网织红细胞计数(2014)

第二章/第一节红细胞检查六、网织红细胞计数八、红细胞沉降率测定是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞，其胞质中残存的嗜碱性物质(RNA)经碱性染料活体染色后，形成蓝色或紫色的点粒状或丝网织状物.网织红细胞（reticulocyte,Ret)ICSH分型（模式图）Ⅰ丝球型Ⅱ网型Ⅲ破网型Ⅳ点粒型对网织红细胞的描述是晚幼红细胞脱核后的未完全成熟的红细胞体积比成熟红细胞体积稍大胞浆内残存有正常核糖核酸(RNA)具有合成血红蛋白的能力核糖核酸越多，网织红细胞越幼稚外周血中主要是Ⅳ型网织红细胞网织红细胞经瑞氏染色为嗜多色性红细胞存在于骨髓与外周血中网织红细胞计数（Ret）检查外周血中网织红细胞数，可以推知骨髓产生红细胞的情况。检测原理及方法普通显微镜法（手工法）仪器法对Ret内RNA染色进行计数检测原理：活体染料的碱性着色基团（带正电）与Ret核糖核酸（带负电）结合，RNA凝缩形成蓝色的点、线、网状结构。用显微镜目测计数染色的Ret占RBC的比例。1.显微镜法操作标本：末梢血或EDTA抗凝静脉血染色：染料与血标本混合(1：1)制作薄血涂片计数（油镜）玻片法试管法普通计数法米勒窥盘法染液1滴混匀静置推片染液、血标本各一滴推片混匀静置15～20min试管法计数1000个红细胞区域内的网织红细胞数报告方式：百分数：Ret%=绝对值：Ret=RBC×Ret%%1001000网织红细胞数普通计数法Miller窥盘法%1009内红细胞数内网织红细胞数ABRet%=Ret=RBC×Ret%2.仪器法用特殊染料（荧光染料）使网织红细胞内的RNA着色，计数并计算出网织红细胞占红细胞的百分比。依据荧光强度将网织红细胞分成高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）。普通显微镜法简便，成本低，直接观察细胞形态影响因素多，重复性差仪器法精密度高，易标准化有核红细胞，巨大血小板，H-J小体使结果假性增高方法学评价染料选择（WHO推荐使用新亚甲蓝）染色技术（推荐试管法染色）正确辨认网织红细胞（含2个网织颗粒记为Ret）网织红细胞计数（Miller窥盘法）质量保证（手工计数法）百分数（Ret%）成人和儿童：0.5%～1.5%新生儿：2%～6%绝对数（Ret）成人：(24～84)×109/L参考值评价骨髓增生能力，鉴别贫血类型临床意义网织红细胞增多：骨髓造血功能旺盛，常见于溶血性贫血或急性失血性贫血。网织红细胞减少：骨髓增生低下，常见于再障。评价治疗疗效临床意义贫血治疗：缺铁贫或巨幼贫治疗有效Ret出现一个先升后降的峰。骨髓移植后监测骨髓造血恢复。放疗和化疗的监测网织红细胞的动态观察可指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。临床意义红细胞沉降率（Erythrocytesedimentationrate，ESR）规定条件下，离体抗凝全血静置后红细胞自然下沉的速率，以单位时间红细胞下沉后血浆段的距离表示。？mm血沉过程一般分为3期红细胞缗钱样聚集期，约10min红细胞快速沉降期，约40min红细胞堆积期，约10minESR对于监测疾病的动态过程是一项可靠的指标。血沉3期中，红细胞沉降的速率不同手工法魏氏法、温氏法、ζ血沉率及潘氏法,检测原理相似。差别在于抗凝剂、用血量、血沉管规格、观察时间的不同，故各种方法的参考值不同。ICSH推荐魏氏法为血沉测定参考方法魏氏法将枸橼酸钠抗凝血吸入特制血沉管内，垂直立于室温中，1h末读取红细胞层下沉的距离，用毫米（mm）数值报告。10mmESR：10mm/h魏氏血沉测定抗凝血液静置后，红细胞下降，红细胞与血浆分离，其界面随时间而下移。血沉仪用光电比浊法、红外线扫描法或摄影法定时扫描红细胞与血浆界面位置，得到血沉值并显示红细胞沉降高度H与对应时间t相关的H-t曲线。自动血沉仪法方法学评价方法优点缺点魏氏法国内规范方法，简单实用测定血沉某时刻最终结果，特异性差自动血沉仪自动化，快速化，可动态检测血沉全过程结果应与参考方法比较血浆因素红细胞因素其他因素ESR影响因素球蛋白纤维蛋白原胆固醇增多加速红细胞叠连血沉增多白蛋白卵磷脂糖蛋白减慢红细胞叠连血沉血浆成分的改变RBC叠连球蛋白贫血→RBC总面积减少，ESR↑RBC增多，ESR↓RBC直径愈大，ESR↑球形RBC增多，ESR↓红细胞数量和形状血沉管位置其他因素血沉管倾斜，血沉增快温度温度＞25℃，血沉增快，结果应校正抗凝剂用量准确：枸橼酸钠（109mmol/L）与血液之比（1：4）。血沉装置：血沉管干燥、洁净、直立；血沉架，放置平稳，不振动。血液标本：无凝、溶血，采集4h内检测。测定环境：温度18-25度，避免阳光直射。质量保证（魏氏法）参考值（魏氏法）成年男性0～15mm/h成年女性0～20mm/h生理性增快临床意义女性高于男性（纤维蛋白原高）老年人（纤维蛋白原增高）妇女月经期或妊娠3个月以上病理性增快临床意义炎症性疾病组织损伤及坏死恶性肿瘤血浆球蛋白增高的疾病自身免疫病高胆固醇血症血沉减慢（意义较小）临床意义见于红细胞数量明显增多及纤维蛋白原含量严重减低时魏氏血沉测定用于观察疾病的动态变化、区别功能性与器质性病变、鉴别良性与恶性肿瘤观察结核病和风湿热的病情变化和疗效。血沉加速，表示病情复发和活跃；当病情好转或静止时，血沉逐渐恢复。某些疾病的鉴别诊断，如心肌梗死和心绞痛，胃癌和胃溃疡的鉴别。血沉的临床应用反映所测标本中红细胞体积大小的异质程度，常用变异系数（CV）表示。由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出。比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观和准确。参考值成人：11.5%～14.5%红细胞体积分布宽度(RDW)按RDW和MCV的贫血分类法红细胞形态RDW和MCV疾病正细胞均一性RDW正常MCV正常急性失血性贫血大细胞均一性RDW正常MCV↑骨髓增生异常综合症小细胞均一性RDW正常MCV↓轻形地中海性贫血正细胞不均一性RDW↑MCV正常铁粒幼细胞性贫血小细胞不均一性RDW↑MCV↓缺铁性贫血大细胞不均一性RDW↑MCV↑巨幼细胞性贫血红细胞各参数临床应用贫血诊断贫血形态学分类依据骨髓造血功能评价动态观察疾病变化小结网织红细胞定义、显微镜计数原理？血沉测定的临床意义？网织红细胞计数的临床意义？血沉测定的影响因素？