AlexaFluor系列染料

AlexaFluor系列染料AlexaFluor系列染料――可见光谱的最佳染料，AlexaFluor是荧光标记试剂的一大突破，包括一系列近紫外、可见光和近红外光谱的优良染料，这些试剂产生的偶联物无一例外是实验检测过最好和最亮的，在蓝光和远红光范围提供了多色检测和FRET（荧光共振能量转移）的多种选择。和R－PE或APC联用的Tandem染料扩展了AlexaFluor在多色检测的应用。AlexaFluor的优点如下：亮度—AlexaFluor偶联物相比其他染料荧光更强。光稳定性—AlexaFluor偶联物相比其他染料光稳定性更强，提供更长的图像捕获时间。仪器兼容性—AlexaFluor偶联物的吸收光谱与普通激发光源的主要输出波长相匹配。多种颜色—AlexaFluor偶联物有蓝色到红色的多种直接荧光.pH值不敏感—AlexaFluor染料在一个广泛的pH范围内保持强荧光.水溶性—AlexaFluor反应性染料有良好的水溶性,无需有机试剂即可结合蛋白,且储存不易产生沉淀.AlexaFluor染料的光谱特性:AlexaFluor350—亮蓝和紫外光激发AlexaFluor350的蓝色荧光比AMCA亮50%，而且最大发射波长稍短（为442nm，AMCA为448nm），因此更容易与现有的绿色荧光基团区分。AlexaFluor405—近乎完美的匹配蓝色二极管激光器AlexaFluor405的激发/发射最大波长为402/421nm，与近来使用的荧光显微镜和流式细胞仪405nm谱线的蓝色二极管激光器近乎完美的匹配。AlexaFluor405琥珀酰酯是CascadeBlue的氨基反应性衍生物，后者是乙酰叠氮化物。AlexaFluor405琥珀酰酯纯度更高且有一个4-哌啶羧酸的间隔，使得荧光基团与其偶联的生物分子之间的反应性最小化。�AlexaFluor430—高斯托克斯频移的430nm吸收少数400nm~450nm吸收的染料在水溶液中可测荧光偏离500nm。AlexaFluor430弥补了这一缺陷，430nm激发时发射在540nm附近。AlexaFluor488—最好的绿色荧光基团，AlexaFluor488偶联蛋白优于其他荧光素，实验证明比包括Cy2的其他绿色荧光基团都好。不仅亮度更高，而且光稳定性更好。在pH4～10保持稳定是另一优越之处。AlexaFluor532—最适于532nm激发光源的染料激发发射波长位于绿色荧光AlexaFluor488和橙色荧光的AlexaFluor546之间，适用于双频Nd:YAG激光器在内的532nm激发光源。�AlexaFluor546—Cy3和四甲基罗丹明的替代物AlexaFluor546标记的偶联物良好应用于橙色范围光谱，比四甲基罗丹明(TRITC、TAMRA)及Cy3荧光更强，容易被汞弧灯激发，发射波长546nm。AlexaFluor555—优于Cy3的替代物AlexaFluor555与Cy3偶联物的光谱相匹配，因此适用于Cy3的滤光器。AlexaFluor555的总荧光更强，且光稳定性更好，为研究者提供了更长的图像捕获时间。AlexaFluor568—最适于568nm激发光源AlexaFluor568的橙红色荧光最适用于激光共聚焦显微镜的Ar–Kr混合气体激光器，其发射的谱线为568nm。与具有相似最大激发/发射波长的LissamineRhodamineB和RhodamineRed-X相比，AlexaFluor568的偶联物亮度更高。�AlexaFluor594—优于TexasRed的替代品AlexaFluor594偶联物发出红色光，可与绿色荧光探针一同用于多色标记实验。比TexasRed偶联物有更高的亮度。AlexaFluor610—AlexaFluor最好的红色染料AlexaFluor610亮度高、光稳定，可用检测TexasRed和AlexaFluor594的光学元件检测。前身是FRET-basedAlexaFluor–phycobiliprotein的受体染料。新的AlexaFluor610激发/发射波长为612/628nm，容易与绿色荧光基团相区分，适用于多色标记。AlexaFluor610仍为人眼可见，优于AlexaFluor633和其他更长波长的荧光团。�AlexaFluor633—光稳定性更强远红光染料近来大受欢迎，是因为它们的光谱范围在大多数样品的自发荧光之外。He–Ne激光器633nm和红色二极管激光器635nm谱线的广泛应用加速了兼容染料的开发。AlexaFluor633偶联物具有亮度和光稳定性，吸收峰在632nm，发射峰在650nm。�AlexaFluor635—He–Ne激光器633nm线的最佳染料新的AlexaFluor635染料，其偶联物比AlexaFluor633亮度更高，因为它的吸收光谱不会象AlexaFluor633、Cy5和tetramethylrhodamine那样分成两个峰。AlexaFluor635同样适用于He–Ne激光器的633nm谱线和红色二极管激光器的635nm谱线，吸收峰在633nm，发射峰在647nm。�AlexaFluor647—优于Cy5的替代品AlexaFluor647与Cy5偶联物的光谱及滤光器相匹配。AlexaFluor647二抗偶联物的总荧光亮度高于其他公司的Cy5偶联物。在与大多数的蛋白质、寡核苷酸和核酸结合时，AlexaFluor647相比Cy5荧光吸收光谱波动很小，因此在同等程度的替换时发出的荧光更强。�AlexaFluor680—Cy5.5的替代物AlexaFluor680的激发峰在679nm，最大发射为702nm，与Cy5.5类似。AlexaFluor680能够很好的与其他红色荧光团区分，如TexasRed,R-phycoerythrin,AlexaFluor594和AlexaFluor647，是理想的三色与四色标记用染料。�AlexaFluor700—远红光二极管激光器的最适染料AlexaFluor700最大吸收在696nm，能够被675–700nm范围的氙弧灯、远红外二极管激光器或dye-pumpedlasers激发。发射光在红外区，峰值为719nm。�AlexaFluor750—AlexaFluor最长波长的产品AlexaFluor750是目前的AlexaFluor系列产品中波长最长的产品，与Cy7光谱相似。其发射的最大波长为779nm，能够和AlexaFluor647及allophycocyanin(APC)区分，适合多色分析。AlexaFluor700偶联物752nm的最大激发光使其适用于720–750nm范围的氙弧灯或dye-pumpedlasers。