蔗糖含量测定

蔗糖含量测定1实验仪器：分光光度计，恒温水浴锅，电子天平，烘箱，刻度离心管，带塞试管，漏斗。2实验试剂：2mol/LNaOH(80g/L),30%HCl，蔗糖标准液（取100mg蔗糖用80%乙醇配成500mL溶液，即得200g/mL标准液），间苯二酚溶液（0.1g间苯二酚溶液于100mL95%乙醇溶液，棕色瓶内保存）。3实验材料：各种植物叶片或种子。4实验步骤：（1）制备提取液：植物叶片或种子，在110℃烘箱烘15min，然后调制70℃过夜。干叶片磨碎后，秤取50mg样品倒入10ml刻度离心管内加入4ml80%乙醇，至于80℃水浴中不断搅拌40min，离心，收集上清液，其残渣加2ml80%乙醇重复提2次，合并上清液。在上清液中加10mg活性炭，80℃脱色30min80%乙醇定容至10ml，过滤后去滤液测定。（2）标准曲线制作：取蔗糖标准液用80%乙醇稀释成系列（0,10、20、30、40、60、80,100g/ml）浓度的溶液。分别取0.4ml溶液，各自加入200微升2mol/LNaOH，100℃煮沸5min，冷却，加入2.8ml30%HCl，0.8ml0.1%间苯二酚，摇匀，80℃水浴反映10min，冷却后再480nm测定OD值，以0浓度管调零。绘制蔗糖浓度-OD值曲线。（3）测定：取提取液0.4ml，按上述步骤进行蔗糖含量的测定，读取OD值，并从标准曲线得到提取液中的糖含量，然后再进行计算样品中的蔗糖含量。（4）注意：色素对本实验影响较大。