检验医学SOP文件5--生化室作业指导书

ISO15189质量管理体系范本文件（第五册）生化室作业指导书文件编号：ABCD-3-SF-01~61第A版编制：审核：批准：生效日期：2015年4月8日ABCD人民医院检验科ABCD人民医院检验科生化室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容目录生效日期：20150408第2页共222页目录序号主题内容代号页号1血清总胆红素测定ABCD-3-SF-0162血清直接胆红素测定ABCD-3-SF-02103血清总蛋白液体双缩脲法测定ABCD-3-SF-03134血清白蛋白溴甲酚绿法测定ABCD-3-SF-04165血清丙氨酸氨基测定ABCD-3-SF-05196血清天门冬氨酸氨基测定ABCD-3-SF-06237血清碱性磷酸酶测定ABCD-3-SF-07278血清α-淀粉酶测定ABCD-3-SF-08319血清葡萄糖己糖激酶法测定ABCD-3-SF-093510血清尿素氮谷氨酸测定ABCD-3-SF-103911血清肌酐苦味酸法测定ABCD-3-SF-114312血清尿酸TBHBA法测定ABCD-3-SF-124613血清总胆固醇酶试剂法测定ABCD-3-SF-135014血清甘油三酯酶试剂法测定ABCD-3-SF-145415血清镁二甲苯胺蓝法测定ABCD-3-SF-155816血清无机磷磷钼酸法测定ABCD-3-SF-166117血清钙偶氮胂Ⅲ法测定ABCD-3-SF-176518血清载脂蛋白A1测定ABCD-3-SF-186819血清载脂蛋白B测定ABCD-3-SF-197220血清高密度脂蛋白胆固醇测定ABCD-3-SF-207621血清低密度脂蛋白胆固醇测定ABCD-3-SF-218022血清肌酸激酶(CK)法测定ABCD-3-SF-228423血清肌酸激酶MB同工酶测定ABCD-3-SF-238824血清乳酸脱氢酶DGKC法测定ABCD-3-SF-2492ABCD人民医院检验科生化室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容目录生效日期：20150408第3页共222页25血清乳酸脱氢酶测定ABCD-3-SF-259626血清a-羟丁酸脱氢酶测定ABCD-3-SF-269927血清总胆汁酸循环酶法测定ABCD-3-SF-2710328OLYMPUS钠、钾、氯离子测定ABCD-3-SF-2810629血清二氧化碳酶试剂法测定ABCD-3-SF-2911230血清糖化蛋白四氮唑蓝法测定ABCD-3-SF-3011531尿液或脑脊液总蛋白测定ABCD-3-SF-3111832血清g-谷氨酰转移酶测定ABCD-3-SF-3212133钾的电极电位法测定ABCD-3-SF-3312434钠离子电极电位法测定ABCD-3-SF-3412735氯的电极电位法测定ABCD-3-SF-3513236钙的比色法测定ABCD-3-SF-3613737血、尿、脑脊液葡萄糖测定ABCD-3-SF-3714238血、尿液尿素氮（BUN）测定ABCD-3-SF-3814739血、尿液肌酐（Cr）测定ABCD-3-SF-3915240血清天门冬氨酸测定ABCD-3-SF-4015741动脉血气电极法测定ABCD-3-SF-4116342血清乳酸脱氢酶速率法测定ABCD-3-SF-4216843血、尿液淀粉酶两点法测定ABCD-3-SF-4317344血清蛋白电泳法检查ABCD-3-SF-4417845高铁血红蛋白还原试验比色法ABCD-3-SF-4518146血清二氧化碳酶反应终点法测定ABCD-3-SF-4618347正常值、病理值复合控制品ABCD-3-SF-4718848载脂蛋白A1、B复合控制品ABCD-3-SF-4819049复合校准品ABCD-3-SF-4919250载脂蛋白A1、载脂蛋白B校准品ABCD-3-SF-50194ABCD人民医院检验科生化室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容目录生效日期：20150408第4页共222页51高、低密度脂蛋白胆固醇校准品ABCD-3-SF-5119652722分光光度计维护规程ABCD-3-SF-5219853血气分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5320154Medical低温冰箱操作维护规程ABCD-3-SF-5420355MEDICA90纯水机操作维护规程ABCD-3-SF-5520556AU1000ISE分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5620757AU1000生化分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5720958电泳仪操作维护规程ABCD-3-SF-5821459干化学分析仪操作维护规程ABCD-3-SF-5921760离心机操作维护规程ABCD-3-SF-60222ABCD人民医院检验科生化室作业指导书文件编号：版本/修订号：A/0主题内容修订页生效日期：20060808第5页共222页修订页序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021ABCD人民医院检验科生化室作业指导书文件编号：ABCD-3-SF-01版本/修订号：A/0主题内容血清总胆红素(T-BIL)测定生效日期：20060808第6页共222页血清总胆红素(T-BIL)测定1.实验原理血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯苯胺重氮盐（DCA），与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。在540/600nm时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。胆红素+DCA红色偶氮化合物表面活性剂2.标本：2.1病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3.标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4.标本运输：常温条件下避光保存运输。5.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6.实验材料6.1试剂：申能总胆红素试剂盒（14108171701试剂1＋试剂2）6.1.1试剂组成试剂1：6×64ml磷酸缓冲液40mmol/L氯化钠9g/L表面活性剂,稳定剂适量试剂2：6×16ml2,4-二氯苯胺重氮盐1mmol/L盐酸30mmol/L表面活性剂适量ABCD人民医院检验科生化室作业指导书文件编号：ABCD-3-SF-01版本/修订号：A/0主题内容血清总胆红素(T-BIL)测定生效日期：20060808第7页共222页6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件。8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件。9.检验结果的判断与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法：以TruCalU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以μmol/L报告。手工测定计算方法为：△Au总胆红素(μmol/L)=×校准液浓度△As12.参考值范围：婴儿：出生24小时内＜150μmol/L出生第2天22-193μmol/L出生第3天12-217μmol/L出生第4～6天1.7-216μmol/L儿童：＞一个月3.4-17μmol/L成年人：1.7-21μmol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实ABCD人民医院检验科生化室作业指导书文件编号：ABCD-3-SF-01版本/修订号：A/0主题内容血清总胆红素(T-BIL)测定生效日期：20060808第8页共222页验室应建立自己的参考值。13.临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使60～70%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14.操作性能14.1线性范围：1.2～513μmol/L14.2精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU1000批内精密度小于3%或SD≤0.07，总精密度小于5%或SD≤0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度n=20x(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)批间精密度n=20x(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)样品115.220.4643.05样品114.880.4082.74样品217.440.4052.32样品219.660.6863.49样品382.600.7850.95样品379.522.2742.8614.3方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对247个样品进行T-BIL检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x-0.00mol/L；r=1.000。14.4灵敏度：本试剂的检测限为1.2μmol/L。14.5病人结果可报告范围：1.2～513μmol/L15.超出范围结果处理：本法线性上限为513μmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16.病危报警值的处理当新生儿血清标本测定结果总胆红素〉340μmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17.方法局限性17.1本法线性上限为513μmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度≤1704μmol/L，血红蛋白浓度≤5.00g/L，甘油ABCD人民医院检验科生化室作业指导书文件编号：ABCD-3-SF-01版本/修订号：A/0主题内容血清总胆红素(T-BIL)测定生效日期：20060808第9页共222页三酯浓度≤22.6mmol/L时没有观察到干扰。18.补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19.参考文献1.ThomasLed.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.192-202.2.To