标本比例为1:9•标本勿溶血、凝血•标本采集、运送应在规定时间内完成