DAB染色方法

1.DAB显色液配制10mMTris-HCl(pH7.6)9mL+DAB(diaminobezidin3，3-二氨基联苯胺)+0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,显色时加入5-10mL30%H2O2混匀后立即使用2.显色准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗（或生物素）处理、辣根过氧化酶（HRP）标记的二抗（或链霉亲和素）处理、清洗等步骤。3.加入适量的DAB显色液，铺满整个固相膜表面（可按比例增减）。4.置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2至5分钟，避免光照（暗室操作），直至棕褐色沉淀出现。5.用镊子夹起固相膜，放进无离子水里清洗。6.空气中晾干。7.拍照记录。