生物安全(2013)

临床实验室生物安全陆家海教授公共卫生学院[e-mail]•2002年11月19日,《健康报》在头版报道,北京市某医院的某临床护士在捆扎病房污物口袋时,左手食指被1支用于艾滋病病人的输液针刺破。•早在19世纪中期，医院流行病学之父塞麦尔韦斯就发现一位参加尸解实验的同学在尸解时刺破了手，所感染的病菌与当时引起产褥热的病菌相同。发生于美国密执安州立大学布氏杆菌病实验室的一起布氏杆菌泄露事件，共感染了45人，死亡1人。医务人员HBV感染率比普通人高10倍，全世界3500万医务人员，每年300万人发生职业暴露，7万人感染HBV1967年德国马尔堡；马尔堡病毒（31人感染，1/4死亡）1976年刚果埃博拉河，埃博拉病毒（全世界1100感染，793人死亡）生物安全事件outline总论一临床实验室生物安全管理措施二血液及代替品的生物安全三一、总论•凡是为预防、诊断、治疗任何人类疾病或损伤、或者评价人类健康而对人体的物质进行生物、微生物、血清化学、血液、生物物理、细胞或者其他类型检验的部门，统称为临床实验室。•2004年北京再度发现SARS病例，WHO驻中国代表处发言人沃雷·罗迪亚在谈及这次被定性为“重大责任事故”的SARS病毒实验室感染时说，人为的错误有好几种，比如，实验室本身的条件、实验室里的粗心、实验室里的管理不善等等。不过，无论怎么样，无论在哪里，实验室总会发生一些错误。•临床实验室每天要处理来自临床的标本，如血液、穿刺液、分泌物等，对这些“未知疾病标本”无法知其危险程度，因此，每个临床实验室每天都面临生物安全隐患。临床实验室危害源危害源生物源危害化学源危害物理源危害细菌病毒真菌寄生虫易燃性、腐蚀性、有毒性、强酸性化学品等电器设备、辐射、噪声等•细菌（bacteria）结核杆菌Mycobacteriumtuberculosis.Rod-shapedBacterium白喉杆菌Corynebacteriumdiphtheriae.Rod,clubed-shapedBacterium(causesdiphtheria)•病毒（viruses）狂犬病病毒RabiesDNA肿瘤病毒DNAtumorviruses脊髓灰质炎病毒polio•Harrington和Shannon在1976年的调查中发现，结核分枝杆菌、乙型肝炎病毒与志贺菌已成为英国临床实验室工作人员最为常见的职业性感染原因。•我国某传染病医院30年结核病发病人数占全院职工的10.8%。其中：医师占31.48%、护士53.70%、医技人员占11.1%、机关后勤人员占3.70%.临床实验室生物污染的原因和种类对空气的污染对水的污染对物体表面的污染实验室排出及扩散出的空气是重要原因之一医院污水操作不当或感染性物质的溢出造成地面、仪器等的污染实验室工作人员在实验过程中受到实验室生物污染而发生的感染。实验室感染3起严重的实验室SARS病毒感染事件追述２００３年９月９日，新加坡一名患者被确诊感染了非典病毒。这名２７岁的新加坡华人男子是新加坡国立大学专门研究西尼罗病毒的微生物实验室的一名研究生。由１１名专家组成的国际调查小组认为，不恰当的实验程序、以及西尼罗病毒样本与SARS冠状病毒在实验室里的交叉感染，可能是这名患者感染非典病毒的原因。新加坡的实验室SARS感染事件中国大陆的实验室感染事件•2004年4月安徽、北京先后发现新的SARS病例，经证实分别来自于在中国疾病预防控制所实验室受到SARS感染的两名工作人员•中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所腹泻病毒室跨专业从事非典病毒研究，采用未经论证和效果验证的非典病毒灭活方法，在不符合防护要求的普通实验室内操作非典感染材料，发现人员健康异常情况未及时上报。中国台湾地区实验室感染事件•2003年12月一名台湾的SARS研究人员在实验室感染SARS病毒。台湾这名感染非典的詹姓研究人员工作的台湾“国防预防医学研究所”属台湾军方研究单位，位于台北县三峡，设立在山洞中，以两层阻绝设施与外界隔离。这所实验室拥有全台最顶尖的实验设备，实验室等级列为P4，是台湾唯一的“第四级生物安全实验室”，超过“卫生署疾病管制局”及“台大医院”等P3等级的实验室，被誉为台湾生化资源重镇。在亚洲仅有日本拥有同等级的生物实验室，目前，全球有8个P4实验室在运行，均在发达国家和地区。•直接原因是由于研究人员詹姓中校在实验室内未能遵守规章，因操作疏忽而感染SARS。此外，根据世界卫生组织的调查，台湾SARS实验室的一个主要问题是人手不足，科研人员常常单独工作，提高了发生意外和错误被忽视的风险。•“詹中校条款”的制定：实验室双人操作，研究人员不可兼做工友和清洁职员等实验室感染的途径•空气传播：接种环、吸管、注射器使用时•经口传播•直接接种：针刺、划伤等•黏膜接触：如HIV能通过眼结膜进入人体•节肢动物媒介临床实验室安全管理•硬件管理实验室设备个人防护设备一级防护二级防护•软件管理：包括组织机构、管理制度、操作规程、人员素质等。管理责任•实验室管理层对所有员工和实验室来访者的安全负责，实验室负责人应制定规定和程序，以确保实验室符合国家有关安全要求，并定期检查、维护、更新。实验室标准操作程序（SOP）•根据实验对象、生物危害程度评估、研究内容和设备设施等特点，对涉及的任何危险以及如何在风险最小的情况下开展工作的详细作业指导书。实验室人员培训制度•持证上岗•新工作人员经过培训通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作1个月，才能获得上岗证。•所有人员每年至少要接受一次新的培训•建立并保存人员培训和考核记录档案实验室设施设备监测、检测和维护制度•特别关注高效过滤器、高压灭菌器的检查、维护和更新•生物安全柜检测•高压灭菌器定期检测灭菌效果安全记录职业性疾病、伤害和不利事件记录危害评估记录危险标识危险废弃物记录事件、伤害、事故和职业性疾病的报告实验室分区•清洁区(工作区)：包括办公室、休息室、培养基室等•半污染区（防护区）：包括缓冲间、更衣室和卫生通道等•污染区（核心工作间）：包括样本收集区、处理区、培养区和废弃物处理区等实验室的出口和通道必须保持畅通无阻，不准堆放物品、垃圾、装置或设备。出口通路临床实验室工作人员安全的一般要求•食物不能存放在血液或其他有潜在传染性的材料存放处，应禁止在实验室工作区内吸烟•工作区内应禁止化妆（手霜除外）和处理隐形眼镜•不应佩戴戒指，耳环，腕表和手镯等•利器，包括用过的针头不应折断、重新戴套或被动戴套。•应鼓励所有实验室工作人员接受免疫以预防其可能被接触的生物体感染。•丢弃的利器应立即放入耐扎容器中•所有离心机应该有封闭的盖子，旋转时不能掀开•禁止使用口吸吸液•所有样本和废弃物应假定含有活性病原体，应以安全方式处理。•所有进行涡流搅拌的样本应置于有盖容器内•标本应以确保承运人员、公众和接收实验室的安全的方式运送，并遵守法规要求（危险物品运输法规）二、临床实验室生物安全管理措施临床实验室理化安全准则临床实验室生物安全防护临床实验室废物处理通则•2006年09月25日,西安交大电气绝缘教学楼内的实验室突然发生爆炸并起火，正在实验室的兄弟俩不幸被烧伤，其中一人为西安交大在校博士生。•2008年3月13日晚上，南京东南大学四牌楼校区动力楼发生特大火灾，过火面积达1000多平方米，有30多个房间被烧毁，包括约10个实验室，多年收藏的学术资料也遭到毁坏。电气设备安全准则•连线：仪器连线必须使用带有接地的三根线的护套线，不可使用普通的塑料绞线。严禁私拉乱扯。•接地：仪器应有良好的接地，提高仪器的稳定性及安全系数。•检查：如遇线路老化或损坏应及时地更换。•触电：断电或绝缘脱离急救防火•隐患的估计和研究•易燃易爆物•火源隐患（电、火、气、试剂）1.加热进行蒸馏实验和消化样品时应使用加热套和封闭式电炉，不应使用明火加热。安全使用酒精灯。2.明火在使用易燃气体和易燃试剂的实验室内不得使用明火。灭火•学会使用灭火器（一拔、二握、三瞄、四扫）。•易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用干粉灭火器灭火。•导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火。•切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。•衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，切忌外跑。化学危险物品使用安全准则•所有化学危险品的容器都应有清晰标记，实验室管理人员有责任向工作人员介绍化学危险物品，应有材料安全数据表显示每一种化学危险物品的特性。•清华才女朱令离奇铊中毒•复旦大学中毒研究生不治身亡典型事故•2010年9月9日，据香港明报报道，香港科技大学一间实验室9日发生有毒化学品泄漏事件，一名职员打开实验室内储存柜时，发现柜内一樽一公升已稀释丙烯醛出现液体泄漏及冒出浓烈刺鼻气味，职员吸入气体不适要送院治理。气体•直立放置时要稳妥；气瓶要远离热源；避免曝晒和强烈振动；•一般实验室内存放气瓶量不得超过两瓶。•氢气瓶和氧气瓶不能同存一处。1.珠海市斗门遵义医学院第五附属医院120救护车司机错将胃管接入氧气瓶老人七窍流血而死。2.错将氮气当氧气，放在手术室•2009年3月12日，德国汉堡BernhardNocht热带医学研究所的一名女科学家，因被含有埃博拉病毒的注射器刺到，被怀疑已经感染埃博拉病毒，虽然被注射器刺到，但因为进入体内的病毒量较小，所以发病的几率并不大。但目前并无被认可的埃博拉病毒治疗方案，而它的致死率则高达90%。临床实验室生物安全防护•实验室生物安全防护（biosafetycontainmentforlaboratories）是指实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、个体防护装置、严格遵守标准化操作程序和规程确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染。病原微生物危险度分级WHO&通用要求危险度1~4级(渐高)条例危险度一~四类（渐低）危险度1级无或极低的个体和群体危险危险度2级个体危险中等，群体危险低危险度3级个体危险高，群体危险低危险度4级个体和群体危险均高临床检验相关生物危险等级分布020406080100120140160180200病毒细菌真菌寄生虫一级二级三级四级实验室生物危害评估评估应从三个方面予以考量•微生物的致病性和流行性•实验室环境及实验室操作的特殊性•实验室工作人员的免疫状态•在对相对信息了解较少时进行危险度评估时，应谨慎地采取一些较为保守的标本处理方法。在临床实验室，标本取自患者，处理此类标本时最低需要二级生物安全水平。实验室生物安全防护水平•根据使用的一级和二级防护屏障的不同，实验室生物安全防护水平（biosafetylevel,BSL）分为四级。•按防护水平由低到高排列即：一级生物安全水平（BSL-1）二级生物安全水平（BSL-2）三级生物安全水平（BSL-3）四级生物安全水平（BSL-4）•一级生物安全防护（BSL-1）实验室如用于教学的普通微生物实验室等，适用于非常熟悉的致病因子，在开放的实验台上开展工作。•二级生物安全防护（BSL-2）实验室实验人员接受过致病因子处理的培训，进行实验时，限制进入。某些可能产生传染性气溶胶的过程，应在生物安全柜中或其他物理安全设备中进行。用于主要通过呼吸途径使人感染上严重的甚至是可导致生命危害的致病微生物及其毒素。三级生物安全防护（BSL-3）实验室•2008年9月2日，中国合格评定国家认可委员会（CNAS）对中山大学生物安全三级实验室下达了认可决定通知书，并颁发实验室认可证书，该实验室正式成为卫生系统在华南地区获批准的第一家生物安全三级实验室。中山大学生物安全三级实验室于2005年6月开始筹建，挂靠在中山医学院，位于北校区微生物楼八楼。适用于对人体具有高度危险性的、通过气溶胶途径传播或传播途径不明的、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。目前世界上最先进的高危病毒实验室———让．梅里厄P4实验室。四级生物安全防护（BSL-4）实验室你知道吗？•科研人员进入四级生物安全防护（BSL-4）实验室，必须换上特制的正压防护服