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平顶山博爱妇产医院规范认真负责0375-3658228医院地址:新华路与建设路交叉口东50米路北(人民商场东)生殖内分泌诊断技术第一节病史与体格检査(一)ft史采集年龄:了解生殖内分泌疾病的范明-f眘期(性发育异常、功血.闭经):疗龄期(月经失调、不育h围绝妗期(月经失闲、功血h绝经期(绝经.后症状.反复泌感、反复阴道炎、骨质疏松);现病史:发病经过(治疗经过、检丧、用药.疗效月经史:初澜年龄.周期、经期天数、经ft,痛经有无、末次月经和前网次月经a桥史:来婚(是否有性牛活).初蝌、洱》。孕产史及》嗲:孕次产次、生产方式.末次终止妊振时问、避孕既往史:妇抖疾病(子宮肌頌、拔腔炎.内瞑异位症):内分泌疾病(甲状滕功能亢进.甲状膝功能低下.糖尿病、肾卜.腺呔病);其他疾病(》脒炎.站核、阑尾炎手术等)。家胙史:糖味病、高血压病.家咏遗传病等,(二)体格构s一舣检ft:身A,体重,体東指数.乳洲及脐下有无长毛、痤疮、泌乳。第二性征发育:乳房发菏(I-V级〉•阴毛(丨~¥级>.嘛毛。科柃fi:外阴:阴蒂大小、大明拆融合•,阴道:通杨,盲蹦.横隔;宮辣:闭锁.糜亡、息肉;子宫:大小、位霣.软《、活动;W件:包块、压痛;三合沴:有X宮K轫带触痛钻势。第二节基础体温測定(一)原理单础体温(basalbodyIrmpcmturc,BBT)&机体维持在爵基本活动亦即靜息悄况下所产生的溫度。成年妇女受卵巢分泌性激累的影响而波动,排卵后卵巢所分泌的孕酮作用于下丘脑体温中枳使萆础体ffll升离0.3〜0.6T,因此有正常排卵功能的妇女,于月经周期中排卵舫后根据所分泌孕_浓度的不1«)彤成基础体溢发生相应变化,即卵泡期低水平而黄体期高水乎的双相基础体海,,(二)测定与记录方法»眠6-8小时后立刻涮峨.不能起床.讲话;嫌前甩到361:以下;体騙表放在枕边伸手钛拿到的地方;体温表放在舌下»鼉:记录月经出血.性生活;记录*ff、迟_、失岷等影晌体温的悄况:记录用药悄况,用普通水银体斟计.用专用的蘂絀体湿记录表格。(三)基細体a的®床应闬及慝义其有正常排卵功能的育龄妇女的幕础体溢保持它特有双相曲线规律,因此临床I:可以此作为标准来诊断相成的月经失调疾病M时可鉴别诊断是功能性还是器质性月经失调。1.掌拥排卵期可为避孕或为+角患孜#找易受孕期。2.了解卵巢功能指牙和提典月经失调与不存的诊断和治疗。如月经失谰晤排卵®的还是无排卵a的;黄体功能是否不全等a3.鉴别月经失调与器质性病变患者中有基础体温?i相伴有器质性病变荇.从《硇体s曲线与汍血的关系提示有进一步检奄的必要性,以排除明进.子宵效和宮胶的病灶。4.提商对早早孕的沴断宇•和对飧产期的准瘸性。5.治疗不育症患者时用于促排卵葯物治疗后效果的观察。第三节阴道脱落细胞涂片细胞学检查(一)患义阴iff脱落细抱主要来0明道上皮的鳞状细胞.阴道起源于副中肾管.Kh皮对性激隶持別敏感,对雌激家》敏«>最緻感的郎位是在穹隆与阴道ft后蜻,子H預外U水平线上。雌激*使t皮增咩.细胞成熟.脱落细胞的成熟度被用作反映鰭激家水平•的指标,孕激聚的怍用.主要玷在醵激索作用的单碓上表现脱落细胞的形态和細胞之间的关系.ta皱褙、枪聚—292-第三裔生殖内分泌(二〉鳞状拥炮的形恋正常成人妇女的阴遒黏嗔由复层鱗状上皮烟抱所祖盖.共分3底屉.中间塏和衣G即功能层.后杏为觖成熟层。脱落细狍按成熟程度分类如下,并用颗序法个部位以数7衣达之,例如成熟指数即为眹层细胞数/中层细胞数/去层细胞数。1.表层细胞多边形,细胞质较红染.细胞该致密,是最成熟的细胞。2.中屎细狍镧圆形.圆形或舟形.后者边缘色较深,细胞质较亮.捆狍核常«向一侧。3.底层细胞细狍质彘染.色深于中层细狍,细抱核位于细胞中心(三)评足雌激累彩响程®的标准雌激京主要使阴道黏胶匕皮增生,致使脱落细胞舴中成熟细胞数I*相应的增多.成熟指数右移向于0/0/100,片上细胞分敝,平坦.无卷边,背扶确沽yI.较度影响表呍钿鼸教fr20%以下,为V期卵泡期的雌激隶水芊。2-屮度影响表S细跑教占20嚷-60%,其低值接近和泡期中期水平,其A值接近撙卵期的雜激家水平。1.A度影响表层细胞占60%以上,一般超过排卵期水平。(四)对卵巢功能低下的评价1.轻*低下底层细胞少于20%。2.中度低下底层细狍占20%-40%。3.高度低下底6细鰌>40%。(五)取标本注憲事助1.避免性生活、阴M冲洗或涂药1-2天。2.涂片未T-前即放人IA1定液内,固定液的乙耵浓度须保持在95%以卜.。3.器械用具要消电、淸沽、T-燥,尽墩少用或+用润滑刑,以免细胞溶解或被破坏。4.制片时须注意甩薄均匀,不宜太厚而无法读片。5.褊连续读取片时.宜用间一种取样法.tt于片与片之间的比较a第四节生殖内分泌激素测定及功能试验•、生《内分泌激*测定(-)常用蒯定方法1-土物测定法昆传%的涮定//法毕足根挞米成麫动物的器宵反设濟第Ji.琪4:飱内分泌诊断技术293定激累的生物活性,优点是直接反映激窠的生物活性,缺点是定M测定常霱大M的牛物鉍本,R/+.物器官反敁的差异性使梢磯度和灵敏度受限制yiw很少采用&2.免疫M定法貝:有高度的柃异性和緻感性,是g前最常应用的方法。该法分两种:轚聚免疫法和标记免疫法。标记免疫测定法的灵敏度和柃异性实现了傲B和超傲1澜定。fi单的标记&用放射性枝家,称放射免疫分析法(mdioirrnnmu^Hay.RIA),随着技术的史新发W.现在更多地采用非放射性免疫测定.根据柝记的+同,分为荧光索你记的荧光免疫分折(fluoroimnmmmwy.nA〉、化学1发光物质标iC的化学发光免疫测S(chemiluminescenceimmunoassay,C1A)及(W肤免疫测定法(enzymeimmum^y.EIA)0非放射性免疫測定无放射性按家污染的问皤,而QC1A的发光标id物很松定.样本用S很少.具高度彳敏度和吋重复性,至少岈检涮到KT-10wmol/L,因此优于RIA,而广泛的应用于临床紙(二)国际®位制的»索浓R表示法在医学激*测定方面.根据能片得到«确测到的相对分子质》及能否得到纯化标准品,采用两种国际单位制UylcmcimCmalKmal,Sl)的浓度表示法。1.W浓度(mol/L)“物吒的M”的SI单位是摩尔(mol),即“质研”以克U)计,等于相对分子质M或相对陬子质M的窗,体积基准单位统一用升(U,以mol/h表示a旧制单位的质&浓度向SI坩浓度(mol/L)的转换.根据相对分子质1砑出转换系数。将旧制浓度中位转换成S际单位制.乘以转换系枚;将W际单位制转换成旧制隼位的®W浓吹则除以转换系数,儿种常W•生飧内分泌*索的转禊系败:H二ff(E^UW单位(畛⑷国际单位fcj(pmol/L>系数为3.67:孕《(P>旧制单位(ng/mU负位W(»mol/L>系数为3.18;擊絹(T〉旧制珀位<ng/mUS际单位制(《nol/L>系教为3.47。2.S呩单位浓度(IU/U牛飧内分泌激累中的FSH,LH、HCG«于较椎纯化的泔白质激家,目前采用世界li生纟H织WHO提供的杈准参照WW来WW,I.H.FSH的网际标准品参照制洲(inlrnmlimmlrvterencepmpaniiinri,IKP)是从绝纾妇女尿中提取的促性腺激素(HMG>,【^阽单位表示的足囷私标准所确定敢最屮所a有的生物活性。LH、KSH免疫测定结果则表示为每升w拉单位(ai/L)。HO;的mp是从早孕妇女尿中提取的=第Ji.琪4:飱内分泌诊断技术294C三)芏播内分泌*索测定的B床©用I.类凼薄激索(雌、孕、罐激京)i飧内分泌激索中的雌、孕、雄激求均颺于类(MW*家,其基本结构是环戊烷多氡菲环.主要由卵巢分泌.抒上輾有少ft分*。蠓二蘼及寒酮在循环屮大部分与性激素结合蛋白结合,少部分与d蛋d疏松结合.仅游离;孕激系及皮质醇于皮《醇结合蛋白结合,激家的1:物活性取决〒游离形式的激衆;免疫》定的是激索的总浓度,即结合加游离部分定游离的撖二醉及皮质睜则需要特殊方法,1•分复杂,目前临床上较少应用。(1)雌激素:耀*索包板雌二_(estradiol,E2),釀_(orfrone,E,)和衊三醉U*tri0l,t:3)。雌三醉是E2*E,的代谢产物。绝经前及绝经后循坏中雌激家的来源和种类不同,绝经前雌激家主要宋源于卵电,分泌缳取决于卵泡的发育和铒体功能,绝经后雌激索主要虻E,,且基丰上来自雄烯二酮的外阇转化aE,水平约为H0pmol/L(30p«/i«.l)fEa灼为53p«ol/LU5p^ml,E,来自E_的转化。H前临床上通过相定E,来了解功能、测定E2的临床意义,E:为青春期启动及诊断件曱-熟的激素标志之一,也是评价卵巢功能的重要激素栴标之一,生飱内分泌的各种疾病基本都涉及蟫::W,是沴断治疗生殖内分泌疾病的重费激家《临床上主要测定雌二醉水平。(2)孕激累:循环中孕激素包括孕职和17•羟孕酮。孕酮具生物话性,17•羟孕WX生物沾性。孕酮主要产自卵犋和駙激.少t由肾上腺分泌,四疗#期.绝经期及成年期月经周朗的卵泡期血浆中水子均在免疫涮定敏感*的低限,3.2nmoi/La卵祺背iJft分泌各占一半。栉卵后黄体产生大量孕酮.血浓度迅速h升;在中期LH峰后6-8天,ltl浓度达布峰.为16~64nmol/L,月经舫4天逐漸下降到卵泡明水平。临床上主要灣定孕《,用于判断有无排卵及评佔黄体功能》(3)雄啪索:女件循环屮主要有4种雄激家即寒酮(T).雄烯二(W(AK脱氢表榱《(IHKA)和它的疏酸盐(I3HEAS)。寒明的雄激:f话性M商,约为雄烯二酮的5~10侪.为DHEAS辆20倍9绝绶前,卵抱分泌的SgftN占循环中总M的50%;由雄烯二酮的外周转化占50货。女性血浆塞酮水平在0.7-2.大约70%寒w在血液中与SHBG结合,s游离形式2%,余均与dam绾合。绝%妇fc.拷上腺是产生雄激素的主饜郎位,产生的睾酮和雄烯二_分别占循环中总*的1/2和2/3,其余部分来進网坧和门钿胞,绝经后女寒《、銪烯二IW、脱氡表罐酮和DHEAS的水平杓为绝经前的一半。临宋主要测定m清中的总#酮.总*酮是某些月经失瑚及激家体征,如多毛、痤疮及阴镥增大,音典变粗.肌肉发达等的病因诊断和祺别沴断的tc•检査内容,2.肽类激家(I)促性脒激家:包括FSH、LH和胎盘分泌的HCG。均为糖蛋白激*,有a业萃和P砍基组成,具有很强的免疫活性。现多采用单克降抗体的免疫测定.邂ftr檐激家因《亚基相同在采用多兑降抗体*定时的交叉免疫反应。FSHfflLII的分泌圼収相型,即较稳定的*絀分泌伴柃发性脉冲分泌;LH的脉冲分第五章生殖内分泌诊哳技术一295••••••••••t•••••••籲参••••春參•參籲•參»••參《•••••••••♦••曹••籲••••《«••费••••••泌约为90-120分钟一次,而「別1脉冲波动较小。正常月经周期的卵泡期FSH和LH浓度分別波动在10IU/L和20IU/L以下;排卵的的短时间,由于大gE2的正反馈,FSH和LH有一个峰性分泌;LH上升的幅度约为卵泡期基础水平的8倍以上.而FSH上升呤值明S低于LH,很少超过30IU/L。排卵后,循环中的FSH和LH处于低水平。FSH和LH的测定对于靑春期启动的判断.鉴别中枢性或卵泡性性腺功能低下闭经以及预测排卵等具有重要意义。(2)催乳索:催乳家(prolactin,PRU主要由垂体的催乳索细胞分泌。其生物活性土要功能为生乳作用,其免疫活性即免疫测定的PRL水平与其生物学作用不一定平行,如PRL正常者有溢乳,而高PRL者可无溢乳。非妊娠期的PRL正常水平为10-25P&/I.,PRL的测定常用于诊断岛PKL血症的月经失调或生殖功能陳碍及多毛症病因的鉴别等。溢乳症者应常规检査PRL。二、生®内分泌功能试验(一)GnRH兴奋试验检査垂体及FSH的储备功能&方法:静脉注射GnRH100叫(10肽).在注射前及注射后30~60分钟取血2ml,测定FSH及I.H水平。结果判断:正常反应:注人GnR
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