3.2体外受精和早期胚胎培养

3.2体外受精和早期胚胎培养精子的发生卵子的发生受精过程准备阶段受精阶段卵子成熟精子获能穿越透明带穿越放射冠进入卵黄膜雌雄原核形成合子形成早期胚胎发育减数分裂受精卵2细胞4细胞8细胞桑椹胚囊胚原肠胚知识回顾第一个试管婴儿于1978年7月25日在英国的奥尔德姆市医院诞生，她的名字叫路易丝.布朗。路易丝.布朗的母亲梅.布朗因输卵管阻塞而不能生育。首例试管婴儿医生从梅.布朗（时年31岁）体内提取卵子，再取她丈夫（时年38岁）的精液，经处理在体外使卵子受精，受精卵分裂形成16细胞胚后重新植入梅.布朗的子宫内。9个多月后就生下了路易丝.布朗。1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿1992年我国首例三胞胎试管婴儿1982年世界首例试管牛犊问世试管牛（两头小牛）是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。快速繁殖动物优良品种4、目的：3、技术手段：体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。精子卵子受精卵早期胚胎子宫个体1、概念：2、过程：一、试管动物技术体外受精其中包含哪几个关键步骤？1、卵母细胞的采集和培养2、精子的采集和获能3、体外受精胚胎培养4、胚胎的早期培养二、体外受精1.卵母细胞的采集和培养2.精子的收集和获能3.受精采集方法采集部位适宜动物操作卵子可否直接受精超数排卵法用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取卵子小鼠、兔、猪、羊采集的卵子可直接参与体外受精卵巢取卵法大家畜或大型动物，如牛①已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞②借助工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞采集的卵母细胞，要体外人工培养成熟后，才能参与受精输卵管卵巢1.卵母细胞的采集和培养采集方法适宜动物操作假阴道法手握法电刺激法体型小，易控制的家畜，如，猪、犬野生动物或经济动物麻醉动物，用特制电极伸入动物直肠，直接刺激射精中枢神经(腰骶部)无需设备，徒手或戴上橡胶手套，直接把握雄性动物的阴茎，给予适当的压力和刺激采用仿生学方法，模仿发情雌性动物阴道环境，满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度的要求，同时配有活台畜或假台畜体型较大的家畜2.精子的采集和获能（1）.精子的采集获能方法适宜动物培养液啮齿类动物、家兔和猪等人工配制的获能液牛、羊等家畜一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中培养法化学诱导法（2）.精子的获能获能溶液或专用的受精溶液精子和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精（1）环境（2）要求3.受精卵巢卵母细胞新鲜或解冻精液卵母细胞培养精液离心处理精子获能处理MⅡ期卵母细胞受精卵培养获能精子体外受精分离精子和精液培养法化学诱导法获能液/专用受精溶液3.受精受精卵应移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力1.原因2.培养液成分无机盐与有机盐维生素、激素、氨基酸、核苷酸等血清3.胚胎后期操作向受体移植/冷冻保存三、胚胎的早期培养动物胚胎移植时间4.不同动物胚胎移植的时间不同牛、羊等小鼠、家兔等实验动物人桑椹胚或囊胚阶段桑椹胚或囊胚前阶段8－16个细胞阶段三、胚胎的早期培养澳大利亚海福特肉用牛良种荷斯坦奶牛3万～5万A、价格昂贵，资金的限制B、牛生育力低，一生只能生育4-5头5.牛体外受精胚胎工厂化生产采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精早期胚胎培养胚胎移植受体牛（子宫内孕育）良种犊牛成熟期牛采集卵巢中的卵母细胞“试管牛”工厂化生产流程图屠宰加工厂市场有性生殖无性生殖核移植技术、胚胎移植遵循不遵循体外受精胚胎移植试管动物克隆动物生殖方式技术手段遗传物质遗传规律来自2个个体主要来自核供体四、试管动物和克隆动物的比较试管动物技术体外受精早期胚胎培养卵母细胞的采集精子的获取受精：条件：培养液成分：假阴道法手握法电刺激法方法一：用促性腺激素处理，使其超数排卵，从输卵管中冲取卵子方法二：从屠宰母畜卵巢中采集方法三：直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞受精卵在发育培养液中培养无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等获能的精子＋培养成熟的卵子完成受精本节小结1、下列关于体外受精和早期胚胎培养的说法错误的是（）A、在体外受精前，要对精子进行获能处理B、精子和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精作用C、受精卵在受精溶液中进行早期发育D、胚胎发育到适当阶段可进行冷冻保存C受精溶液区分：获能溶液受精溶液发育培养液精子获能受精胚胎的早期培养胚胎移植●○○○○2、根据下图回答卵母细胞①○○○●②③○○○④母体精子①所作的处理为，②是过程，③是，④是。牛卵巢牛卵巢中采卵借助超声波探测仪和内窥镜的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫，同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。从活体卵巢中采集卵母细胞课件制作仙游第一中学黄美洪