消毒质量现场采样及检测方法

消毒质量现场采样及检测方法谈智采样及检测原则•采样时间：消毒处理后，医疗活动前期间•采样后尽快检测，送检时间≤6小时，若样品保存0—4℃，送检时间≤24h一、空气•器材：9cm普通营养琼脂平板•方法：平板暴露法（沉降法）一般情况：按GB15982-1995医院消毒卫生标准：•布点方法：室内面积≤30m2,设内、中、外对角线三点，内外布点距墙壁1m；室内面积＞30m2，设中央及四角5点，四点的布点位置距墙1m，•暴露时间5min•培养时间：48小时•计算公式：细菌总数（cfu/m3）=50000N/(A×T)•A：平板面积（cm2）T：平板暴露时间N：平均菌落数•检出限：对于≤30m2房间，如果3块平板共长1个菌，则根据公式，计算结果为52.3报＜53cfu/m3•对于＞30m2房间计算结果为31.4，报＜32cfu/m3•对于洁净度要求高的环境，该方法的最低检出限与评价标准不一致•GB15928-1995规定Ⅰ类环境≤10cfu/m3洁净手术室：依据GB50333-2002检测平板沉降方法：沉降时间30min布点要求及沉降菌标准区域等级洁净度布点数标准（cfu/皿）特别洁净手术室手术区百级≥13点≤0.2周边区千级≥5点≤0.4标准洁净手术室手术区千级≥5点≤0.75周边区万级≥2点≤1.5一般洁净手术室手术区万级≥2点≤2周边区十万级≥2点≤4二、物体表面•1、采样液•对于只清洁、未消毒的表面：无菌生理盐水•消毒后的物体表面：根据使用消毒剂选择含相应中和剂的采用液2．采样方法•5cm×5cm标准规格板棉拭采样≥100cm2；•门把手等不规则物体表面：直接涂抹3、中和剂的选择消毒剂中和剂成分0.5%碘伏0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温80消毒剂2000mg/L有效氯0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温8075%乙醇0.5%卵磷脂、0.5%吐温80季铵盐0.5%卵磷脂、0.5%吐温80洗必泰0.5%卵磷脂、0.5%吐温802%戊二醛1%甘氨酸、0.5%吐温804、检测•细菌总数：取1ml接种平皿•金黄色葡萄菌：1ml接种5mlSCDLP液体培养基，36±1℃培养24h，血平板分离•乙型溶血性链球菌：样品1ml接种1%葡萄糖肉汤•沙门氏菌：按照GB4789.41ml加入增菌液中四、工作人员手•1．采样液：•无菌生理盐水适合只清洁，未用消毒剂的情况•含相应中和剂的采样液适用于消毒后采样2．采样方法•被检人员五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子，在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2）并随之转动采样棉拭，剪去操作者手接触部位，将棉拭投入采样液五．使用中消毒液•1．采样时间：更换前，使用中的消毒液•2．需要检测微生物污染情况的：采样液：含相应中和剂的营养肉汤，采样方法：取1.0ml消毒液加入9.0ml含中和剂的营养肉汤•3．需要测定含量：另取干净、干燥的采样瓶直接取样•采样量＞100ml要求采样量满足检测需要。六、内窥镜•采样依据：内镜清洗消毒技术规范•方法检测部位：内镜的内腔面用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集，及时送检，2小时内检测•检测：•菌落计数：充分振荡，取0.5ml接种2个平皿后倾注营养琼脂，35℃培养48h后计数•致病菌：0.2ml接种血平板0.2ml接种中国兰平板0.2ml接种SS平板涂布35℃培养48h观察有无致病菌生长七．污水•1、检测依据：GB18466-2005医疗机构水污染排放标准•2、检测项目余氯的检测：现场用干净空瓶采样，直接用余氯测试盒检测余氯粪大肠菌群沙门氏菌志贺氏菌的检测：采样：污水采样加入含1g硫代硫酸钠的灭菌瓶中，根据GB18466-2005检测八．灭菌器•1、压力蒸汽灭菌器灭菌效果：嗜热脂肪杆菌芽孢培养温度：56±1℃•a.检测方法：下排气式压力蒸汽灭菌器、预真空和脉动真空灭菌器，生物指示剂置于标准包中心部位，标准包置于排气口上方。•b.手提压力蒸汽灭菌器用通气储物盒代替标准包，盒内盛满中试管，生物指示剂放于中心部位放于中心部位两只灭菌试管内，储物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部•2、环氧乙烷灭菌器灭菌：枯草杆菌黑色变种芽孢生物指示管均匀分布灭菌物品中。36±1℃培养•3、干热灭菌器：枯草杆菌黑色变种芽孢九．紫外线辐照强度•1．器材：紫外辐照计•2．检测方法：开灯5min后，探头放在灯管中心距高1m处检测•3．注意事项：仪器定期检定，在检定期内使用每次使用时需要仪器调零个人防护：眼罩、口罩、帽子、防止紫外线灼伤。谢谢