ISO15189分析中质量控制

ISO15189实验室认可准则---介绍15189：2007文件5.5-5.6部分报告人：付红伟医大总医院医学检验科2013.05.285.技术要求5.1人员5.2设施和环境条件5.3实验室的设备5.4检验前程序5.5检验程序5.6检验程序的质量保证5.7检验后程序5.8结果报告25.5检验程序--5.5.1实验室应当制定符合实验室工作要求和检验要求的检验程序，包括选择和分取样品程序。权威教科书、期刊发表的检验程序，或国际、国内及地区性指南，是首选检验程序。如果采用实验室内部程序，必须对其预期应用进行适当验证并完全文件化。要点：检验程序的要求3只有经过验证确认适合预期应用的检验程序，实验室才能采用。验证应当涵盖所有应用范围的要求。实验室应当记录验证结果和采用的程序。在应用于医学检验之前，选择的检验方法和程序应当经过验证并得到满意的验证结果。实验室主任或其指定人员应当对检验程序进行最初的和定期的审核。审核通常每年进行一次。审核应当记录。理解要点：检验程序的确认，临床验证，定期评审45.5检验程序--5.5.25.5检验程序--5.5.3所有程序应当采用实验室人员能够普遍理解的语种文件化且置放在工作区域以方便相关人员使用。卡片式文件或类似的概述关键信息的系统，允许作为一种在工作台面使用的快速参考资料，但是需有完整的手册作为参考。卡片式文件或类似系统应当与完整手册相符合。作业程序应当全部或部分以制造商的使用说明书为基础，但是，说明书需要符合5.5.1和5.5.2；且采用实验室人员能够普遍理解的语言编写的实验室操作程序。任何改动都需要进行审核并记录。检验试剂盒的每一个涉及主要试剂或作业程序的新改变，都应当对其性能和是否适用预期用途进行验证。55.5检验程序--5.5.3具体文件内容-1除了文件控制识别外，作业程序文件应当包括以下内容：检验目的；检验程序的原理；性能指标（如线性、精密度、以测量不确定度表示的准确度、检测极限、测量区间、测量可靠性、敏感性和特异性等）；标本种类（如血浆、血清、尿液）；容器与添加物；所需的仪器和试剂；校正程序（测量的可追溯性）；程序步骤；65.5检验程序--5.5.3具体文件内容-2质量控制程序；干扰（例如脂血、溶血、高胆红素血）和交叉反应；计算结果的原理，包括测量不确定度；生物参考区间；患者检验结果的可报告区间；警戒值／临界值；实验室的结果解释；安全防护；潜在的误差来源。7试剂性能指标评价准确度验证精密度验证线性范围验证参考范围制定干扰实验验证8准确度验证—回收实验准确度评估资料是评价检测系统有效性的重要依据。定量检测方法的回收实验是评估准确度的方法之一，用于评估定量检测方法准确测定加入纯分析物的能力，结果用回收率表示。910斤苹果2斤苹果10回收实验具体步骤回收实验数据处理及结果报告11实例分析-112基础样本基础样本+C.fas基础样本+高值质控项目第一次第二次第三次均值第一次第二次第三次均值第一次第二次第三次均值TP68706868.6773737373.0073727573.33ALB42444242.6747474546.3346464746.33GLO26262626.0026262826.6727262827.00ALT18191818.3328282828.0030313130.67AST21212020.6732323131.6737363636.33ALP102103102102.33125125126125.33124123125124.00GGT16171716.6727272827.3340414140.67LDH155156156155.67183181182182.00184185186185.00测定浓度加入浓度回收浓度回收率基本样本分析样本1分析样本2•样本制备：基本样本：自制基质血清0.9mL+超纯净水0.1mL分析样本1：自制基质血清0.9mL+C.FAS定标液0.1mL分析样本2：自制基质血清0.9mL+高值指控血清0.1mL•分别对上述三种样本连续测定三次求均值，并将数值填入下述表格13生化分析仪准确度验证试验项目：血糖GLU单位：mmol/L验证方法：回收实验仪器Roche7600试剂批号658081标准液批号161454操作者付红伟审核者王倩测定浓度加入浓度回收浓度回收率%基础样本4.67分析样本15.971.111.30117.12分析样本26.231.501.56104.00平均回收率%110.56比例系统误差%10.56TEa/25%可接受性判断：比例系统误差大于CLIA88允许总误差的1/2日期：2012-08-06生化分析仪准确度验证试验项目：谷丙转氨酶ALT单位：U/L验证方法：回收实验仪器Roche7600试剂批号660856标准液批号161454操作者付红伟审核者王倩测定浓度加入浓度回收浓度回收率%基础样本18.33分析样本1288.679.67111.53分析样本230.6711.712.34105.47平均回收率%108.50比例系统误差%8.50TEa/210%可接受性判断：比例系统误差小于CLIA88允许总误差的1/2验证日期：2012-08-06结果报告精密度验证—参考EP5-A文件批内精密度评估对低值质控血清同一天内连续测定20次，排除离散点后求其均值、SD及CV值与试剂说明书比较，看与试剂盒标注的批内精密度是否一致；14项目第1次第2次第3次-----第19次第20次均值标准差SD95%置信区间CV%厂商声称CV%结论TP666666-----656666.100.790.590.991.190.50精密度欠佳ALB485050-----494950.101.170.871.462.330.90精密度欠佳ALT414141-----403940.600.820.621.032.022.90精密度良好AST686968-----696967.900.790.590.991.162.10精密度良好ALP868686-----858686.350.990.741.241.140.70精密度欠佳GGT444444-----434343.150.670.500.841.550.50精密度欠佳LDH165162164-----163162162.601.230.921.540.761.30精密度良好TBIL23.520.220.6-----20.420.420.590.730.550.923.573.10精密度良好DBIL14.414.214.6-----1414.214.190.380.290.482.700.85精密度欠佳批间精密度验证15方法：参考EP5-A文件，对质控血清连续测定5日，每日测定2批次，每批次重复测定8次，得到80个数据，排除离散点后，求其均值、SD及CV值与试剂说明书比较，看与试剂盒标注的批间精密度是否一致；项目日期/批次批1-1批1-2批1-8批2-1批2-2批2-7批2-8均值标准差SD95%置信区间CV%厂商声明CV%结论ALT第一天4142404040414240.730.810.611.011.993.7精密度良好第二天41414042404139第三天40404042404041第四天42414140414142第五天41414041404241项目日期/批次批1-1批1-2批1-8批2-1批2-2批2-7批2-8均值标准差SD95%置信区间CV%厂商声明CV%结论AST第一天6463656564646466.461.811.362.262.723.2精密度良好第二天68696767686967第三天68676868676668第四天65656564636564第五天68696868676668项目日期/批次批1-1批1-2批1-8批2-1批2-2批2-7批2-8均值标准差SD95%置信区间CV%厂商声明CV%结论ALP第一天8888888888878787.341.050.791.321.210.5精密度欠佳第二天86868888878786第三天85858888888786第四天88878889888787第五天85868887878988线性范围验证---参考EP6-A16样本号123456低值血清mL1.000.800.600.400.200.00高值血清mL0.000.200.400.600.801.00实例分析-117方法：参考EP6-A文件要求，选取高浓度和低浓度人血清标本，通过倍比稀释的方式得到6份梯度浓度待测样本，每样本重复测定4次，进行该项目的线性范围评估项目总胆固醇TC日期2010/8/7仪器Roche7600试剂批号标准液批号操作者付红伟审核者王倩标本号测定1测定2测定3测定4均值19.179.039.069.109.0928.027.957.978.007.9936.456.656.506.606.5545.445.275.315.415.3654.034.044.033.984.0262.502.462.472.492.480.002.004.006.008.0010.0001234567结论：本实验室TC检测系统在常用医学决定水平区间内具有很好的线性，与试剂盒声明相符。5.5检验程序--5.5.4检验中的每一个步骤的性能指标，应当与该作业程序的预期用途相关。理解要点：性能参数应满足和符合所规定的要求为前提185.5检验程序--5.5.5生物参考区间应当定期审核。如果实验室有理由相信某个特定的生物参考区间不再适合参考人群，应当进行调查研究，如果需要的话，采取纠正措施。当实验室改变检验程序或检验前程序时，适当时，同样应当审核生物参考区间。理解要点：必须验证；必须定期审核195.5检验程序--5.5.6实验室应当提供现有检验项目清单，包括相关的性能指标，以供申请检验者索取。理解要点：检验程序文件可供服务对象使用（知情权）205.5检验程序--5.5.7如果实验室计划改变某个检验程序，其结果或结果解释可能明显不同，在引入改变之前，应当以书面方式向申请检验者解释含义。理解要点：书面告知；解释其含义215.6检验程序的质量保证–5.6.1实验室应当设计内部质量控制系统，以确认达到预期的检验结果质量。重要的是，质量控制系统向实验室人员提供清楚、易懂的信息，作为技术和医学决定的基础。理解要点：实验室应建立内部质量控制体系225.6检验程序的质量保证–5.6.2实验室应确定检验结果的不确定度。应当考虑测量不确定度的重要影响因素，如标本采集、标本制备、标本分部收集、校准、参考品、加样量、仪器使用、环境条件、标本条件以及操作者更换等。理解要点：建立不确定度评价的程序文件尝试进行关键项目的不确定度评价235.6检验程序的质量保证–5.6.3实验室应当设计并执行测量系统校准计划和可信度验证计划，以确保检验结果可以追溯到SI单位，或以一个自然常数或其他规定的标准作为参考。如果以上都无法实现，应当采用其他方法验证可信度，包括但不限于以下方法：参加适当的室间比对计划；使用适当的、已被证明指示物质特性的参考品；以其他程序检查或校准；采用比率法或相互测量法采用相关专业制定、规定、证明的、一致认可的标准或方法；当可追溯性由供应商或制造商提供时，将试剂、程序或检验系统相关的可追溯性声明文件化。242526275.6检验程序的质量保证–5.6.4实验室应当参加室间质量比对。实验室管理层应当监控外部质量评价的结果，当质量控制标准没有实现时，应当参加纠正措施的实施。室间比对计划应当真正符合ISO/IECGuide43-1要求。外部质量评价计划应当尽可能地提供模拟患者标本的临床相关的质控物，具有验证整个检验过程（包括检验前和检验后程序）的效果。理解要点：实验室应参加室间质评285.6检验程序的质量保证–5.6.5如果不能参加正式的室间质量比对计划，实验室应当建立确定（而非评估）检验程序可接受性的