体外诊断试剂校准品溯源质控品定值及不确定度研究

黄杰非传染病诊断试剂室中国食品药品检定研究院体外诊断试剂标准品溯源、质控品赋值及不确定度研究PPT大量采用了ISO17511（2015草案）和Miller教授培训PPT，也是学习体会标准物质基本概述溯源赋值、不确定度研究题目5报告内容互通性、一致化研究2017年11月1日113个品种2016年11月7日61个品种中检院已发布标准物质参考品研制Ø生化项目：尿素尿酸总蛋白、K、Na、Cl等离子Ø传染性疾病产品评价参考品（HBV、HCV、HIV、HPV等）Ø遗传性疾病产品评价参考品（地贫、耳聋基因突变等）Ø血型检测相关的产品评价参考品（免疫学、分子生物学技术产品）Ø高通量测序技术相关产品评价参考品ü测序仪评价用基因组DNA参考品ü外周血胎儿染色体非整倍体参考品ü胚胎植入前染色体非整倍体参考品ü肿瘤基因突变参考品研制Ø流式细胞技术相关产品评价参考品ü人淋巴细胞参考品Ø激素检测相关的标准品Ø-----2014201520172013C-肽促黄体生成素泌乳素游离前列腺特异性抗原总前列腺特异性抗原NIBSC国际协作标定免疫试剂最多、检测方法最全面，被采纳数据最多标准物质基本概述溯源赋值、不确定度研究题目5报告内容互通性、一致化研究术语和定义计量学溯源性metrologicaltraceability测量结果或标准的值通过连续的比较链与一定的参考标准相联系的属性，参考标准通常是国家或国际标准，比较链中的每一步比较都有给定的不确定度。参考物质referencematerial，RMl具有一种或多种足够均匀和很好地确定了的特性，用以校准测量装置、评价测量方法或给材料赋值的一种材料或物质。校准品calibrator校准物质calibrationmateriall其值在一个校准函数中用作独立变量的参考物质。应具有定值和已知的测量不确定度，其目的应是校准某一测量系统，从而建立此系统测量结果的计量学溯源性。ISO17511(2015草案)PrimaryReferenceMaterial(puresubstance)ReferenceMeasurementProcedure(e.g.Gravimetry)Manufacturer’sProductCalibratorMedicalLaboratoryProcedureManufacturer’sInternalProceduresSecondaryReferenceMaterial(matrix)ReferenceMeasurementProcedure(e.g.IDMS)PureSubstanceCalibratorPatient’sSampleCalibrateAssignvalueAssignvalueCalibrateAssignvalueCalibrateAssignvaluePatient’sResultProceduresforidentityandmassbalanceAssignvalueTRACEABILITYPanelofPatientSamplesISO17511(2015草案)ISO17511(2015草案)与ISO17511(2003)•5.1有原级参考测量程序和原级校准物情况:完整计量学溯源到SI•5.2有一级参考测量程序和一级校准物，计量学溯源到SI的情况计量学溯源SRM913a校准品（-70℃保存）多项生化校准品常规样本SI单位ID/GC/MS法选定方法(AACC1982)厂家常规测量程序用户常规测量程序结果多家参考实验室用户物质校准赋值程序实施不确定度UA项目的量值溯源图参考实验室参考实验室锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品联合赋值单位锂钠钾镁钙氯A离子色谱法离子色谱法离子色谱法离子色谱法离子色谱法离子色谱法B///  同位素稀释电感耦合等离子体质谱法离子色谱法C/离子色谱法离子色谱法离子色谱法离子色谱法/D/原子吸收法原子吸收法原子吸收法原子吸收法/•5.2有原级参考物质和参考测量程序(被测量由参考测量程序定义)并计量学溯源到SI的情况，如HbA1C•5.3有国际约定参考测量程序（非一级）和国际约定校准物，未计量学溯源到SIISO17511(2015草案)与ISO17511(2003)•5.3没有原级校准物,但有参考测量程序(它定义被测量)并计量学溯源到SI的情况•5.4有国际约定参考测量程序（非一级）但无国际约定校准物，未计量学溯源到SI的情况ISO17511(2015草案)与ISO17511(2003)病人样本盘生产商的产品校准品医学实验室程序生产商的内部程序二级参考物质(基质)参考测量程序病人样本赋值校准赋值校准赋值病人结果溯源性酶类,凝血因子•5.4有符合ISO15194国际约定校准物,它定义被测量;无国际约定参考测量程序和原级校准品,未计量学溯源到SI的情况•5.5有国际约定校准物（非一级），但无国际约定参考测量程序，未计量学溯源到SI的情况ISO17511(2015草案)与ISO17511(2003)ISO17511(2015草案)•5.5有国际一致化方案支持的国际约定校准物;无国际约定参考物质和参考测量程序，未计量溯源到SI的情况生产商的产品校准品医学实验室程序生产商内部程序参考物质(基质)病人样本校准赋值校准赋值病人结果溯源性当没有参考测量程序时溯源中止生产商的产品校准品医学实验室程序生产商内部程序参考物质(基质)病人样本校准赋值校准赋值病人结果溯源性必须赋一个值当没有参考测量程序时的赋值ð任意设定的单位,e.g.U/Lð使用一个指定的对比程序ð使用所有程序的截尾均值通过公认的程序赋值是恰当的Ø实际浓度是未知的Ø通过追溯校准值至参考物质的值可以实现协调一致Ø可使用临床指南所有测量程序应可追溯到同一参考物质§若有多家参考物质供应商，非等效性赋值的风险将被分配给参考物质§因此，存在导致临床样本结果不一致的风险通过公认程序赋值的局限性•5.6.被测量只溯源到制造者内部确定/具有的校准物;无原级校准物或参考程序;未计量溯源到SI的情况•5.6有制造商选定的测量程序，但既无国际约定参考测量程序，也无国际约定校准物，未计量学溯源到SI的情况ISO17511(2015草案)与ISO17511(2003)生产商的产品校准品医学实验室程序生产商内部程序参考物质(基质)病人样本校准赋值校准赋值病人结果溯源性必须赋一个值dPCR技术的溯源标准物质基本概述溯源赋值、不确定度研究题目5报告内容互通性、一致化研究常规标准物质制备路线均匀性评价稳定性评价参考物质样本来源细胞细菌标准株血清病毒株基因组DNA片段化DNA模拟微球血浆样本分泌物组织CLSIC37可互换的冷冻人血清池室温下凝结3-4小时§池§过滤§分装§冷冻-70°C个体样本不适用使用剩余临床样本制备参考物质剩余临床样本冷冻的个体样本解冻，混合，溶解，过滤添加分析物添加防腐剂混合，过滤分装并保存冻干或冷冻去除分子修改的C37指南：使用混合血样制备参考物质C37方案添加分析物添加防腐剂混合，过滤分装并保存冻干或冷冻去除分子以血清为基质的参考物质Miller,et.al.ClinChem2011;57:1670-80.离心收集经抗凝的血液冷冻血浆解冻血浆通过添加钙离子和凝血酶转换成血清离心，透析，浓缩恢复血清蛋白基质血清蛋白基质过滤，分装以液体，冰冻状或冻干状态储存添加小分子添加生物分子（人源或非人源）添加防腐剂标准物质的制备生产1#、5#、7#和9#瓶子里为F公司FSH抗原，稀释液中甘露醇浓度分别为1%、2%、5%和10%2#、6#、8#和10#瓶子里为M公司FSH抗原，稀释液中甘露醇浓度分别为1%、2%、5%和10%制备—冻干赋型剂成分配方1（原配方）配方2配方3配方4每L含量蔗糖50g100g50g50g海藻糖//50g/乳糖///50g单克隆抗体类国家标准品赋形剂配方激素类国家标准品赋形剂配方成分配方9（原配方）配方2（10）配方3（11）配方4（12）每L含量人血清白蛋白1g5g1g1g乳糖10g10g20g50g甲酸铵0.63g0.63g0.63g0.63gC-P冻干赋形剂的选择稀释基质配制基质各厂家稀释123去激素人血清，200ng/ml标示3026.0229.9425.741513.0314.9414.487.56.557.537.283.753.433.843.341.8751.802.011.650.93750.951.120.84缓冲稀释液，200ng/ml3026.2823.6123.851512.9111.9712.917.56.566.066.363.753.423.123.141.8751.791.651.630.93750.940.890.8储存条件配制基质对照（-20℃）37℃10d室温4h去激素人血清，200ng/ml标示信号值浓度值信号值浓度值信号值浓度值3021005217039.8222301313550.4620808464638.5221501373343.4221554993943.8421104337940.501514664953516.5714754928016.7514447767916.1514451927416.1514716963316.6714818081216.887.5815170277.66793190237.45823355697.74811537097.63796353417.48796811287.493.75346795243.76355898613.83336746333.68347826833.76355079953.82334023383.661.875123039471.95125713881.98119607081.92128343052.00122935751.95121245491.940.937542117561.0640588371.0441391951.0543106201.0841722661.0641548971.05C-P缓冲稀释液，200ng/ml3019820068932.8820452295736.3218623369127.5720206148434.9220279948535.3319638509031.981514363177515.9813526695814.4812533577812.9014541118516.3313766201214.8912716726513.177.5780300327.33735227006.92643892106.12767422547.21749095547.04642761226.113.75332816363.65314838013.51270842623.17331281663.64310289083.48267666203.151.875118297461.91108539831.8288258881.61115873501.89108226491.8188387971.620.937539319711.0237121960.9929654470.8737635071.0034697890.9528623450.85基本要求CNAS-GL29《标准物质/标准样品定值的一般原则和统计方法》ISOGuide35:2006电解质标准物质联合赋值ü每个项目每次依次分别测定标准物质-质控物质-3个浓度待定值冰冻血清样本。每次每个样本至少测定6个有效数据ü按表14中所列标准判定检测数据是否有效，不符合表14所列要求的无效实验室数据将被剔除，有效的实验室数据进行结果计算ü将验证有效的数据进一步处理：全部实验室每批次数据的均值再取均值作为该定值样本的靶值电解质标准物质联合赋值电解质标准物质联合赋值电解质标准物质联合赋值AFP协作标定结果厂家（简称）效价比安图1.028新产业1.110科华1.033艾康1.060达瑞0.888西门子（Centaur）1.040西门子（IMMULITE）0.831贝克曼1.140罗氏1.102索灵1.118希森美康1.09