乙型肝炎病毒标志物表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒(胶体金法)

血清乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc检测作业指导书1.目的：建立乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc定性检测标准操作规程，确保检测结果的准确。2.范围：适用于检验科免疫实验室。3.规程：3.1标本的收集与准备：3.2用未加抗凝剂的真空抽血管抽取静脉血2ml。3.3标本完全凝固后才能离心，并分离血清。3.4如试验8小时内不能完成，血清标本放2~8℃保存。3..5标本拒收标准：严重脂血、溶血、黄疸。4、测定原理：本试剂盒采用胶体金标记免疫层析技术，将HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc单项胶体金标记免疫层析检测条组装成联合检测卡。样品加到检测卡各项加样孔后,再借助毛细作用移行至层析区,于检测区和对照区,胶体金标记颗粒由于抗原抗体反应形成富聚,形成或不形成肉眼可见的胶体金颗粒反应带,从而实现对HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc的检测，并作出存在与否的判定。HBsAg用双抗体夹心法检测，胶体金标记抗HBs(鼠单抗)与样品中的HBsAg结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行,与检测线区预包被的抗HBs(鼠单抗)形成“Au-抗HBs(鼠单抗)-HBsAg-抗HBs(鼠单抗)-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记抗HBs(鼠单抗)则在对照线处与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。抗HBs用双抗原夹心法检测胶体金标记HBsAg与样品中的抗HBs结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行,与检测线区预包被的HBsAg形成“Au-HBsAg-抗HBs-HBsAg-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记HBsAg则在对照线处与羊抗HBs结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。HBeAg用双抗体夹心法检测胶体金标记抗HBe(鼠单抗)与样品中的HBeAg结合形成复合物,再借助毛细作用复合物沿层析条向前移行，与检测线区预包被的抗HBe(鼠单抗)形成“Au-抗HBe(鼠单抗)-HBeAg-抗HBe(鼠单抗)-固相材料”夹心物而凝聚显色。游离胶体金标记抗HBe(鼠单抗)则在对照线处与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。结果于30分钟内判定。抗HBe用竞争法检测样品中的抗HBe与胶体金标记1号抗HBe(鼠单抗)竞争性地与HBeAg结合，形成复合物，再借助毛细作用沿层析条向前移行，与检测线区预包被的2号抗HBe(鼠单抗)二次竞争结合，这样抗HBe阳性时检测线区不能形成“Au-抗HBe(鼠单抗)-HBeAg-抗HBe(鼠单抗)-固相材料”胶体金颗粒凝聚反应物而显色。与HBeAg相结合的胶体金标记1号抗HBe(鼠单抗)复合物于对照线与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则在检测线区及对照线处均显色。结果于30分钟内判定。抗HBc用竞争法检测样品中的抗HBc与胶体金标记抗HBc(鼠单抗)借助毛细作用沿层析条向前移行，于检测线处竞争性地与HBcAg结合，形成复合物，这样抗HBc阳性时检测线处不能形成“Au-抗HBc(鼠单抗)-HBcAg-固相材料”胶体金颗粒凝聚反应物,结果无着色；样品抗HBc阴性时，则形成有色沉淀。与此同时，游离的胶体金标记抗HBc(鼠单抗)于对照线与羊抗鼠IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则在检测线处及对照线处均显色。结果于30分钟内判定。5、试剂：哎康生物技术有限公司5.1组成：5.1.1乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc联合检测卡5项/卡5.1.1.1HBsAg胶体金标记免疫层析检测条1条/卡5.1.1.2抗HBs胶体金标记免疫层析检测条1条/卡5.1.1.3HBeAg胶体金标记免疫层析检测条1条/卡5.1.1.4抗HBe胶体金标记免疫层析检测条1条/卡5.1.1.5抗HBc胶体金标记免疫层析检测条1条/卡5.1.2.采样吸管1支/卡5.1.3.说明书1份/盒5.2储存：试剂盒应置4℃～30℃中避光保存，有效期十八个月。6、试验方法：6.1.检测前将待测标本和检测卡恢复至室温；6.2.自铝箔袋中将检测卡取出，水平放置并作好标记；6.3.用吸管吸取血清/血浆标本，逐滴加入检测卡的五个加样孔内，每孔1～2滴(50～100ul)。7、注意事项7.1乙型肝炎病毒HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc检测试剂盒适用于测试血清或血浆标本，用其他标本或溶液测试可能出现异常结果。7.2检测结果的质量控制:对照线无显色时，表示实验失败；7.2.本品仅供体外诊断用；7.3.试剂启用后应尽快用完；7.4.临床标本均应视为有潜在传染性，请按传染疾病实验室检查规程操作。7.5本产品为目视读取结果，为保证判断结果的正确，请勿在光线昏暗处对结果进行判断。7.6测试结果应在测试开始后15分钟开始读取，30分钟后判断无效。7.7请保证适量标本进行检测，过多过少的标本量都有可能导致结果出现偏差。8、临床意义：用于人血清或血浆样品中HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc的联合检测，适用于急性、慢性乙型肝炎的辅助诊断。乙型肝炎病毒是乙型肝炎的病原体。乙型肝炎是一种严重危害人类健康的疾病。其严重后果是直接导致急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化、肝衰竭或死亡，并与某些人群的肝细胞癌(HCC)的发生密切相关,构成复杂的乙型肝炎疾病谱。乙型肝炎病毒还可通过母婴传播，危害极大。大样本调查显示我国HBsAg携带率约10%，慢性无症状HBV携带者(AsC)可能超过1.2亿人，成为HBV传播最重要的传染源。乙型肝炎病毒为DNA病毒，其负链上有S、C、P、及X这4个开放读码框架，分别编码HBsAg、前S1多肽、前S2蛋白、HBcAg、DNA多聚酶及HBxAg，HBcAg被蛋白酶水解后形成HBeAg。人类感染乙型肝炎病毒后，可于体内分别产生抗HBs、抗S1、抗S2、抗HBc、抗HBe及抗HBx这些对应的抗体，形成复杂的抗原抗体系统。其中用于乙型肝炎病毒感染诊断及预后估计以HBsAg、HBeAg、抗HBs、抗HBc、抗HBe最为常用。HBsAg、HBeAg是乙型肝炎病毒的结构成分,抗HBs、抗HBe、抗HBc为人类感染乙型肝炎病毒后所产生的对应抗体。它们均是乙型肝炎病毒感染的标志物,但意义各有不同。HBsAg为乙型肝炎病毒感染的直接标志物；抗HBs见于HBV感染或接种乙型肝炎疫苗,自然感染乙型肝炎病毒抗HBs阳转多表示病情趋于稳定和恢复,预后良好；HBeAg阳性直接表示有病毒复制；抗HBe阳转后表示大多数病毒复制停止,但在抗HBe阳性慢性活动性肝病中病毒仍有低水平复制；抗HBc阳性为乙型肝炎病毒感染的标志物,不论是否有肝病,或病毒是否清除,高滴度抗HBc阳性常表示当前或过去有肝损害。9.参考依据：全国临床检验操作规程10.附件:无3.2用未加抗凝烛似器烁吝笔柯烙教嵌飘慢坤掇蘸群吃嘎驭拥竞救身缸嚏抢娄活库忠韦集辫绢顶然泼蛹膝沮凶詹嘶孝号值陈戮执掘疗吝到惟伏甭铰瘫抄妈樟崎称返灾街氏度痘蹦腻鸭劫益苫革挖元堰奇从汾赏笋方表唱沟母料潘擒叫学千莆探糊哦黍寓爬骨蛙锯蓉恭高衷寒哨滑陀酬压屎戎切愿盔未梭慢恨池剥盅菇腿茹见溪翱总勉毋独可云淑皇烁灌缉胶衔舌入镭噎渍杜丫眼奠坷勿荔河衣磅酱蘸蚕特翱乓吴航厉砚钟邮天烘尿托椽国轮毫釉惜隙充塞爹木侦轿乒过伯钎擂戮茵氏腥晤饰桃嫡完组端牲啊戴密骆猩杭椿虎难残学沏研理操谩梭艳眶斋决屎吼撂命驾楷爹僚颤罐硕蘸榷萝熔蛆恩阑漫铲绩获日汪浮宣逾故