04.PCT测定试剂盒(荧光免疫层析法)工艺规程

文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控1编制人：日期：年月日审核人：日期：年月日批准人：日期：年月日生效日期：年月日颁发部门：质量部颁发份数：2份分发部门：生产部、质量部受控编号：降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）1.产品名称、剂型、注册分类、规格、定义、组成及用途中文名称：降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）规格：25人份/盒、40人份/盒剂型：诊断试剂注册分类：二类6840体外诊断试剂定义、组成及预期用途：本产品采用高度特异性的抗原抗体反应及免疫层析分析技术，通过夹心法检测原理来体外定量测定人血清、血浆样本中降钙素原（PCT）的含量。依据：《降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）产品技术要求》文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控2目录1.生产工艺流程图2.试剂卡制备生产工艺3.质量控制点4.主要原辅料、包装材料消耗定额、能源消耗定额、物料平衡的计算方法5.包装要求、标签、说明书(附样本)与产品贮存方法及有效期6.设备一览表7.技术安全及劳动保护文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控31.PCT生产工艺流程图羊抗兔IgG抗体鼠抗PCT抗体包被液配制（C线）包被液配制（T线）划线（NC膜）BSA及其他化学试剂贴膜组装探针稀释液配制样品垫制作#★BSA及其他化学试剂样本稀释液配制分装★切条样品垫处理NC膜干燥#★压卡装袋贴签、组装成品检验烧数据卡化学试剂不合格合格入库不合格品控制不合格十万级洁净区十万级洁净区干燥环境#★：关键工序◇：质量控制点#：湿度≤30%半成品检验十万级洁净区干燥环境#不合格品控制合格合格兔IgG抗体微球偶联物鼠抗人PCT抗体微球偶联物BSA及其他化学试剂样品垫处理液配制不合格品控制探针配制....半成品检验半成品检验不合格品控制不合格合格标准曲线制作万级洁净区不合格文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控42.试剂卡制备生产工艺2.1工序一：样品垫制作2.2工序二：ＮＣ膜制备2.3工序三：样本稀释液制备2.4工序四：贴膜组装2.5工序五：切条2.6工序六：压卡装袋2.7工序七：烧数据卡2.8工序八：降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）试剂盒组装2.1工序一：样品垫制作2.1.1探针稀释液2.1.1.1标准配方名称物料名称配制1000ml使用量75人份使用量探针稀释液三羟甲基氨基甲烷2.4228g0.12ml调节PH=8.4±0.2蔗糖150g牛血清白蛋白5g吐温-205mlProclin3000.3ml纯化水定容至1000ml2.1.1.2配制方法按照标准配方准确称取三羟甲基氨基甲烷2.4228g，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在8.4±0.2范围内，再依次加入蔗糖150g、牛血清白蛋白5g、吐温-205ml、Proclin3000.3ml，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml。混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。2.1.2样品垫处理液文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控52.1.2.1标准配方名称物料名称配制1000ml使用量75人份使用量样品垫处理液十二水合磷酸氢二钠5.73g40ml二水合磷酸二氢钠0.62g调节PH=7.4±0.2纯化水定容至1000ml2.1.2.2配制方法按照标准配方分别准确称取十二水合磷酸氢二钠5.73g、二水合磷酸二氢钠0.62g，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7.4±0.2范围内，将充分溶解并调好pH的溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。2.1.3样品垫制作2.1.3.1样品垫处理(1)将玻璃纤维平铺到水平槽内，倒入足量样品垫处理液，应让玻璃纤维完全浸泡入样品垫处理液中；（2）浸泡至少15分钟，保证玻璃纤维完全浸透，玻璃纤维表面无气泡；（3）玻璃纤维浸透后，将玻璃纤维取出，45度恒温干燥4-6小时；（4）干燥完成后4～30℃封存备用，有效期7天。2.1.3.2样品垫制作（1）处理后的样品垫裁切成29mm宽度；（2）兔IgG抗体微球偶联物：鼠抗人NT抗体微球偶联物：探针稀释液=1:3:20的比例配制探针溶液；（3）按4μl/cm喷量，将配制好的探针溶液均匀喷点到已裁切的样品垫上。（4）在45度恒温干燥、湿度小于30%的环境下干燥4-6小时。注：干燥湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在30%以下。（5）干燥完成后4～30℃封存备用，有效期14个月。注：干燥后应避免长时间放置于4～30℃环境。2.2工序二：ＮＣ膜制备2.2.1包被液2.2.1.1标准配方文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控6名称物料名称配制1000ml使用量75人份使用量包被液磷酸氢二钾1.82g0.06ml二水合磷酸二氢钠0.22g氯化钠8.76g调节PH=7.2±0.2蔗糖30g纯化水定容至1000ml2.2.1.2配制方法按照标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g、氯化钠8.76g，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7.2±0.2范围内，再加入蔗糖30g，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将充分溶解并调好pH的溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀4～30℃保存备用，有效期7天。2.2.2C线包被液使用包被液将羊抗兔IgG抗体稀释成终浓度为1mg/ml。充分混合后保存备用。注：现用现配2.2.3T线包被液使用包被液将鼠抗人PCT抗体稀释成终浓度为1mg/ml。充分混合后保存备用。注：现用现配2.2.4NC膜划线（1）按左图所示，将PVC底板摆好；除去PVC底板中间25mm处的保护纸，沿上面保护纸的下边缘，将硝酸纤维素膜（NC膜）贴在该区；注：1.粘贴上下边缘与相邻区上下边缘齐平；2.粘贴时注意动作轻柔，避免用手直接按压硝酸纤维素膜（NC膜）表面。（2）贴吸水滤纸：按27mm的宽度将吸水滤纸切割成条，除去PVC底板上端25mm处的保护纸，将切好的吸水滤纸贴在该区；注：吸水滤纸下边缘超出该区2mm覆盖硝酸纤维素膜（NC膜）；上边缘与底板边缘齐平。（3）使用划线包被机按照1μl/cm包被量将C线包被液及T线包被液包被至NC文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控7膜适当位置；（4）C、T线区域间距应调节足够宽度以保证检测仪可以显著区分，习惯上C线距NC膜上边缘距离为10mm，CT线之间间距为6mm，T线与NC膜下边缘间距为9mm。注：1、贴膜和包被过程应注意避免膜的污染。2、划线时的湿度条件是NC膜制备的要点之一，湿度应控制在45％～65%。3、制备前需将C线包被液、T线包被液与硝酸纤维素膜（NC膜）平衡至相同温度。2.2.5NC膜干燥将包被的NC膜放置在相对湿度≤30%(环境温度18℃～26℃)条件下干燥。NC膜干燥时间至少6小时。干燥完成后封存备用，有效期14个月。注：1、干燥时，湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在≤30%。干燥后应避免长时间放置于4～30℃环境。2.3工序三：样本稀释液制备2.3.1标准配方名称物料名称配制1000ml使用量75人份使用量样本稀释液磷酸氢二钾1.82g22.5ml二水合磷酸二氢钠0.22g氯化钠8.76g调PH至7.4±0.2S910gProclin3000.3ml牛血清白蛋白5g2.3.2配制方法按照标准配方分别准确称取磷酸氢二钾1.82g、二水合磷酸二氢钠0.22g、氯化钠8.76g，放入洁净烧杯中，加纯化水800ml，放入1个洁净的磁力搅拌子，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，使用多参数测试仪测量PH值应在7.4±0.2范围内，再依次加入S910g、Proclin3000.3ml、牛血清白蛋白5g，置磁力搅拌器上搅拌至充分溶解后，将溶液缓缓倒入容积为1000ml的容量瓶中，用纯化水反复冲洗3次烧杯，所有溶液倒入上述容量瓶中，用纯化水定容至1000ml，混合均匀后4-30℃保存备用，有效期7天。2.3.3分装文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控8将上面配制好的样本稀释液按照300μl/支的装量进行分装，4-30℃条件下保存，有效期12个月。2.3.4标签打印、贴签2.3.5质控项目和标准项目标准外观样本稀释液为无色透明液体，无悬浮物及沉淀物。净含量样本稀释液净含量应在标示值的90%～110%之间。pH在7.4±0.2范围内。2.4工序四：贴膜组装（湿度≤30%）（1）贴样品垫：将样品垫贴在已包被好的NC膜底板28mm处；注：样品垫上边缘1mm覆盖NC膜；下边缘与底板边缘齐平。（2）贴好后，应如下图所示；注：1、避免混淆是本工序的要点，确保指令、样品垫标示和包被好的NC膜三者之间的完全一致。未经清场，不2、清场在本岗位必须得到强调。3、湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在湿度≤30%。2.5工序五：切条（1）接通切条机电源，设定切条程序，设定切割宽度为4mm；（2）将大卡平放入切条机平台轨道中，正面朝上，调节切条机上的螺丝，调节卡槽宽度与大卡宽度相同按操作面板上“连动”键，开始切条；（4）将所有大卡头尾相接，慢慢放于切条机上，收集切好的条子，除去有标记（不合格）的条子。注：湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在≤30%。文件类型：技术标准文件名称:降钙素原（PCT）测定试剂盒（荧光免疫层析法）工艺规程文件编号：版本/修改状态：V1.0/00受控状态：受控92.6工序六：压卡装袋（1）装条：将切好的条子放置在底卡的卡槽内，面板加样孔位置对应样本垫；注：不得直接按压中间部位，如条子上出现划痕，按不合格品处理。（2）盖面板：将面板与底板对合，用力按压，使面板与底板吻合。（3）压卡：按《平板压壳机操作规程》压卡注：压卡时应使卡竖向排列在传送带上，并严禁将卡重叠放置。（4）装袋：将1份试剂卡、1袋干燥剂装入铝箔袋中，按《封口机操作规程》封好铝箔袋。（5）标签打印、贴签。4-30℃条件下保存，有效期12个月。（6）质控项目和标准。项目标准线性范围试剂的线性范围为（0.1-60）ng/mL，在此线性范围内，线性相关系数r应不小于0.990。准确度回收率在85%～115%之间。注：1、避免混淆是本工序的要点。确保指令、包装物标示和待包装产品三者之间的完全一致。未经清场，不得包装不同批号、规格、品种的产品。2、清场在本岗位必须得到强调。3、湿度的控制是本岗位的工艺要点之一，湿度应控制在≤30%。2.7工序七：烧数据卡2.7.1产品校准品赋值用PCT工作校准品检测我公司的PCT试剂，使用10个