HER2的IHC判读和要点分析

HER2诊断判读胃癌、乳腺癌HER2的IHC判读及要点分析NP-BIO-2015.03-039ValidUntil2017.03专业资料，仅供医药卫生专业人士参考•本幻灯片仅以学术交流为目的，内容中可能涉及未在中国批准的临床适应症。处方请参考国家食品药品监督管理总局批准的药品说明书。•Herceptin在中国的适应症为：–转移性乳腺癌：本品适用于HER2过度表达的转移性乳腺癌：作为单一药物治疗已接受过1个或多个化疗方案的转移性乳腺癌；与紫杉醇或者多西他赛联合，用于未接受化疗的转移性乳腺癌患者。–乳腺癌辅助治疗：本品单药适用于接受了手术、含蒽环类抗生素辅助化疗和放疗（如果适用）后的HER2过度表达乳腺癌的辅助治疗。–转移性胃癌：本品联合卡培他滨或5-氟尿嘧啶和顺铂适用于既往未接受过针对转移性疾病治疗的HER2过度表达的转移性胃腺癌或胃食管交界腺癌患者。–曲妥珠单抗只能用于HER2过度表达的转移性胃癌患者，HER2过度表达的定义为使用已验证的检测方法得到的IHC3+或IHC2+/FISH+结果。声明目录BC/GCIHC判读要点分析3-表达特点-判读标准-判读实践免疫组织化学染色简介1BC/GCIHC表达特点及判读标准、判读实践2免疫组织化学定义免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）简称免疫组化，又称免疫细胞化学（immunocytochemistry,ICC），是应用抗原与抗体特异性结合原理，用带显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原（多肽和蛋白质）进行定性、定位、定量测定的技术。彭瑞云.现代实验病理技术.军事医学科学出版社免疫组织化学的发展20世纪50年代仅限于免疫荧光技术，50年代以后逐渐发展建立起高度敏感，且更为实用的免疫酶技术1941年，Coons首先用荧光素标记抗体检测肺组织内的肺炎球菌黏多糖获得成功60年代，Nakane建立酶标抗体技术——铁蛋白标记抗体技术70年代，Stemberger改良上述技术，建立辣根过氧化物酶-抗体过氧化物酶（PAP）技术，使用免疫细胞化学得到广泛应用80年代，Hsu等建立了ABC法亲和素-生物素-过氧化物酶复合物之后，免疫金-银染色法、半抗原标记法、免疫电镜技术相继问世90年代分子杂交技术、原位杂交技术、免疫细胞化学分类方法迅速发展免疫组织化学的特点特异性强敏感性高定位、定性、定量相结合彭瑞云.现代实验病理技术.军事医学科学出版社敏感性高定位、定性、定量相结合特异性强IHC免疫组织化学的定位：国际共识HER2检测法则阳性3+报告为HER2阳性适合曲妥珠单抗治疗阴性0/1+报告为HER2阴性其他治疗方案IHC不确定2+FISHFISH/ISHBilousM,etal.ModPathol2003;16:173–182.WolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.AlbarelloL,etal.AdvAnatPathol2011;18(1):53–59.目录BC/GCIHC表达特点及判读标准、判读实践2-表达特点-判读标准-判读实践免疫组织化学染色简介1BC/GCIHC判读要点分析3胃癌HER2表达的特点肿瘤异质性更加明显HofmannM,histopathol,2008;52:797–8054X3+10X2+20X1+4B5,BenchMark*图片来源:应建明教授图片由F.Penault-Llorca提供，未经允许，不得复制。需要多个胃部活检样本胃癌HER2表达的特点常伴有肠上皮化生/增生粘膜非特异性着色HofmannM,histopathol,2008;52:797–805目录BC/GCIHC表达特点及判读标准、判读实践2-表达特点-判读标准-判读实践免疫组织化学染色简介1BC/GCIHC判读要点分析3手术标本–染色形态活检标本–染色形态分值HER2过表达评估无反应或10%的肿瘤细胞出现细胞膜反应所有细胞均无反应或细胞膜反应0阴性≥10%的肿瘤细胞出现微弱⁄难以察觉的细胞膜反应；细胞的部分细胞膜有反应出现微弱⁄难以察觉的细胞膜反应的肿瘤细胞簇*，无论肿瘤细胞染色百分比1+阴性≥10%的肿瘤细胞出现微弱至中等强度的完整、基底侧或侧膜反应出现微弱至中等强度的完整、基底外侧或侧膜反应的肿瘤细胞簇，无论肿瘤细胞染色百分比2+不确定≥10%的肿瘤细胞中出现高强度的完整、基底外侧或侧膜反应出现高强度的完整、基底外侧或侧膜反应的肿瘤细胞簇*，无论肿瘤细胞染色百分比3+阳性胃癌中的HER2判读标准*对于活检样本而言，没有临界百分比；但需要至少五个阳性细胞的细胞簇《胃癌HER2检测指南》编写组胃癌HER2检测指南中华病理学杂志2011;40(8):553-557修订后的活检样本肿瘤细胞中的细胞膜反应临界值胃癌特异性评分标准并未规定活检样本肿瘤细胞中的细胞膜反应临界百分比这是由于胃癌活检样本中HER2染色的高度异质性如果至少五个细胞簇显示细胞膜HER2染色，则样本的分值应为HER2阳性胃癌活检样本HER2IHC3+染色胃癌HER2检测IHC辅助判读方法胃癌HER2免疫组织化学染色判读辅助方法评分物镜放大倍数当然程度3+2.5X～5X强着色2+10X～20X弱-中等着色1+20X～40X着色隐约可见040X无着色《胃癌HER2检测指南》编写组胃癌HER2检测指南中华病理学杂志2011;40(8):553-557胃癌HER2检测报告内容胃癌HER2免疫组织化学染色检测报告应包括的内容临床信息姓名、性别、年龄、门诊/住院号送检医师和联系方式检测日期标本信息病理号/蜡块号、标本类型、肿瘤部位、标本固定液种类（如不是4%中性缓冲甲醛液应注明）标本离体至固定时间标本固定时间组织学分类型/分级检测信息抗体信息、检测方法、对照设置情况、样本量是否足够用于评估、具有膜着色的肿瘤百分比、着色的异质性、肿瘤细胞染色模式判读结果IHC0、1+、2+、3+或无法判读结果阳性、不确定、阴性或无法判读检测人员技术员、病理医师《胃癌HER2检测指南》编写组胃癌HER2检测指南中华病理学杂志2011;40(8):553-557乳腺癌HER2IHC评分标准（2013ASCO/CAP更新版）分值染色形态IHC0（阴性）无着色，或≤10%的浸润癌细胞呈现弱的、稀少的、不均匀的细胞膜棕黄着色IHC1+（阴性）10%的浸润癌细胞呈现弱的、稀少的、不均匀的细胞膜棕黄着色IHC2+（不确定）10%的浸润癌细胞呈现弱至中等强度、完整但不均匀的细胞膜棕黄着色，或≤10%的浸润癌细胞呈现强且完整的细胞膜棕褐着色IHC3+（阳性）10%的浸润癌细胞呈现强的（低倍镜下可见）、完整的细胞膜棕褐着色Wolff.JCO.2013.50.9984乳腺癌HER2检测指南2014乳腺癌HER2免疫组织化学染色判读标准使用经过验证的IHC方法进行HER2检测(浸润癌)对照染色正确＞10%的浸润癌细胞呈现强、完整、均匀的细胞膜染色＞10%的浸润癌细胞呈现不完整和/或弱至中等强度的细胞膜染色或≤10%的浸润癌细胞呈现强而完整的细腻膜染色＞10%的浸润癌细胞呈现不完整的、微弱的细胞膜染色无染色或≤10%的浸润癌细胞呈现不完整的、微弱的细胞膜染色IHC3+阳性IHC2+不确定IHC1+阴性IHC0阴性NCCN+临床实践指南：乳腺癌（2014.V2）乳腺癌HER2检测报告应包括内容乳腺癌HER2免疫组织化学染色检测报告应包括的内容患者信息姓名、性别、年龄、门诊/住院号送检医师和联系方式检测日期标本信息病理号/蜡块号、标本类型、肿瘤部位、标本固定液种类（如不是4%中性缓冲甲醛液应注明）标本离体至固定时间、标本固定时间抗体信息、使用方法图像分析方法、对照设置情况下样本量是否足够用于评估判读结果IHC0、1+、2+、3+结论阳性、不确定、阴性或无法判读NCCN+临床实践指南：乳腺癌（2014.V2）乳腺癌非特异性染色和IHC3+染色范例目录BC/GCIHC表达特点及判读标准、判读实践2-表达特点-判读标准-判读实践免疫组织化学染色简介1BC/GCIHC判读要点分析3胃癌IHC染色范例：手术标本IHC3+染色范例IHC2+染色范例IHC1+染色范例胃癌IHC染色范例：活检标本IHC3+染色范例（经放大）IHC3+染色范例（经放大）IHC2+染色范例IHC2+染色范例（经放大）乳腺癌IHC染色范例IHC1+染色乳腺癌标本中的IHC染色IHC1+染色乳腺癌标本中的IHC染色乳腺癌标本中的IHC染色IHC2+染色乳腺癌标本中的IHC染色IHC2+染色乳腺癌标本中的IHC染色IHC2+染色乳腺癌标本中的IHC染色IHC3+染色目录BC/GCIHC表达特点及判读标准、判读实践2-表达特点-判读标准-判读实践免疫组织化学染色简介1BC/GCIHC判读要点分析3HER2检测在胃癌和乳腺癌中的不同两者在组织病理学上的不同使得胃癌HER2的阳性判断标准需要修正胃癌组织显示更多的异质性免疫组化染色显示腺管样排列的胃癌肿瘤细胞显示不完全性（仅基底和侧面）膜阳性HofmannM,etal.Histopathology2008;52:797RüschoffJ,etal.Pathologe.2010;31(3):208肠型区域印戒细胞癌区域高度扩增无扩增胃癌组织中的异质性更加显著IHC0IHC1+IHC3+IHC2+乳腺癌胃癌IHC结果判读鉴于乳腺癌、胃癌和胃食管交界癌的组织学和生物学差异，其评分有所不同IHC判读遵循原则梁英杰.临床病理学技术.人民卫生出版社非特异性结果的观察阳性结果定位的观察对照片结果的观察应首先观察阳性对照片和被检测组织内对照的结果是否有相应抗原的正常表达，阴性对照或被检测组织内纤维结缔组织是否没有显色反应。若是：表示染色结果可靠否则反之。•不同的抗原在组织细胞中的定位有所不同•组织周边、刀痕、皱折等部位往往呈阳性反应，但绝大多数都是是非特异性染色，组织内结缔组织也往往呈成片的非特异性染色●IHC染色结果观察遵循原则理想的免疫组化染色结果彭瑞云.现代实验病理技术.军事医学科学出版社理想的免疫组化染色结果背景清晰两者对比鲜明阳性部位明显乳腺癌IHC判读注意事项(1)先在10×物镜下进行判读非常重要。(2)注意细胞膜完全着色的癌细胞比例及着色强度。(3)胞质着色应忽略不计。(4)只评定浸润癌的着色情况。(5)正常乳腺上皮不应着色。(6)建议使用国际公认的ASCO／CAP指南推荐的评分系统HJNCCN+临床实践指南：乳腺癌（2014.V2）IHC:样本排除标准非肿瘤组织内肠上皮化生、再生能力改变（溃疡附近）HER2IHC染色的活检/手术标本排除保存不当的肿瘤组织排除非特异性染色肿瘤组织内边缘不光滑的伪影胞浆、核、仅基底或管腔部分收缩伪影导致的强假管腔染色肿瘤细胞组颗粒（非线性）不明确膜染色IHC:样本排除标准谢谢！