全自动血细胞分析仪的临床应用

第二章全自动血细胞分析仪的临床应用临床医学院诊断教研室徐慕韩第二章全自动血细胞分析仪的临床应用血细胞分析仪又称血液自动分析仪AHA血细胞自动计数仪ABCC血细胞分析仪操作简便、自动进行、测量迅速、精密度高、并可以获得在显微镜下无法得到的数据。第二章全自动血细胞分析仪的临床应用第一节全自动血细胞分析仪的简述1全自动血细胞分析仪的种类2全自动血细胞分析仪的类型3全自动血细胞分析仪的原理4三种全自动血细胞分析仪的仪器第一节全自动血细胞分析仪的简述1全自动血细胞分析仪的种类（1）根据自动程度分为二类全自动血细胞分析仪直接使用抗凝血进行检测半自动血细胞分析仪须事先稀释血液标本再进行检测第一节全自动血细胞分析仪的简述1全自动血细胞分析仪的种类（2）根据WBC分群分为三类二分类血细胞分析仪三分类血细胞分析仪五分类血细胞分析仪第一节全自动血细胞分析仪的简述白细胞二分类仪器白细胞三分类仪器白细胞五分类仪器第一代：五分类第二代：半自动网红和不规则分类、全自动网红和分类第三代：有核红、血小板新方法、幼稚白细胞模块式自动化五分类仪器+推/染片机+读片机单机自动化：筛选第一节全自动血细胞分析仪的简述2全自动血细胞分析仪的类型一、体积（Volume）分析型，用经典的Culter原理电阻法，测定血细胞体积大小分型。二、高频传导（Conductivity），即细胞对电磁波（又称射频RadiofrequencyRA）的传导性测定其细胞大小及结构，如核大小、核、浆密度、核/浆比。三、散射（Scatter），在不同角度测细胞表面结构、颗粒对光线的散射情况第一节全自动血细胞分析仪的简述3全自动血细胞分析仪的原理（1）电阻抗法（库尔特原理）根据血细胞非传导的性质，以电解质溶液悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化，进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定。脉冲的大小代表了通过微孔血细胞的体积大小。脉冲的数量代表了通过微孔血细胞的数量。第一节全自动血细胞分析仪的简述第二节全自动血细胞分析仪的检测项目第一节全自动血细胞分析仪的简述2．半导体激光器流式细胞术方法血液标本被吸取，稀释至一定比率并被染色，当这些细胞和微粒穿过极小的通道时，通过流式细胞术来对它们进行分析。半导体激光术光电二极管接受到前向散射光和侧向散射光，光电倍增管接受荧光信号，光信号转换为变脉冲，从而获得了血细胞的信息。检测原理半导体激光器(=633nm)流动室双色分光镜光电倍增管（荧光信号）光电倍增管（侧向散射光信号）光电二极管（前向散射光信号）第一节全自动血细胞分析仪的简述3．血红蛋白测定取氧化高铁血红蛋白法和氧合血红蛋白法两种方法的优点。不使用有毒物质，是一种适合自动化的方法。第一节全自动血细胞分析仪的简述4三种全自动血细胞分析仪的仪器1三分类血细胞分析仪（电阻抗法库尔特原理）美国JT-IR2五分类血细胞分析仪（组化染色+射频+数字流式细胞技术）法国MS9-53五分类血细胞分析仪（同上+半导体激光）日本XT-1800i第一节全自动血细胞分析仪的简述1美国JT-IR三分类血细胞分析仪（电阻抗法）的报告单第一节全自动血细胞分析仪的简述法国MS9-5五分类血细胞分析仪报告单第一节全自动血细胞分析仪的简述日本XT-1800i五分类血细胞分析仪报告单XT-1800i全自动血液分析仪2003年全新上市第二章全自动血细胞分析仪的临床应用第二节全自动血细胞分析仪的检测项目第二节全自动血细胞分析仪的检测项目1检测项目2正常参考范围3直方图4逆方图5散点图第二节全自动血细胞分析仪的检测项目（一）检测项目和正常参考范围1g=103mg=106ug=109ng=1012pg=1015fg=1018ag1L=103ml=106ul=109nl=1012pl=1015fl=1018al．第二节全自动血细胞分析仪的检测项目（一）检测项目和正常参考范围（1）白细胞1．WBC白细胞计数10^9/L4-102．Lym%淋巴细胞比例%20-403．Mon%单核细胞比例%0-104．N/Gr%中性粒细胞比例%50-705．Lym#淋巴细胞计数10^9/L1.5-4.06．Mon#单核细胞计数10^9/L0-0.457．N/Gr#中性粒细胞计数10^9/L2-7．第二节全自动血细胞分析仪的检测项目（一）检测项目和正常参考范围（1）白细胞8Eos%嗜酸细胞比例%0-59Bas%嗜厂细胞比例%0-110Oth%其他细胞比例%11Eos#嗜酸细胞计数10^9/L0-0.4512Bas#嗜碱细胞计数10^9/L0-0.2第二节全自动血细胞分析仪的检测项目（一）检测项目和正常参考范围（2）红细胞1RBC红细胞计数（男）10^12/L4-5.5（女）10^12/L3.5-5.02HGB血红蛋白浓度（男）g/L120-165（女）g/L110-1503HCT红细胞压积（男）%42-52（女）%37-504MCV平均红细胞体积fL80-1005MCH红细胞平均血红蛋白含量Pg27-356MCHC红细胞平均血红蛋白浓度g/L320-360第二节全自动血细胞分析仪的检测项目（一）检测项目和正常参考范围（2）红细胞7RDW红细胞分布宽度%11.5-14.88RDWSD红细胞分布宽度标准差fL39-469RDWCV红细胞分布宽度变异系数%6-15.410URBC小红细胞比例%0-811MPBC大红细胞比例%0-8第二节全自动血细胞分析仪的检测项目（一）检测项目和正常参考范围（3）血小板1PLT血小板计数10^9/L100-3002MPV血小板平均体积fL6-133PCT血小板压积（男）%10.8-27.2（女）%11.4-28.24PDW血小板发布宽度%15.8-18.15UPLT小血小板比例%0-86MPLT大血小板比例%0-8第二节全自动血细胞分析仪的检测项目RDWRDW-SDRDW-CV的关系三分类：RDW红细胞分布宽度五分类：RDW–SD红细胞分布宽度标准差RDW-CV红细胞分布宽度变异系数第二节全自动血细胞分析仪的检测项目第二节全自动血细胞分析仪的检测项目RDW是从红细胞直方图中计算得出的。本图是一个正常的红细胞直方图图中阴影以外的部分在计算RDW时被剔除，这是为了排除分布于图形左侧的血小板凝块、大血小板或电子背景的干扰；排除分布于图形右侧的红细胞二聚体、三聚体、或多聚体的干扰。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目RDW红细胞分布宽度第二节全自动血细胞分析仪的检测项目RDW的意义运用RDW能进一步描述细胞的同质性或者是异质性。即细胞在体积上的变异程度，或称为大小不均程度。同质的细胞群体几乎没有什么大小不均现象。而异质的细胞群体则有明显的大小不均。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目第二节全自动血细胞分析仪的检测项目RDW的意义第二节全自动血细胞分析仪的检测项目RDW的意义1用于缺铁性贫血和β—轻型地中海贫血的鉴别，缺铁性贫血RDW增高。β—轻型地中海贫血正常。2用于铁缺性贫血的早期诊断。正常人：MCV89±4fl，RDW12.7±0.7fl隐性缺铁前期：MCV89±4fl，RDW13.2±0.7fl隐性缺铁期：MCV86±6fl，RDW14.0±1.5flIDA：MCV79fl，RDW15.6±1.7fl3用于贫血的形态分类（共分六类）第二节全自动血细胞分析仪的检测项目RDW/MCV对贫血的分类MCV偏小MCV正常MCV偏大RDW正常均一小细胞性均一正细胞性均一大细胞性RDW偏大不均一小细胞性不均一正细胞性不均一大细胞性第二节全自动血细胞分析仪的检测项目（三）直方图定义：运用Coulter原理，可以测量细胞的大小和数量。设定以细胞体积为横坐标，以各通道中细胞的相对数量为纵坐标，在二维平面上把某一种细胞在一个个很小的体积范围（2fl）内的数量分布情况表述出来，就构成了该种细胞分布的直方图。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目直方图的作用1．用以监测仪器分析结果的可靠性。2．反映结果误差的潜在原因。3．提供推理性和假设性诊断的图形依据。4．为检验人员，临床医生提供可供分析的直观信息。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目第二节全自动血细胞分析仪的检测项目库尔特原理实际上就是通过测量悬浮在导电稀释剂中的各个颗粒在通过一个小孔时所引起的电阻变化量，来了解颗粒的数量和大小。细胞的稀释剂悬液被驱使经过小孔，小孔两侧有一对浸没在稀释剂中的电极，它们通过稀释剂构成电路。每个细胞通过小孔时会在电路中引起瞬间的电阻变化。电阻脉冲数量代表细胞的数量，脉冲的高度反映细胞的体积。根据脉冲的高度（细胞的体积）归类。并显示在直方图上。X轴表示体积，以费升为单位，Y轴表示脉冲的相对频度。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目1WBC直方图：典型的WBC直方图，体积分布曲线的显示范围为35-450flWBC最小分析单位1.64fl(450/256=1.76fl/通道)，三群体区域分别为Lym35-90fl,Mid90-160fl,GRAN160-450fl,30-35fl一段是为监察异常颗粒或细胞碎片而设置。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目WBC的直方图分类原理实质是细胞化学一体积分类。WBC在直方图上反映出来的大小，不是其原态的情况，而是细胞经特定的Lyse化学作用，发生失水皱缩后的体积情况。此时细胞的大小由核和胞质颗粒的结构大小决定。比较突出的是Lyse导致中性粒细胞群与大单个核细胞群发生体积倒置现象。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目第二节全自动血细胞分析仪的检测项目1．淋巴细胞群（LY）特征：最左边又高又陡的峰，跨越35-90FL包含细胞：成熟的淋巴细胞，异形的淋巴细胞，不典型的淋巴细胞。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目2．大单核细胞群（Mo）特征：在两个峰之间的平台地带，有时看上去似两个峰之间的“谷”从90-160FL以上包含细胞：单核细胞原母细胞早幼粒细胞中幼粒细胞幼稚淋巴细胞幼稚单核细胞浆细胞第二节全自动血细胞分析仪的检测项目3．粒细胞群（GR）特征：从160FL开始最远跨越到450FL。包含细胞：晚幼粒细胞嗜碱细胞嗜酸细胞带状粒细胞分叶中性粒细胞第二节全自动血细胞分析仪的检测项目除了白细胞三个主要亚群外，如果另有不成熟细胞或其他细胞异常出现，由于他的体积不可能与三类主要细胞任何一个亚群重迭的很好，通常会导致在直方图某个细胞分布区和它的边缘区域异常隆起。异常细胞的数值被机械地计入某一个或二个（取决与它是否跨越分界线）主要细胞群的数值中，从参数上，我们只能看到LY，Mo，GR的读数，其实这已经是一个数值的假象了。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目提示符为了有效地察觉异常细胞，仪器在白细胞直方图上三个细胞分布区的交界处，设置了四个岗哨R1——35fL处R2——90fL处R3——160fL处R4——450fL处第二节全自动血细胞分析仪的检测项目提示符任务：1R1-R4是监督四个交界处曲线异常隆起及报警。2当有异常细胞出现时，直方图上任何一个区域（合交界处）曲线升高，都会招到相应位置的Rx报警，并标在参数后面。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目提示符意义R11提示白细胞直方图上，淋巴峰左侧区域有异常2可能有血小板凝块，巨大血小板，有核红细胞，不溶性红细胞，冷凝集素，疟原虫，寄生虫，异形淋巴细胞，镰状红细胞等因素的影响第二节全自动血细胞分析仪的检测项目R2：1提示白细胞直方图上，淋巴和单核区之间的区域有异常2可能有变异的淋巴细胞，异型淋巴细胞，异常淋巴细胞，幼稚淋巴细胞，原始细胞，浆细胞，毛细胞、嗜酸细胞或嗜碱细胞等因素的影响。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目R3：1提示白细胞直方图上，单核区和中性粒细胞峰之间的区域有异常。2可能有不成熟粒细胞，异常细胞，嗜酸细胞等因素影响。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目R41提示白细胞直方图上，中性粒细胞右侧区域有异常2由粒细胞数量过多所致。第二节全自动血细胞分析仪的检测项目Rm2个或2个以上RX同时报警，则以RM报告表示第二节全自动血细胞分析仪的检测项目2RBC直方图：典型RBC直方图体积分布曲线的显示范围为24-36