PCB153、p,p’-DDE单独及联合对新生期大鼠甲状腺激素的

分类号学号D201078103学校代码10487密级博士学位论文PCB153、p,p’-DDE单独及联合对新生期大鼠甲状腺激素的干扰作用及机制探讨学位申请人：严茂胜学科专业：劳动卫生与环境卫生学指导教师：杨克敌教授答辩日期：2013年5月ADssertationSubmittedtoHuazhongUniversityofScienceandTechnologyfortheDegreeofDoctorofMedicineEffectsandmechanismsofneonatalexposuretoPCB153and/orp,p'-DDEonthyroidhormoneinratsCandidateforPh.D.:MaoshengYanAcademicAdvisor:Prof.KediYangHuazhongUniversityofScienceandTechnologyWuhan,Hubei,430030,P.R.ChinaMay,2013本课题由如下基金资助国家自然科学基金“MAPK信号转导通路在PCB-153和p,p'-DDE致下丘脑-垂体-甲状腺轴功能紊乱中作用的分子机制研究”（项目编号：30972436）独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已标明引用的内容外，本论文不包含任何其他人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在______年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日目录中英文缩略词表.....................................................................................................1摘要.....................................................................................................................3Abstract...................................................................................................................8前言...................................................................................................................14第一部分、PCB153和p,p’-DDE单独及联合染毒对大鼠甲状腺及甲状腺激素的影响...................................................................................................................171材料和方法................................................................................................172结果............................................................................................................223讨论............................................................................................................384小结............................................................................................................41第二部分、PCB153和p,p’-DDE单独及联合染毒对甲状腺干扰机制探讨..421材料和方法................................................................................................432结果............................................................................................................513讨论............................................................................................................734小结.............................................................................................................79结论...................................................................................................................80参考文献...............................................................................................................82综述...................................................................................................................94博士研究生期间工作小结.................................................................................110致谢.................................................................................................................111华中科技大学博士学位论文1中英文缩略词表Abbr.FullinEnglishFullinChineseAcryAcrylamide丙烯酰胺ANOVAAnalysisofvariance单因素方差分析CYPCytochromeP450细胞色素P450DDeiodinase脱碘酶DDTDichlorodiphenyltrichloroethane滴滴涕DEPCDiethylpyrocarbonate焦炭酸二乙酯ECLEnhancedchemiluminescence增强化学发光ELISAEnzymelinkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附剂测定实验ERKExtracellularregulatedproteinkinases细胞外调节蛋白激酶FT3FreeTriiodothyronin，游离T3FT4FreeThyroxine，游离T4GSH-PXGlutathioneperoxidase谷胱甘肽过氧化物酶HPTHypothalamic-Pituitary-Thyroidaxis下丘脑-垂体-甲状腺轴HRPHorseradishperoxidase辣根过氧化物酶MAPKMitogen-activatedproteinkinases丝裂原活化蛋白激酶MCT8Monocarboxylatetransporters单梭酸转运蛋白8MDAMalondialdehyd丙二醛mRNAMessengerRNA信使核糖核酸NACN-acetyl-L-cysteineN-乙酰-L-半胱氨酸NCNitrocellulosemembrance硝酸纤维素膜NISSodiumiodidesymporter钠/碘转运体ODOpticaldensity光密度值PCB1532,2’,4,4’,5,5’-hexachlorobiphenyl，2,2’,4,4’,5,5’-六氯联苯PCBsPolychlorinatedbiphenyls多氯联苯PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应华中科技大学博士学位论文2PNDPostnatalDay出生后天PNTPlacenavigationtest定位航行实验POPsPersistentorganicpollutants持久性有机污染物PMSFPhenylmethylsulfonylfluoride苯甲基磺酰氟p,p’-DDE1,1-dichloro-2,2bis(p-chlorophenyl)ethylene滴滴伊ROSReactiveoxygenspecies活性氧RTReversetranscriptase逆转录RT-PCRReal-timePCR实时荧光定量PCRRXRRetinoidXreceptor视黄醇类X受体SDSprague-Dawley斯普拉格道来SDSSodiumdodecylsulfonate十二烷基磺酸钠SODSuperoxidedismutase超氧化物歧化酶SPTSpatialprobetest空间探索实验T3Triiodothyronin三碘甲腺原氨酸T4Thyroxine四碘甲腺原氨酸TDCsThyroiddisruptingchemicals甲状腺干扰物TEMEDTetramethylethylenediamineN,N,N’N’-四甲基乙二胺TGThyroglobulin甲状腺球蛋白THsThyroidHormones甲状腺激素TPOThyroperoxidase甲状腺过氧化酶TRThyroidHormonesReceptor甲状腺激素受体TRHThyrotrophin-releasinghormone促甲状腺激素释放素TrisTris(hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷TSHThyroidstimulatinghormone促甲状腺激素TT3TotalTriiodothyronin总三碘甲腺原氨酸TT4TotalThyroxine总甲状腺素TTRTransthyretin转甲状腺蛋UGTsUridinediphosphateglucuronosyltransferases尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶华中科技大学博士学位论文3PCB153、p,p’-DDE单独及联合对新生期大鼠甲状腺激素的干扰作用及机制探讨博士研究生：严茂胜导师：杨克敌教授摘要甲状腺干扰物（Thyroiddisruptingchemicals，TDCs）是指能够作用于下丘脑-垂体-甲状腺轴或直接作用于甲状腺激素受体（ThyroidHormonesReceptor，TR），影响体内甲状腺激素（ThyroidHormones,THs）代谢及作用的外源性化合物。PCB153是生物和人体组织中含量最高的PCB