恶性淋巴瘤免疫组化讲课

恶性淋巴瘤的免疫组化一、常用抗体（一）白细胞1.CD45，CD45RB（LCA）•出现于白细胞表面的四、五种高分子量糖蛋白家族（180，190，205，220kD）•DAKO产抗体由二种单抗组成：–2B11(180，190，205，220kD)--CD45抗体–PD7/26(190，205，220kD)--CD45RB抗体•正常组织：–标记淋巴细胞。细胞膜表面阳性最强，胞浆内弱阳性也可见。–巨噬细胞和组织细胞不同程度表达。–多核白细胞弱阳性–浆细胞阴性–非造血细胞阴性•肿瘤：–大部分淋巴瘤（B和T）阳性–浆细胞及大细胞淋巴瘤常阴性–毛细胞阳性–粒细胞性或红细胞源性肿瘤细胞阴性–非造血组织肿瘤，如癌，恶性黑色素瘤，尤文氏肉瘤阴性•可用于脱钙骨髓活检组织，鉴别骨肿瘤2.CD11A/18（LFA-1α和β）•表达于大部分淋巴瘤和白血病•很多中等和高度恶性B细胞淋巴瘤LFA-1的α和/或β链可缺失。3.TdT•属核酶，参与T细胞受体产生和抗体分化过程。•正常组织：–见于小群成人骨髓淋巴细胞和大部分皮质胸腺细胞。–偶见于反应性淋巴结和脾–髓质胸腺细胞和正常外周血细胞不表达•肿瘤：表达于非成熟淋巴细胞来源肿瘤。高TdT活性见于:–淋巴母细胞性淋巴瘤–慢性粒细胞性白血病淋巴母细胞危象–大部分急性淋巴母细胞性白血病4.CD30•120kD跨膜糖蛋白•CD30基因位于第1号染色体短臂36区，早先称为Ki-1，又名Ber-H2•冰冻切片：–霍奇金细胞（单核）和R-S细胞（多核）结节型淋巴细胞为主型：弱阳性或阴性其它HL：强阳性–大部分间变性大细胞淋巴瘤和所有的淋巴样丘疹强阳性–一些外周多形T细胞淋巴瘤（HTLV-1+/-），包括血管免疫母细胞型，Lennert型和极少数B免疫母细胞淋巴瘤阳性。其他淋巴瘤阴性。–正常淋巴组织中，小群位于B细胞滤泡和生发中心边缘的大细胞阳性–正常淋巴细胞经菜豆凝集素，HTLV-I/II或EB病毒刺激后，可与CD30抗体反应。–淋巴组织外，胰腺腺泡细胞（+），胰腺癌偶（+）。胚胎型癌（+）。–其他类型或其他部位的癌，恶性黑色素瘤，横纹肌肉瘤和平滑肌肉瘤，尤文氏肉瘤（－）•石蜡切片：–与冰冻切片不同，浆细胞（+）–余同冰冻切片（二）B细胞1.免疫球蛋白（Ig）（1）κ免疫球蛋白κ轻链（2）λ免疫球蛋白λ轻链2.全B抗原（1）CD20（L26）•33kD非糖基化蛋白•外周血和淋巴组织中大多数B细胞阳性•在淋巴组织，生发中心母细胞和B免疫母细胞强阳性。•其他造血细胞阴性。•非淋巴组织阴性。•大多数B细胞淋巴瘤阳性•极少数T细胞淋巴瘤阳性•结节型淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤的R-S细胞可阳性。（2）CD19•95kD多肽•B细胞阳性。表达于B细胞成熟早期，可能早于前B细胞期，持续见于整个B细胞成熟期，直至终末浆细胞期前不久消失。•其他造血细胞和非造血细胞阴性。•只能用于冰冻切片。（3）CD22•B细胞分化早期表达于胞浆，后与Ig几乎同时到达细胞表面•B细胞淋巴瘤和白血病阳性•大多数浆细胞肿瘤阴性（4）CDW75（LN-1）•表达于SIg＋B细胞•正常细胞：–淋巴结和脾白髓的生发中心B细胞强（+）–套区B细胞，巨噬细胞，脾红髓红细胞阳性更弱–滤泡外B细胞散在阳性–浆细胞阴性–外周血B淋巴细胞阳性–阳性上皮细胞：腺上皮（子宫内膜、前列腺、胃），乳腺导管上皮，肾远曲小管，胰腺导管，结肠表面上皮，支气管呼吸道纤毛柱状上皮–肝细胞，甲状腺滤泡，平滑肌和唾腺腺泡细胞弱阳性。•肿瘤细胞：–B细胞性白血病（+）：B细胞慢性淋巴细胞性白血病，毛细胞白血病–B细胞淋巴瘤：滤泡中心细胞淋巴瘤，特别是大裂和大无裂强（+）免疫母细胞型也（+）–T细胞淋巴瘤（－）–上皮性肿瘤：乳腺、卵巢和结肠腺癌（+）喉鳞癌和睾丸生殖细胞癌局灶（+）膀胱移行细胞癌和胃腺癌弱（+）–间叶性肿瘤：粘液脂肪肉瘤（+）未分化肉瘤（+）（5）CD79α(mb-1)•与CD79β(B29)共同组成B细胞抗原受体•出现于B细胞成熟早期，从前B细胞期到浆细胞期，为细胞间成分。•用于识别B细胞种系。•前B细胞性急性白血病，B细胞株，B细胞淋巴瘤以及一些骨髓瘤阳性。•粒细胞或T细胞株以及T细胞瘤阴性。（6）BLA36•36kD糖蛋白•正常细胞：–见于早期和活化B细胞，但静止和周围B细胞阴性。–大多数小无裂和大无裂细胞及免疫母细胞膜强阳性。–少数小裂细胞阳性，–巨噬细胞阴性。–30%套区淋巴细胞膜弱阳性。–滤泡间区散在中等到大淋巴细胞和免疫母细胞膜强阳性。–T细胞、粒细胞和巨噬细胞阴性，但正常肝的枯否氏细胞不同程度阳性。•肿瘤细胞：–霍奇金淋巴瘤的R-S细胞和霍奇金细胞阳性。–一些反应性和恶性B淋巴细胞阳性。3.B细胞亚型抗原（1）CD10（CALLA，急性淋巴母细胞性白血病共同抗原）•100kD糖蛋白•主要用于儿童白血病和B细胞淋巴瘤：–表达于淋巴母细胞性，Burkitt和滤泡型淋巴瘤及慢性粒细胞型白血病•也见于肾小球上皮细胞、近端肾小管刷状缘、乳腺肌上皮细胞、胆小管、中性粒细胞、小群骨髓细胞、胚胎小肠上皮和正常纤维母细胞。（2）CD21•C3d受体，145kD糖蛋白•也具有Epstein-Barr病毒受体的功能•冰冻切片：–B细胞中等（＋）–滤泡树突状细胞（FDC）强（＋）•石蜡切片：–B细胞弱（＋）~（－）–FDC强（＋）•正常和增生淋巴结及扁桃体：–生发中心可见FDC＋网状结构，致密，清晰。–滤泡套区FDC＋网状结构疏松，不清晰。•非霍奇金淋巴瘤：–滤泡型淋巴瘤（cb/cc淋巴瘤）：FDC＋网状结构呈结节型，致密，清晰。–一些弥漫型淋巴瘤（中心细胞性淋巴瘤）：FDC＋网状结构大小不一，疏松，不清晰。–前B细胞淋巴瘤（淋巴母细胞性淋巴瘤），Burkitt淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞白血病FDC－。–T细胞淋巴瘤FDC＋限于外周T细胞淋巴瘤的血管免疫母细胞性淋巴结病（AILD）型和一些多形T细胞淋巴瘤。与B细胞淋巴瘤不同，T细胞淋巴瘤和AILD的FDC网仅含少量B细胞。–T淋巴母细胞性淋巴瘤、T-CLL和蕈样霉菌病FDC－。–霍奇金淋巴瘤：仅结节型淋巴细胞为主型FDC＋。FDC＋网状结构致密，清晰，几乎占据整个增大的滤泡。（3）CD23•正常细胞：–套区B细胞（＋）–滤泡树突状细胞亚型（＋）•肿瘤：–小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病（＋）–套细胞淋巴瘤（－）（4）CD35•C3b受体，单链糖蛋白，220kD•正常组织：冰冻切片：–人B细胞滤泡中大部分强阳性细胞为滤泡树突状细胞（FDC），套细胞阳性较弱。–肾小球上皮细胞C3b受体强阳性–巨噬细胞和组织细胞不同程度阳性•石蜡切片（蛋白酶消化后）：–FDC强阳性，滤泡中心和套区的FDC网状结构明显，前者致密，清晰；后者疏松，不清晰。•肿瘤细胞：–滤泡型淋巴瘤（cb/cc）：FDC＋网状结构呈结节状，致密，清晰–弥漫型淋巴瘤（多数为cc）：FDC＋网状结构疏松，不清晰–前B细胞淋巴瘤（淋母），Burkitt淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞性白血病FDC－–非霍奇金淋巴瘤，FDC主要限于血管免疫母细胞性淋巴结病型T细胞淋巴瘤（5）CD38•45kD糖蛋白•正常细胞：–浆细胞、单核细胞、早期淋巴样细胞、和活化的T细胞（＋）。•肿瘤：–浆细胞肿瘤（＋）–有些B和T细胞淋巴瘤（＋），特别前驱细胞来源者。（6）VS38c（浆细胞单抗）•64kD胞浆内抗原。•表达于正常和肿瘤性浆细胞。•上皮细胞（尤其鳞状上皮）弱阳性（三）T细胞1.全T抗原（1）CD2•正常细胞：–T细胞（＋）–NK细胞（＋）•肿瘤：–大多数T细胞淋巴瘤和白血病（＋）–少数粒细胞白血病（＋）（2）CD3•16-28kD,5条多肽链组成•抗体与T细胞表达的CD3抗原的胞浆内部分反应。•最早见于早期胸腺细胞–在皮质胸腺细胞明显存在于胞浆–至髓质胸腺细胞出现于T细胞表面•为高度特异T细胞标记，除T细胞外，仅表达于小脑蒲肯野细胞。•正常组织：–表达于胸腺皮质、髓质和周围淋巴组织的T细胞。•肿瘤：–表达于大多数T细胞肿瘤，但高度恶性T细胞淋巴瘤，如大细胞间变性淋巴瘤偶见（－）。–部分恶性组织细胞增生症阳性–有些霍奇金淋巴瘤阳性（3）CD5•表达于多数T细胞淋巴瘤和白血病。•也可表达于一些肿瘤性B细胞，如B-CLL，B-小淋巴细胞性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。•粒细胞和单核细胞阴性。（4）CD7•正常细胞：–大部分T细胞（＋）–NK细胞（＋）•肿瘤：–很多T细胞淋巴瘤和白血病（＋）–一些粒细胞白血病（＋）–淋巴母细胞性肿瘤最佳T细胞标记之一–胸腺后T细胞恶性肿瘤，尤其在MF中常缺失（5）CD43（Leu22）•T细胞和髓系细胞表达的膜/浆抗原•正常和肿瘤性T细胞阳性•正常扁桃体和淋巴结的滤泡间区T细胞强阳性•少数B细胞白血病和淋巴瘤也可表达–通常为小细胞性，如中心细胞性淋巴瘤（6）OPD4•200kD，表达于辅助/诱导T细胞•强阳性：–淋巴结T区淋巴细胞（膜）–扁桃体*分布同CD4阳性细胞•结节病和结核的类上皮细胞弱阳性•抑制/细胞毒T细胞极少阳性•阴性：–非造血细胞–B细胞–单核细胞–粒细胞•肿瘤：–见于50%T细胞淋巴瘤—辅助/诱导表型的外周T细胞淋巴瘤–少数B细胞淋巴瘤阳性（7）CD45RO（UCHL-1）•180kD，出现于T细胞分化早期。•正常细胞：–大多数胸腺细胞（＋）–成熟活化T细胞（＋）–少量静止T细胞（CD4/CD8亚型）（＋）–粒单核细胞系，如粒细胞和单核细胞（＋）–多数正常B细胞和NK细胞（－）•肿瘤细胞：–T细胞淋巴瘤（＋）–极少B细胞淋巴瘤：部分中心母细胞性和免疫母细胞性淋巴瘤胞浆弱（＋）–组织细胞性淋巴瘤弱（＋）•鉴别naiveT细胞和记忆T细胞–CD45RO：记忆T细胞–CD45RA：naiveT细胞2.T细胞亚型抗原（1）CD1A•正常细胞：–皮质胸腺细胞（＋）–郎罕氏细胞（＋）•肿瘤：–很多胸腺T淋巴瘤和白血病（＋）–郎罕氏细胞组织细胞增生症（＋）（2）CD4•55kD，出现于大部分T辅助/诱导细胞。•胸腺皮质：–胸腺细胞复合表达CD4，CD8，T6•胸腺髓质：–胸腺细胞丢失T6，分别表达CD4，CD8。•也见于单核/巨噬细胞•表达T4抗原的肿瘤：–多数皮肤T细胞淋巴瘤，包括蕈样霉菌病–HTLV-I相关成人T细胞白血病/淋巴瘤–部分T细胞急性淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤*在淋巴母细胞性淋巴瘤中，T8抗原也可存在于肿瘤细胞。（3）CD8•33kD，表达于人抑制/细胞毒T细胞•周围淋巴组织中CD8＋T细胞（滤泡间区域）仅占T细胞15-20%•骨髓和胃肠道上皮80%T细胞是CD8＋•大部分皮质胸腺细胞和约30%髓质胸腺细胞CD8＋（四）NK细胞1.CD56（NCAM-1）•神经细胞粘附分子（NCAM）表达于：–大部分神经外胚层源性细胞株，组织和肿瘤（视神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、星形胶质细胞瘤和神经母细胞瘤）–中胚层源性肿瘤：横纹肌肉瘤–NK细胞2.CD57•110kD•表达于7-35%正常外周血淋巴细胞：–NK细胞–CD8＋外周血抑制/细胞毒T细胞•也表达于部分神经组织•粒细胞、血小板、红细胞和胸腺细胞阴性。3.CD16（Leu-11）•正常细胞：–NK细胞–粒细胞•表达于许多NK细胞增生性疾病（五）粒细胞和单核吞噬细胞1.CD11c（Leu-M5）•正常细胞：–表达于粒单核细胞•肿瘤：–毛细胞白血病（＋）–单核细胞样B细胞淋巴瘤（＋）–少数B-SLL/CLL（＋）–少数T细胞淋巴瘤（＋）–一些粒细胞白血病，特别是M4和M5（＋）–郎罕氏细胞组织细胞增生症（＋）2.CD15（Leu-M1）•寡糖•外周血：–中性粒细胞阳性–单核细胞弱阳性–淋巴细胞和血小板阴性•树突网状细胞阳性•单核/巨噬细胞阴性•霍奇金淋巴瘤R-S细胞强表达（除外淋巴细胞为主型，仅小部分阳性）•大部分非霍奇金淋巴瘤阴性。3.α1-AT，α1-ACT，lysozyme•单核细胞/巨噬细胞（+）•粒细胞（+）4.CD68•跨膜糖蛋白，110kD•多种巨噬细胞阳性：包括枯否氏细胞，脾红髓、胃肠道固有层、肺腺泡