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临床检验分析前质量控制演讲者:主要内容1、概念3、标本采集4、标本保存与运送5、注意的问题2、患者准备质量控制(QualityControl)实验前(分析前)实验中(分析中)实验后(分析后)国内外均有报道,实验误差中60~70%来自实验前(分析前)检验:有效地控制所有影响检验报告质量的要素,确保检验质量。一、概念:广义:为达到规范或规定对数据质量要求而采取的作业技术和措施。分析前时间概念分析前阶段又称检验前过程ISO15189:2007《医学实验室—质量和能力的专用要求》始于:来自临床医师的申请,包括检验要求、患者准备、原始样本采集、运送到实验室并在实验室内部的传递终于:检验分析过程开始时结束。1.一般需在安静状态下采集标本。剧烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高。二、患者准备:1状态2.症状明显期检查:如肝炎病毒携带者肝功能查。3.情绪:患者对采集标本时的恐惧、紧张,有时造成标本采集的失败。有研究指出,患者处于激动、兴奋、恐惧状态时,可使血红蛋白、白细胞增高。4.劳累或受冷、热空气剌激,往往可见白细胞的增高。2饮食多数试验要求在采血前禁食12h(1)高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,(2)高比例不饱脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。(3)含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。(4)食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。烟酒的影响不容忽视•酒精可使GLU降低,使TG、(GGT)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-Ch)升高。•抽烟可使儿茶酚胺、胃泌素、皮质醇、生长激素、碳氧血红蛋白、血小板压积、癌胚抗原升高;使免疫球蛋白降低。部分血液成分昼夜生理变化3昼夜生理变化3女性不同的生理周期性激素的变化很大病人准备还应考虑病人的生物钟规律,特别是激素水平分析,同一天不同时间变化很大。固定时间采集标本:•门诊:上午8-10点空腹采血•住院:上午6-8点空腹采血4药物药物对检验的影响非常复杂,在采样检查之前,应暂停各种药物为宜.如果药物不能停用,必须向临床医生讲明,并在申请单上注明,供临床医生和实验室参考。1.一些药物造成检验结果的变动,作为为治疗监测之用;如:甲亢治疗中的甲状腺激素检测。2.观察药物具有毒副作用,如:抗肿瘤药物治疗时WBC、肝肾功能检测观察药物的毒副作用。3.有些药物可能干扰试验。如:利福平、痢特灵导致尿的颜色改变维生素C对部分检验结果的影晌5体位例如由卧位改为站位,血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、T-ch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。一般门诊统一为坐位,住院统一为卧位。醛固酮、高血压采血要求写上立位还是站位卧位!溶血脂血黄疸的影响溶血标本对检测结果的影晌1.被分析物分布非均一性。2.血清或血浆中水分被取代,有时可达10%左右。3.对吸光度的干扰。4.物理化学机制的干扰。如标本中的脂蛋白可整合亲脂成分,降低与抗体的结合,并影响电泳和层析。脂血的影响55556用不符合质量要求的标本进行检验,不如不进行这项检验三、标本的正确采集:1.必须满足检测结果正确性的各项要求。2.检测结果必须能真实、客观地反映患者当前病情。送检标本的质量的两个基本原则标本的正确采集应注意的基本问题1.最佳采样时间的选择1)最佳选择早上空腹•能减少患者昼夜节律带来的影响。•减少患者由于运动带来的影响。•减少饮食的影响。•参考区间通常是根据正常健康人空腹血标本测定值确定的2)检出阳性率最高的时间3)对诊断最有价值的时间2.采取具代表性的标本•大使检查应取黏液、血液部分;•痰液检查应防止唾液混入;•末梢血采取应防止组织液的混入;•骨髓穿刺、脑脊液穿刺应防止外伤性血液的渗入:•输液的患者输液完毕至少1h后方可采取血液标本送检。•静脉采由时患者应取坐位,•止血带使用1min内采血,回血后立即松开。3.采取最合乎要求的标本(I)抗凝剂、防腐剂的使用正确(2)防溶血、防污染。(3)容器洁净度或无菌程度:如24h或12h尿中某些成分分析应加防腐剂,细菌培养的容器绝对不能有防腐剂;微量元素测时定对容器洁净度的要求更高(4)防止过失性的采样:如采错部位、用错真空采血管(5)防止边输液边采血4.唯一性标志我公司是12位条码贴标本与申请单,与标本对应的申请单上应有如下内容:•送检科别及病床号。•患者姓名及病历号。•送检标本名称。•检查项目。•采集标本的时间。特别注意不能将标本与申请单的条码张冠李戴5.努力做好患者的配合工作1)向患者说明作该项检验的目的及注意事项;2)避免饮食、药物等的影响;3)由患者自己留取标本,要告之留取方法、注意事项。1血液标本静脉血(暗红):绝大多数检测动脉血(鲜红):血气分析、乳酸、丙酮酸末梢血:三分类血常规1.血液标本类型2.常用采血管黑帽:测血沉(0.4ML枸橼酸钠+1.6ML静脉血;魏氏法)蓝帽:凝血因子检测(0.24ML枸橼酸钠+1.8ML静脉血)紫帽(EDTA-K2):测血细胞分析,血型等绿帽(肝素锂):急诊生化,全血黏度等黄帽(促凝管,带分离胶):所有须用血清测定的实验红帽(无任何抗凝剂的普通管):常规生化和免疫,但少用13.静脉血采集方法、注意事项1)止血带或压脉器:不超过60秒;不用太紧;2)采血时间与部位:清晨空腹;6点-8点;3)避免溶血、杂质污染;4)标本采集后须立即送检;5)采血不顺,换位重采;6)血培养标本应先注射厌氧瓶,尽量减少接触空气时间;7)微量元素测定采集标本专用采血管。血液标本14.临床化学/免疫检验标本1)采血量视检查项目多少不同而异,通常为4.0~5.0ml;2)立即上下颠倒混合3~5次,2h内将全血处理为血清或血浆,减少溶血。血液标本15.红细胞沉降率(血沉,ESR)检测标本1)单独采1管血,准备采血至2ml刻度线(抗凝剂:全血=1:4);2)采血后立即上下颠倒混合5~10次;3)采血后应尽快送检(必须2h内检测)。血液标本16.血常规(全血细胞分析)检验标本一般紫帽管(EDTA):1)采血后立即上下颠倒混匀,3~5次.不可用力震荡;2)应按抗凝管刻度采血至2ml,可不用空腹;3)采血后应尽快送检(需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定,因为超过2小时WBC形态会发生改变);4)血型与血常规、网织红细胞可用同一管真空血。血液标本17.75克葡萄糖耐量试验(OGTT)/胰岛素释放试验/C-肽释放试验1)病人准备:影响试验的药物(如:咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在3日前停用,试验前病人应10~16小时不进食。2)标本采集:临床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服75克葡萄糖,再于给糖后0.5、1、2、3小时各采血2ml/1次(共5次)。3)标本保存:采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采血,于2~8℃保存运送。血液标本11)标本采集:专用抗凝管采血,静脉取血4~5ml,上下颠倒5次,分离血浆,将血浆装入专用血浆管后低温送检。如不能立即送检,需尽快冰冻保存(-15℃)。溶血标本不能检测!2)注意事项:a.注明抽血时的体位;b.饮食情况(普食饮食、低钠饮食);c.标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到影响。血液标本8.高血压三项(肾素、血管紧张素I、II)11)病人准备:留样前应停服利尿剂至少3周,停服抗高血压药物1周;2)标本采集:肝素抗凝,采集后立即分离血浆,置-20℃保存待测;尿液标本则留取24小时尿量,用10~15mL浓盐酸防腐;3)申请单上注明:a.抽血时的体位(卧位、立位);b.饮食情况(普食饮食、低钠饮食);c.尿液标本要准确记录24小时尿量。血液标本9.醛固酮110.皮质醇促肾上腺皮质激素等标本采集及注意事项正常人皮质醇促肾上腺皮质激素的分泌存在昼夜节律,一般为早上8点或下午4点采血,送检时请务必在申请单上注明采血时间。血液标本111.微量元素检测标本采集要求:血液标本1)不接受头发标本!2)血液标本的采集要求:a.采血时不能戴乳胶手套(对锌有污染),可使用“PE”(塑料)手套(或不戴手套把手洗干净)。b.橡皮塞对锌有污染,故普通采血管不可使用,建议使用本中心提供的专用管。112.出凝血检测标本1.患者应处于平静和空腹状态;2.“一针见血”,以防止组织损伤,外源性凝血因子进入试管;3.不用三通管取血;4.真空采血技术:I.采血足量II.第一管血可以用于血生化等其它检验,第二管用于血栓和止血实验。血液标本2尿液(1)晨尿:住院病人可尿常规检验;(2)随机尿:门诊就诊病人的留尿检验方法;(3)餐后尿(进餐后2h):筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病;(4)计时尿:肌酐清除率、淀粉酶排出率;(5)24h尿:尿蛋白等化学组分的测定,亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。1.尿液标本的分类尿液原则上以不用防腐剂为好,如需12h或24h尿,首选以冷藏为妥常用防腐剂:加40%甲醛1滴于尿液30ml中,适用于细胞及管型等有形成分的检查;激素检验常以盐酸10ml作为24h尿的防腐剂或硼酸1g加于尿液100ml,麝香草酚0.1g加于尿100ml供抗酸杆菌浓集检查。2尿液2.尿液标本保存尿液标本必须新鲜,并按要求留取。从排出到检测应在2h内完成送检标本时要置于有盖容器内,以免尿液蒸发影响检测结果。常规检验留取中段尿送检。23.注意事项尿液不应留取尿壶或便盆中的粪便标本不应该从卫生纸或衣裤、纸尿裤等物品上留取标本,不能用棉签有棉絮端挑取标本。3粪便标本1.采集注意事项:4脑脊液、浆膜腔液、关节液1.均由临床医师穿刺采样,及时送送检(否则可出现细胞变性,标本凝集,细菌溶解)。2.送检标本量:a.理学检查(不加抗凝剂)、化学检查(肝素)、细胞学检查(EDTA)各留取2ml;b.细菌学检查用无菌管采集标本,厌氧茵培养留取1ml;c.结核菌检查留取10ml。5微生物标本1.尿液标本采集和处理:1)中段尿采集法:用肥皂水或1:1000高锰酸钾水溶液清洗尿道口和外阴部,再用灭菌或无菌生理盐水冲洗,收集中段尿5~10ml盛于带盖的无菌容器内送检。2)导尿法:用导尿管导取10~15ml尿液,置灭菌容器中送检;长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿;留置导尿时,用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口,用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检(不可采集尿液收集袋中的尿液送检);3)集尿法:怀疑结核分枝杆菌感染时,于清洁容器中留取24h尿液,取其沉渣10~15ml送检。2.粪便标本采集和处理:1)采集时间:①腹泻患者于急性期,尽量在用药前采集粪便;②伤寒患者于发病2w以后采集粪便;③怀疑霍乱时立即采集粪便送检。5微生物标本2.粪便标本采集和处理:2)采集方法:①自然排便法:取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分,2~3g或1~2ml,盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检;若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH8.6)。②直肠拭子法:难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法,将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约4~5cm(幼儿2~3cm),轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面粘液后取出,盛于无菌试管中或保存液中送检。5微生物标本3.痰及下呼吸道标本采集和处理:①晨痰为佳;②先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿;③再用力咳出呼吸道深部的痰,吐至无菌容器中;④痰量不得少于1ml;⑤痰咳出困难时可先雾化吸入NaCl溶液(100g/L,加温到45℃)使痰容易咳出。查结核分枝杆菌,应留取24小时痰。5微生物标本4.血液及骨髓培养标本:5微生物标本体温上升阶段采血可提高阳性率,对不能停用抗生素者,在下次用药前采血。成人采血5-10ml,婴幼儿采血1-5ml。将采集的血液注入血培养基前,应更换针头或过火消毒针头。接种后血培养瓶应在避光室温中保存,不必置冰箱保存。4.血液及骨髓培养标本:注意事项:1).应严格按照无菌操作,避免杂菌污染。2).一般病人在发病初期1~2天或发热高峰时采集血液标本,3).对亚急性细菌性心内膜炎等病人,应从肘动脉或股动脉采血为宜。5微生物
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