QTRAP原理及在PK研究中的应用

AsubsidiaryofXenoBioticLaboratories,Inc.离子源离子源离子源离子源质量分析器质量分析器质量分析器质量分析器检测器检测器检测器检测器数据处理数据处理数据处理数据处理系统系统系统系统四极杆质谱四极杆质谱四极杆质谱四极杆质谱离子阱质谱离子阱质谱离子阱质谱离子阱质谱飞行时间质谱飞行时间质谱飞行时间质谱飞行时间质谱磁质谱磁质谱磁质谱磁质谱……….•分辨率•灵敏度•稳定性API4000QTrap拥有串联四极杆质谱的全部功能拥有串联四极杆质谱的全部功能拥有串联四极杆质谱的全部功能拥有串联四极杆质谱的全部功能复合线性离子阱增强了定性研究功能复合线性离子阱增强了定性研究功能复合线性离子阱增强了定性研究功能复合线性离子阱增强了定性研究功能只允许特定只允许特定只允许特定只允许特定m/z离子通过离子通过离子通过离子通过m1m3m4m2m3m1m4m2massscanningmode（（（（动态分析模式动态分析模式动态分析模式动态分析模式））））更改射频电压让不同更改射频电压让不同更改射频电压让不同更改射频电压让不同m/z离子依次通过离子依次通过离子依次通过离子依次通过1001100610m/z特定特定特定特定m/z离子有效扫描时间离子有效扫描时间离子有效扫描时间离子有效扫描时间0.1%m/z一个扫描周期一个扫描周期一个扫描周期一个扫描周期singlemasstransmissionmodem2m2m2m2m3m1m4m2singlemasstransmissionmode（（（（静态分析模式静态分析模式静态分析模式静态分析模式））））固定射频电压让特定固定射频电压让特定固定射频电压让特定固定射频电压让特定m/z离子通过离子通过离子通过离子通过特定特定特定特定m/z离子有效扫描时间离子有效扫描时间离子有效扫描时间离子有效扫描时间100%Q1Q2Q3•全扫描全扫描全扫描全扫描(Q1/Q3)•全扫描全扫描全扫描全扫描(Q1/Q3)•子离子扫描子离子扫描子离子扫描子离子扫描(ProductIon)•母离子扫描母离子扫描母离子扫描母离子扫描(PrecursorIon)•中性丢失扫描中性丢失扫描中性丢失扫描中性丢失扫描(NeutralLoss)•MRM扫描扫描扫描扫描Q1Q2Q311Q1扫描所有离子Q2，Q3让所有离子通过（RFOnly）从全扫描图谱中寻找可能的代谢产物从全扫描图谱中寻找可能的代谢产物从全扫描图谱中寻找可能的代谢产物从全扫描图谱中寻找可能的代谢产物0.00-79.98SM:7B5010016.7518.1213.0921.585.70大鼠尿液样品大鼠尿液样品大鼠尿液样品大鼠尿液样品总离子流图总离子流图总离子流图总离子流图300400500600700800900ARC(CPM)Sample:G1M48hU,Vial:2,Inj.#1在线放射性图谱在线放射性图谱在线放射性图谱在线放射性图谱050100021.6022.9917.8326.157.6321.58021.585.7021.9364.9173.4761.4233.3955.5343.7421.60Bkg0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.000100200Minm/z331提取离子流图提取离子流图提取离子流图提取离子流图查看同位素峰比例查看同位素峰比例查看同位素峰比例查看同位素峰比例F:+cESIQ1MS[80.000-1200.000]708090100331.09[12C-M+H]+300310320330340350360370380390m/z010203040506070RelativeAbundance333.08321.09335.02328.16316.13302.11390.19362.16346.19374.19[14C-M+H]+Q1Q2Q314Q1筛选母离子Q2中击碎母离子Q3扫描子离子获得碎片离子信息获得碎片离子信息获得碎片离子信息获得碎片离子信息，，，，用于结构鉴定用于结构鉴定用于结构鉴定用于结构鉴定Q0Q1Q2Q32030405060708090100RelativeAbundance168.09285.14226.14210.18183.16242.21253.07331.05208.26m/z331子离子扫描图子离子扫描图子离子扫描图子离子扫描图15160180200220240260280300320340m/z010331.05208.26270.01298.96198.05331_333#109-115RT:3.68-3.81AV:3SB:210.01,10.01NL:1.42E4F:+cESIFullms2333.000[150.000-350.000]160180200220240260280300320340m/z0102030405060708090100RelativeAbundance226.24209.98287.15333.08182.99168.33254.96272.09242.06200.05300.79m/z333子离子扫描图子离子扫描图子离子扫描图子离子扫描图ONO2NOONO2m/z270/272*NNO2m/z226NOOONO2OHH+M2(MH+331/333Da)NOm/z285/287NOONO2OH+m/z299/301NONO2+m/z253/255****NNO2m/z210Q1Q2Q3Q1扫描所有离子各离子在Q2中击碎Q3固定扫描某一特定子离子代谢研究应用举例代谢研究应用举例代谢研究应用举例代谢研究应用举例：：：：搜寻二相代谢产物搜寻二相代谢产物搜寻二相代谢产物搜寻二相代谢产物，，，，如葡萄糖醛酸结合产物如葡萄糖醛酸结合产物如葡萄糖醛酸结合产物如葡萄糖醛酸结合产物，，，，硫酸结合产物硫酸结合产物硫酸结合产物硫酸结合产物硫酸结合产物硫酸结合产物硫酸结合产物硫酸结合产物4000500060007000800090001000011000120001300014000ARC(CPM)某化合物大鼠体内代谢胆汁样品分析某化合物大鼠体内代谢胆汁样品分析某化合物大鼠体内代谢胆汁样品分析某化合物大鼠体内代谢胆汁样品分析搜寻搜寻搜寻搜寻m/z367.1的母离子的母离子的母离子的母离子在线放射性图谱在线放射性图谱在线放射性图谱在线放射性图谱Bkg0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.0001000200030004000TICof-Prec(367.10):fromSample2(Bile)ofprecursor_scan.wiff(TurboSpray),Smoothed,...Max.2.0e5cps.510152025303540455055606570Time,min0.02.0e44.0e46.0e48.0e41.0e51.2e51.4e51.6e51.8e52.0e5Intensity,cps15.5323.0716.5824.05母离子扫描图母离子扫描图母离子扫描图母离子扫描图-Prec(367.10):15.427to15.880minfromSample2(Bil...Max.1.2e5cps.300350400450500550600650700750800m/z,Da0.002.00e44.00e46.00e48.00e41.00e51.15e5Intensity,cps719.5543.6648.8-Prec(367.10):22.982to23.183minfromSample2(Bi...Max.6038.8cps.6000543.7300350400450500550600650700750800m/z,Da0100020003000400050006000Intensity,cps-Prec(367.10):24.020to24.540minfromSample2(Bi...Max.1751.1cps.300350400450500550600650700750800m/z,Da0500100015001751Intensity,cps543.4Q1Q2Q3Q1扫描所有离子各离子在Q2中击碎Q3扫描某一特定子离子（与Q1扫描的离子同时变化）应用举例应用举例应用举例应用举例：：：：搜寻二相代谢产物搜寻二相代谢产物搜寻二相代谢产物搜寻二相代谢产物搜寻衍生化反应的产物搜寻衍生化反应的产物搜寻衍生化反应的产物搜寻衍生化反应的产物搜寻衍生化反应的产物搜寻衍生化反应的产物搜寻衍生化反应的产物搜寻衍生化反应的产物如乙酰化反应如乙酰化反应如乙酰化反应如乙酰化反应、、、、氰基加成反应氰基加成反应氰基加成反应氰基加成反应406080100120140160180200220240260280300ARC(CPM)在线放射性图谱在线放射性图谱在线放射性图谱在线放射性图谱Nefazodone(10μM)与与与与[14C]KCN在肝微粒体中共同孵育在肝微粒体中共同孵育在肝微粒体中共同孵育在肝微粒体中共同孵育0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0002040MinTICof+NL(27.00):Exp1,fromSample1(RS9-PC-CN)of13661N004M001.wiff(TurboSpray...Max.2.4e7cps.51015202530354045505560Time,min0.02.0e64.0e66.0e68.0e61.0e71.2e71.4e71.6e71.8e72.0e72.2e72.4e7Intensity,cps41.1134.9015.139.78XICof+MRM(15pairs):527.1/500.1DaID:CM1fromSample1(RS9-PC-CN)of13661N006...Max.3.4e4cps.中性丢失中性丢失中性丢失中性丢失27Da离子扫描离子扫描离子扫描离子扫描Q0Q1Q2Q3Q1Q2Q3Q1筛选母筛选母筛选母筛选母离子离子离子离子母离子在母离子在母离子在母离子在Q2中击碎中击碎中击碎中击碎Q3扫描选定子离子扫描选定子离子扫描选定子离子扫描选定子离子灵敏度高灵敏度高灵敏度高灵敏度高、、、、选择性高选择性高选择性高选择性高、、、、定量分析准确定量分析准确定量分析准确定量分析准确应用举例应用举例应用举例应用举例：：：：代谢产物定量研究代谢产物定量研究代谢产物定量研究代谢产物定量研究代谢产物定量研究代谢产物定量研究代谢产物定量研究代谢产物定量研究搜寻不同基质中的代谢产物搜寻不同基质中的代谢产物搜寻不同基质中的代谢产物搜寻不同基质中的代谢产物应用举例应用举例应用举例应用举例：：：：体外代谢体外代谢体外代谢体外代谢(肝细胞孵育肝细胞孵育肝细胞孵育肝细胞孵育)中鉴定了代谢产物中鉴定了代谢产物中鉴定了代谢产物中鉴定了代谢产物M3’体外代谢体外代谢体外代谢体外代谢(肝细胞孵育肝细胞孵育肝细胞孵育肝细胞孵育)中鉴定了代谢产物中鉴定了代谢产物中鉴定了代谢产物中鉴定了代谢产物M3’大鼠体内代谢产物鉴定中未发现大鼠体内代谢产物鉴定中未发现大鼠体内代谢产物鉴定中未发现大鼠体内代谢产物鉴定中未发现如何解释如何解释如何解释如何解释？？？？•应用举例应用举例应用举例应用举例180020002200ARC(CPM)大鼠血浆样品大鼠血浆样品大鼠血浆样品大鼠血浆样品放射性代谢谱图放射性代谢谱图放射性代谢谱图放射性代谢谱图各主要代谢产物均已鉴定各主要代谢产物均已鉴定各主要代谢产物均已鉴定各主要代谢产物均已鉴定0.0010.0020.0030.0